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ANNALES

DE L'INSTITUT PASTEUR

SCEAUX.

IMPRIMERIE CHARAIRE ET FILS.

ANNALES

DE L'INSTITUT PASTEUR

(JOURNAL DE MICROBIOLOGIE)

PUBLIÉES SOUS LE PATRONAGE DE Wl. PASTEUR

PAR i

E. DUGLAUX

MEMBRE DE l'INSTITUT
PROFESSEUR A LA SORBONNE

Et un Comité de rédaction composé de MM.

CHÀMBERLAND, chef de service à l'Institut Pasteur.
D' GRANCHER, professeur à la Faculté de médecine.

NOCARD, directeur de l'école vétérinaire d'Alfort.
Df ROUX, chef de service à l'Institut Pasteur.
D' STRAUS, professeur à la Faculté de médecine.

DEUXIÈME ANNEE
1888

PARIS

G. MASSON, ÉDITEUR

LIBRAIRE DE L'ACADÉMIE DE MÉDECINE

420, BOULEVAR'D SAINT-GERMAIN
EN FACE DE l'ÉCOLE DE MÉDECINE

1888

INAUGURATION

DE

I/INSTITUT PASTEUR

INAUGURATION

DE

L'INSTITUT PASTEUR

LE 14 NOVEMBRE 1888

EN PRESEXCR DE

M. LE PRÉSIDENT DE LA RÉPUBLIQUE.

COMPTE RENDU

SCEAUX

CHARAIRE ET FILS,
IMPRIMEURS DES ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

1888

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INAUGURATION

DE

L'INSTITUT PASTEUR

Le 14 novembre 1888 a eu lien l'inauguration de l'Institut Pas-
leur, situé rue Dutot. Les maisons voisines s'étaient pavoisées comme
pour une fête nationale. Des trophées de drapeaux ornaient la laçade
de l'Institut Pasteur, bâti en briques et en pierres, dans le style
Louis Xin. On lit sur le fronton : « Souscription publique 1888. » Tout en
étant monumental, l'aspect de l'édifico est simple, sans ornementation
et sans sculpture. On accède au bâtiment principal, qu'une grille et un
terre-plein de gazon séparent de la rue, par dix marches qui condui-
sent à une grande porte d'entrée. Une galerie intérieure relie ce bâti-
ment aux deux ailes où seront installés le service du traitement de la
rage et tous les laboratoires d'enseignement, de recherches et d'études.

Dès midi, les portes étaient ouvertes. M. Pasieur, qui avait à ses
côtés son fils, secrétaire de l'ambassade de France auprès du Quirinal,
et son gendre, M. Vallery-Radot, se tenait sur le seuil de la salle
d'inauguration, située à gauche du perron, et recevait les invités.
L'illustre savant portait le grand cordon de la Légion d'honneur et la
plaque de grand-croix de Sainte-Anne de Russie. La salle, décorée de
drapeaux tricolores, pouvait contenir six cents personnes. Dans le fond,
se dressait une large estrade dominée par le buste de la République.
A droite et à gauche s'élevaient les bustes de deux grands souscripteurs :
le tsar et l'empereur du Brésil, puis entre les fenêtres, les bustes de
M. le baron de Rothschild et de M™" Boucicaut. Deux socles étaient
réservés pour les bustes de M. le comte de Laubespin et de M"^ Furtado-
Ileine.

A une heure et demie, M. le Président de la République, accom-
pagné du général Brugère et de deux officiers d'ordonnance, arrivait
en landau devant le perron. Il était salué par l'hymne national
exécuté par la musique de la Garde républicaine. M. Pasteur, après
avoir descendu les marches pour aller au devant de M. le Président de

6 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

la République, le conduisit clans un salon d'attente où s'était réuni le
cortège ofiiciel composé de : M. Méline, président de la Chambre des
députés; M. Floquet, président du Conseil des ministres; M. Lockroy,
minisire de l'inslrtiction publique; M. Peytral, ministre des finances ;
M. Pierre Legrand, ministre du commerce; M. Viette, ministre de
l'agriculture ; M. Bourgeois, sous-secrétaire d'EUit du ministère de
l'intérieur; M. Poubelle, préfet de la Seine; M. Lozé, préfet de police.

Le comité de l'Institut Pasteur était représenté par M. Bertrand,
président, secrétaire perpétuel de l'Académie des sciences, membre de
l'Académie française, MM. Camille Doucet, JulesSinion, H. Wallon , Dela-
borde,le baron A. de Rothschild, Christophle et le docteur Grancher.

Ainsi formé, le cortège fît son entrée dans la salle et monta sur
l'estrade où des places avaient été réservées aux sénateurs et aux
députés, parmi lesquels on remarquait : MM. Léon Say, Berthelot, de
Marcère, le comte de Laubespin, Devès, Jules Ferry, Henri Brisson,
Spuller, Lévèque, Ribot. Venaient ensuite : MM. Le Guay, sous-
gouverneur du Crédit Foncier de France ; Jourde, directeur du Siècle;
Palinot, directeur du Journal des Débats: Reinach, directeur de la
République Française ; Liard, directeur de l'enseignement supérieur;
Monod, Lavisse, Peyron, Collin, Dujardin-Beaumetz, directeur général
du service de santé des armées, E. Tisserand, directeur de l'agriculture.

Au premier rang des invités, et face à l'estrade, avaient pris place
M. le général Menabrea, ambassadeur d'Italie; M. l'ambassadeur de
Turquie; M. le ministre du Brésil; M. Kotzebue, conseiller de l'ambas-
sade de Russie. Puis immédiatement après, parmi les membres de
l'Académie française : MM. Legouvé, Dui'uy, le duc de Broglie,
Rousse, John Lemoinne, Gaston Boissier, Mézières, François Coppée ;
les membres de l'Académie des sciences : MM. Hébert, Chauveau,
Bouchard, Verneuil, Troost, Friedel, Mascart, Schlœsing, Jan.»sen,
Tisserand, Wolf, Gaudry, Cailletet, Grandidier ; parmi les membres
des autres sections de l'Institut de France : MM. Guillaume, Delaunay,
Perrot, Alex. Bertrand, Beaussire; parmi les membres de l'Académie
de médecine : MM. ITérard, président, Bergeron, Proust, Ricord, Trélat,
Guéneau de Mussy, Dujardin-Beaumetz, Villemin, Gavarret, Lannelon-
gue, le b"" Lari-ey, Rochard, Alphonse Guérin, Hayem, MathiasDuval,
Roger, Péan, A. Gautier, Féréol, Laboulbène, Laborde, Worms, Buc-
quoy, Labbé; parmi les médecins étrangers spécialement délégués
pour cette séance d'inauguration : MM. Metchnikoff, Gamale'ia,
Bujwid, Kraïouchkine, Helman.

Debout, au pied de l'eslrade, une députation des étudiants de
Paris, leur drapeau déployé, formait comme une garde d'honneur
de la jeunesse et du travail.

INAUGLRATION DE L'INSTITUT PASTEUR. 7

Plusieurs pages ne suftiraient pasà énumérer tous ceux qui, parmi
les hommes de science et les publicistes, les anciens élèves de
M. Pasteur, MM. Raulin. Gayon, Maillot, et ses disciples actuels, les
souscripteurs importants, s'étaient placés plus ou moins facilement
dans cette salle devenue trop petite. A la porte et jusque dans la
galerie se tenaient debout les hommes les plus connus, les plus
célèbres, ne pouvant entrer dans la salle et ne s'en étonnant pas.

La séance s'ouvrit et M. Bertrand prononça le discours suivant.:

DISCOURS DE M. lîERTUAXD.

Messieurs,

La tâche qui m'est échue est plus douce que facile. Je n'ai
rien à vous apprendre et les paroles me manquent pour remer-
cier dignement le chef de l'Etat, la réunion imposante et les
savants illustres qui parleur bienveillance, leur protection et leur
concours empressé hâteront nos progrès aujourd'hui certains.

Nos espérances sont grandes : je n'ai pas à les dire aujour-
d'hui. Laissons à l'avenir sa part de joies et de triomphes , le pré-
sent nous suffit; le nom de Pasteur, pour égaler les plus illus-
tres, n'a pas besoin de grandir encore.

Depuis quarante ans, mon cher Pasteur, vous laissez venir la
gloire sans la poursuivre. Entre tant de routes oii souvent on la
cherche, vous n'en connaissez qu'une, celle de la vérité. Là
comme ailleurs on peut la rencontrer, votre renommée en est la
preuve.

La date du 14 novembre 1888 restera immortelle dans l'his-
toire de la médecine. Permettez-moi, pour toute contribution à
cette belle journée, de me reporter un instant vers le temps déjà
ancien de vos premiers succès.

L'éclat de vos débuts ne pouvait frapper que les savants.
Quelques-uns seulement vous ont deviné et compris. Leurs
noms, célèbres ou illustres, recevront un éclat nouveau du
patronage empressé, spontanément offert à votre gloire nais-
sante.

En rappelant dans cette fête le souvenir de Biot, de Sénar-
mont, de Claude Bernard, de Balard et de J.-B. Dumas, je
réponds, j'en suis sûr, à vos sentiments les plus chers.

8 INAUGUllATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

Je ne céderai pas à la tentation de passer en revue le long
enchaînement des travaux admirés par de si grands juges. On
vous rencontre sur toutes les voies de la science. Je m'écarterais
du but de cette réunion en y cherchant à votre suite la trace
ineffaçable de votre empreinte.

Vos condisciples , longtemps avant vos maîtres , avaient
beaucoup auguré de vous.

Dans un rapide voyage sur les bords du Rhin, c'était eu
1847, j'avais eu la bonne fortune de rencontrer et d'associer à
mes excursions un des plus brillants élèves de l'Ecole dont
vous êtes la gloire. Curieux de toute science, savant dans l'his-
toire de l'esprit humain, Emile Yerdet savait tout comprendre.

Jugeant de haut les gloires du passé, il portait sur l'avenir
de clairvoyants regards.

Pendcint une belle soirée d'été, sur les confins de la Forêt-
Noire, nous abordâmes les plus difficiles problèmes. Encouragés
par une confiance mutuelle, nous laissions ce jour-là, quoique
sceptiques tout deux, libre carrière à nos espérances. Nous nous
demandions quels seraient parmi nos amis jeunes encore, les
mieux armés pour réaliser nos ambitieuses rêveries.

Beaucoup de noms furent prononcés, plus d'une célébrité
latente alors, fut prédite par Verdet qui ne se trompa guère ; il
me parla de son ami Pasteur. Je vous connaissais à peine. Je
n'eus pas l'occasion de vous dire au retour les pronostics de ce
jienseur judicieux et sévère.

Votre modestie, aujourd'hui mieux aguerrie, en aurait cer-
tainement souffert. Yerdet cependant faisait sur chacun des
réserves. Sur vous comme sur les autres, il conservait des
doutes. « Pasteur, me dit-il, ne connaît pas les limites de la
science. Je crains pour lui de stériles efforts ! il aime les problèmes
insolubles. » Pouvait-on^ je vous le demande^ messieurs, se
tromper avec plus de perspicacité?

Les problèmes qui, depuis un demi-siècle , tourmentent
sans repos votre esprit, ne sont plus insolubles aujourd'hui. C'est
pour vous en remercier au nom de la science, pour nous en
réjouir au nom de l'humanité, pour nous en glorifier tous
ensemble au nom de la France, que nous sommes réunis
aujourd'hui.

INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR. 9

Il était impossible de mieux résumer l'état des esprits et de dire
plus simplement de si grandes choses.

M. le docteur Granclier prit ensuite la parole et, dans un discours
que nous donnons in extenso, rendit compte des résultats de la vacci-
nation antirabique non seulement en France, mais dans le monde entier.
Au cours de cet exposé lumineux se trouve une page historique des
luttes soutenues :,

DISCOURS DE 31. LE PROFESSEUR GRAMCHEU

Monsieur le Président de la République,

Messieurs,

La communication que M. Pasteur fit à l'Académie des
sciences, le 26 octobre 1885, dans laquelle il annonçait que le
jeune Meister avait subi avec succès l'inoculation antirabique,
causa dans le monde scientifique un émoi profond. C'était, en
effet, lapremière application à l'homme d'une méthode générale
de traitement des maladies virulentes et contagieuses, et l'on
comprend aisément l'enthousiasme et les espérances des uns, le
scepticisme, l'hostilité même des autres.

Après Meister et Jupille, les blessés affluèrent en si grand
nombre, que M. Pasteur et ses collaborateurs, pris au dépourvu,
durent improviser une organisation sommaire de tous les ser-
vices accessoires de la vaccination antirabique : inscription des
malades, pansement des plaies, correspondance, etc., etc., de
sorte que l'année 1886 fut absorbée tout entière dans l'énorme
labeur exigé par la vaccination de 2,682 personnes françaises ou
étrangères, chaque personne recevant, en moyenne, quinze à
vingt inoculations. M. Pasteur sentait dès ce moment le besoin
impérieux d'un journal ou d'une revue, organe officiel du labo-
ratoire, qui publierait mensuellement la statistique des vacci-
nations; malheureusement, sa santé, sérieusement ébranlée par
les fatigues et les émotions, le força à quitter Paris avant la fin
de 1886, et \qs Annales de V Institut Pasteur, fondées par M. Du-
claux, professeur de chimie biologique à la Sorbonne, ne paru-
rent qu'en janvier 1887.

Cependant, les adversaires de la méthode de M. Pasteur ne

40 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

manquaient pas de tirer parti de notre silence, et, profitant de
quelques insuccès survenus dans le cours et à la fin de 1886, ils
racontaient çà et là que le laboratoire cachait ses morts, dont
le nombre était légion. Ils allaient même jusqu'à dire que la
nouvelle méthode donnait la rage au lieu de la guérir.

Au commencement de janvier 1887, l'Académie de médecine
fut saisie de la question, et nous pûmes enfin combattre par des
faits et par des chiffres ces bruits calomnieux qui troublaient
l'opinion publique et risquaient de jeter l'effroi parmi nos malades.
En même temps, les Sociétés savantes de Naples, de Vienne et de
Saint-Pétersbourg retentissaient du bruit de la querelle des Pas-
toriens et des Antipastoriens.

Dans ces discussions scientifiques où l'attaque et la défense
furent également ardentes, tout a été dit pour et contre la méthode
des vaccinations antirabiques ; les adversaires soutenant que la
méthode est inefficace ou dangereuse, selon les cas, les partisans
proclamant, au contraire, que la vaccination antirabique est inof-
fensive et merveilleusement efficace.

La bataille, suspendue pendant plusieurs mois, fut reprise en
juillet, en présence de M. Pasteur, qui répondit à ses contradic-
teurs avec sa vaillance accoutumée. Elle avait été provoquée par
le rapport de la Commission anglaise que M. Pasteur présentait
à l'Académie.

Cette Commission officielle, composée des savants les plus
célèbres de l'Angleterre, avec un jeune et habile physiologiste,
M. V. Horsley, pour rapporteur, était arrivée à Paris fort incré-
dule. Après une enquête approfondie des faits, elle revint en
Angleterre et répéta les expériences de M. Pasteur ; son contrôle
expérimental dura plus d'une année. La conclusion de la Com-
mission, au grand désappointement de nos adversaires, fut, je
cite textuellement : que M. Pasteur avait découvert ime méthode
préveîitive de la rage comparable à celle de la vaccmation contre
la variole.

La discussion académique fut close enfin par les paroles sui-
vantes de M. Charcot :

« Oui, l'inventeur de la vaccination antirabique peut, aujour-
d'hui plus que jamais, marcher la tête haute et poursuivre désor-
mais l'accomplissement de sa tâche glorieuse sans s'en laisser
détourner un seul instant par les clameurs de la contradiction

INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR. H

systématique ou par les murmures insidieux du dénigrement. »
Celte parole si autorisée fut entendue de tous et l'année 1888
s'est écoulée pacifiquement.

Messieurs, avant de vous présenter nos statistiques, je vou
drais vous dire quelles sont, à mon avis, les causes de cette
hostilité que la vaccination antirabique a rencontrée si pas-
sionnée.

Vous savez que M. Pasteur est un novateur, que son imagi-
nation créatrice, réglée par l'observation rigoureuse des faits, a
renversé bien des erreurs et édifié à leur place toute une science
nouvelle. Ses découvertes sur les ferments, sur la génération
des infiniment petits, sur les microbes causes des maladies con-
tagieuses, et sur la vaccination contre ces maladies, ont été pour
la chimie biologique, pour l'art vétérinaire et pour la médecine,
non pas un progrès régulier, mais une révolution radicale.

Or, les révolutions, même celles qu'impose la démonstration
scientifique, laissent partout oii elles passent des vaincus qui ne
pardonnent pas aisément. M. Pasteur a donc, de par le monde,
beaucoup d'adversaires, sans compter ces Français d'Athènes
qui n'aiment pas que le même homme soit toujours [juste ou
toujours heureux.

Et, comme si ses adversaires n'étaient pas encore assez nom-
breux, M. Pasteur s'en fait d'autres par la rigueur implacable
de sa dialectique et par la forme absolue qu'il donne quelquefois
à sa pensée.

Cette forme peut être dangereuse, surtout dans les choses de
la médecine, où rien n'est absolu, et oii les exceptions à la règle
8ont toujours nombreuses. Or, M. Pasteur, par habitude d'es-
prit, néglige volontiers ces faits contingents qui ne sauraient,
il est vrai, prévaloir contre la loi, mais qui, lorsqu'il s'agit d'une
médication appliquée à l'espèce humaine, méritent d'être com-
ptés. Il a donc purement et simplement proclamé l'efficacité de
sa méthode de traitement de la rage, sans faireses réserves sur
la possibilité d'échecs partiels, tandis que, s'il eût été médecin,
il eût instinctivement pris ses précautions en prévoyant la possi-
bilité d'insuccès. Il n'en fit rien et s'exposa ainsi aux coups de
la médecine traditionnelle.

Or, pour comprendre la résistance de la médecine aux décou-

12 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

vertes de M. Pasteur, il suffit de jeter un regard sur les mouve-
ments qui l'agitent depuis quinze ans.

Nous savions à peine que, dans certaines maladies, le sang,
les humeurs et les tissus sont occupés par des êtres infiniment
petits, lorsque M. Pasteur, conduit par ses travaux sur les fer-
ments, s'est jeté dans cette voie, nouvelle pour lui et pour nous.
Et quelles découvertes il y fait coup sur coup ! Il nous éclaire ;
ce n'est pas assez dire, il éblouit nos yeux habitués au demi-jour
de la médecine hippocratique.

Voyez M. Pasteur en face delabactéridie charbonneuse. Non
seulement il en fait la biologie, non seulement il nous prouve
qu'elle est la cause unique du charbon, mais il éduque, il disci-
pline cet infiniment petit et lui apprend à servir contre soi-même
et à devenir son propre vaccin. L'expérience de Pouilly-le-Fort,
longuement préparée par les travaux de laboratoire de MM. Pas-
teur, Chamberland et Roux, est célèbre dans le monde entier.

Lorsque, au Congrès de Londres, en 1881, M. Pasteur
annonça cette grande découverte de l'atténuation des virus et
de la vaccination du choléra des poules et du charbon, un des
hommes les plus compétents en microbie, M. Koch, aurait dit :
« C'est trop beau pour être vrai ! » et, trois mois après, dans le
premier numéro des Mittheilimgen de Berlin, il prenait résolu-
ment parti contre M. Pasteur. Depuis, M. Koch a concédé que
l'atténuation et la vaccination sont des faits exacts et d'une
grande portée scientifique, mais il nie peut-être encore aujour-
d'hui la valeur pratique de ces vaccinations. Et cependant le
vaccin charbonneux se répand partout oii le charbon existe :
en France, en Italie, en Hongrie, en Espagne, aux Indes, en
Australie. Quelle meilleure preuve de sa valeur scientifique et
pratique !

Cette opposition ne troublait pas M. Pasteur qui nous
disait : « Eh bien! qu'ils nient l'atténuation des virus et la vacci-
nation, nous aurons sur eux dix ans d'avance! »

Et le charbon est à peine achevé que M. Pasteur s'attaque
à la rage. Là, pendant plusieurs années, avec l'aide de M. Roux,
il fait expériences sur expériences et arrive à des résultats plus
merveilleux encore. Le microbe de la rage a échappé jusqu'ici à
tous les regards, mais il existe assurément. Eh bien! sans le
connaître autrement que par ses effets, M. Pasteur a trouvé le

INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR. 13

moyen de l'utiliser comme matièro vaccinale. Et surtout,
M. Pasteur a osé proposer la vaccination après morsure, c'est-à-
dire après infection. Or, les médecins ont toujours vécu sur ce
dogme qu'un virus, quel qu'il soit, qui a pénétré dans le corps
humain est désormais inattaquable et doit y produire ses effets.

La résistance des médecins à tant de nouveautés subver-
sives est donc bien compréhensible. Pour reconnaître qu'on a
appris d'abord, puis enseigné des erreurs, il faut, outre l'étude
personnelle et impartiale des faits nouveaux, une certaine lar-
geur d'esprit qu'on ne rencontre pas toujours, même chez les
hommes les plus distingués.

M. Pasteur, heureusement pour lui et peut-être même pour
nous, n'est pas médecin. Expérimentateur sans idées préconçues
et sans préjugés d'école, il a créé, à côté de la médecine tradi-
tionnelle qu'il ignore, une médecine nouvelle que ses contradic-
teurs ignorent à leur tour. Cette médecine est fondée sur cette
idée que la spontanéité morbide n'existe pas pour les maladies
infectieuses, et que les lois de la pathologie générale sont com-
munes aux hommes et aux animaux. Combien de médecins,
cependant, ont été élevés à croire le contraire ! Cela étant, com-
ment sétonnerde leur opposition et de leur révolte? Je trouve,
pour ma part, leur scepticisme fort excusable, puisqu'il procède
des idées traditionnelles, c'est-à-dire de l'esprit de conservation.

Il ne faut pas oublier toutefois, et 31. Pasteur n'oublie pas,
qu'à l'heure critique, il s'est trouvé, pour défendre la vaccina-
tion antirabique, une élite de médecins, hommes de science et
d'avant-garde, dont l'autorité, universellement reconnue, a fait
pencher le plateau de la balance du bon côté. Au premier rang.
Yulpian,qui non seulement avait suivi M. Pasteur, mais l'avait
poussé àlavaccination antirabique, Vulpian combattit et mourut
sur la brèche en défendant avec une éloquence enflammée la
méthode nouvelle.

A côté de Vulpian, les Brouardel. les Charcot, les Verneuil,
les Chauveau, les Villemin se sont honorés en soutenant la
cause du progrès et en préparant son triomphe.

M. Pasteur eut ainsi la bonne fortune de trouver, même à
l'heure des défaillances et des défections, un double point d'appui,
d'une part dans la foule des malades qui n'hésita jamais, d'autre
part, dans la parole respectée de nos maîtres les plus éminents.

U INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

Beaucoup d'autres médecins partageaient la foi' scientifique de
M. Pasteur; je ne les nomme ni ne les connais tous, mais ils se
taisaient, et nos adversaires menaient un tel bruit dans toutes
les presses et les Académies qu'à les entendre, la vaccination
antirabique était morte.

Elle vit, Messieurs, et elle prospère, car il existe aujour-
d'hui, en comptant celui de Paris, plus de vingt instituts antira-
biques disséminés dans le monde entier. 11 y en a sept en
Russie : à Odessa, Saint-Pétersbourg, Moscou, Varsovie,
Charkow, Samara e^ Tiflis; cinq en Italie : à Naples, Milan,
Turin, Palerme, Bologne, ces deux derniers créés récemment et
dotés par le roi. Un à Vienne, un à Constantinople, un à Bar-
celone, un à Bucarest, un à Rio de Janeiro, un à la Havane, un
à Buenos-Ayres; enlin à Chicago et à Malte, deux nouveaux
laboratoires sont en voie d'organisation.

L'Institut antirabique de Paris est en relation suivie avec ces
laboratoires dont les chefs sont tous venus, sauf deux, étudier ici
la méthode de M. Pasteur pour l'appliquer à leurs malades avec
ses perfectionnements progressifs.

Dès l'origine, nous avons classé nos malades en trois
tableaux A, B et C. Le tableau A contient toutes les personnes
mordues par des animaux reconnus enragés par preuve expéri-
mentale absolue. Dans le tableau B sont inscrites toutes les
personnes mordues par des animaux déclarés enragés par certi-
ficats de vétérinaires; c'est le tableau le plus chargé. Enfin, le
tableau C contient toutes les personnes mordues par des ani-
maux suspects de rage. La suspicion résulte ici des circonstances
même de la morsure. Un chien inconnu traversant un village y
mord plusieurs enfants et des animaux, chiens, moutons, puis
disparaît. Si les personnes mordues se présentent au laboratoire,
nous les inscrivons dans le tableau G. En fait, ce tableau est de
plus en plus restreint, car notre sélection est de plus en plus
sévère, de telle sorte que je crois pouvoir affirmer que 98 % des
personnes admises à la vaccination ont été mordues par des ani-
maux enragés.

Notre statistique générale comprend donc trois tableaux A,
B et C, réunis en un seul. Elle se subdivise en statistique parti-
culière à chacun des tableaux A, B et G et en statistiques spé-

INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR. 15

ciaks pour les morsures de la tête et de la face, des mains, des
membres et du tronc.

Pour ne point fatiguer inutilement votre attention, je ne
prendrai que quelques chiffres. Les Annales de rinstitut Pasteur
qui publient les tableaux mensuels donneront les tableaux com-
plets.

Le nombre des personnes traitées à Paris pendant les années
1886-1887 et la première moitié de 1888 s'élève à 5,374. En
1886, où l'affluence des étrangers était considérable, nous avons
inoculé2, 682 personnes, 1,778 en 1887 et 914 jusqu'au 1«' juillet
J888.

Le taux de la mortalité, en comptant tous les morts, même
ceux pris de rage le lendemain du traitement, est, pour 188Ô, de
1,34 Vo, pour 1887 de 1,12, et pour 1888 de 0,77».

Mais il convient d'écarter des tables de la mortalité les
personnes qui succombent à la rage dans les quinze jours qui
suivent le traitement, car la vaccination pour être efficace doit
être achevée avant que l'incubation du virus du chien mordeur
ait commencé dans les centres nerveux. Or, le virus de la rage
commune, porté directement à la surface du cerveau d'un chien,
y incube pendant quinze ou dix-huit jours avant d'y produire
ses effets.

Chez les malades qui succombent à la rage dans la quinzaine
qui suit le traitement, celui-ci a été inutile, parce qu'il a été
trop tardif, mais il n'a pas été mis en échec, parce que les
conditions de son efficacité n'étaient point réalisées.

En opérant cette défalcation, que pas un médecin ne saurait
nous refuser, le taux de la mortalité, malgré le traitement,
tombe pour 1886 à 0,93 "/o, pour 1887 à 0,67 «/«, et pour 1888 à
0,55 Vo.

Ces chiffres sont sensiblement plus faibles que les premiers,
puisque la mortalité reste toujours au-dessous de 1 o/o- Mais les
uns et les autres donnent une mortalité progressivement
décroissante alors que notre choix des personnes admises au
traitement est de plus en plus sévère.

Messieurs, cette décroissance dans la mortalité tient aux

\. Tous les chiffres de la statistique de 1888 ont été relevés sur nos registres
à la date du 31 octobre.

16 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR,

perfectionnements progressifs apportés à la première formule
de traitement. Nous faisons un traitement plus énergique, plus
prolongé, plus intensif, pour prendre le mot de M. Pasteur qui
a fait tant de bruit, et le traitement reste inofïensif. Cette effi-
cacité différente de la vaccination antirabique selon telle ou
telle formule, est la preuve la plus certaine de sa valeur théra-
peutique. Les savants russes qui combattaient la vaccination
antirabique à Odessa et à Saint-Pétersbourg le jugèrent ainsi, et
cessèrent toute opposition lorsque M. Gamaleïa leur eut montré
deux tables de mortalité fort différentes selon la méthode
employée.

A Odessa, le traitement simple appliqué à 136 personnes a
donné une mortalité de 5,88 7o, tandis que le traitement intensif
appliqué à 997 personnes a donné une mortalité de 0,80 "/„.
M. le D"" Bujwid, chef du Laboratoire de Varsovie, a fait de
son côté les mêmes observations. M. Bujwid, qui assiste à
cette séance, ne me contredira pas si je dis que quand il vint à
Paris y étudier la vaccination antirabique, il était fort sceptique.
Élève de Koch, et déjà très habile technicien en microbie, il
travailla avec nous plusieurs mois, puis, dans son laboratoire
privé à Varsovie, il pratiqua les inoculations antirabiques.

M. Bujwid étudia le traitement simple, en s'arrêtant à la
moelle de six jours. 195 personnes vaccinées donnèrent une
mortalité de 4,1 "/o- Au contraire, le traitement intensif appliqué
à des malades choisis sévèrement parmi ceux dont la morsure
était réellement dangereuse (30 étaient mordus au visage, dont
4 par des loups enragés) a donné les résultats les meilleurs : sur
370 personnes vaccinées jusqu'au l*''" septembre, il n'y a pas eu
de mort, de sorte que M. Bujwid est devenu un partisan très
convaincu de la méthode.

Nos statistiques particulières, dressées pour chaque tableau
A, B et C, conduisent aux mêmes conclusions. La mortalité,
dans le tableau A qui ne contient que des personnes dont la
morsure était sûrement virulente, ne diffère pas sensiblement
de la mortalité du tableau C, qui comprend les personnes
mordues par des animaux simplement suspects. Pour les trois
années 1886-87-88, la mortalité dans le tableau A est de 1,30 7o
en comptant tous les morts, et de 1,09 en ne comptant que les
morts survenues 15 jours après le traitement. Dans le tableau

INAUGUHATION DE L'INSTITUT PASTEUR. 17

C, cette mortalité est de 1,30 Vo ou de 0,54 Vo- Cette similitude
dans le chiffre de la mortalité pour deux tableaux en apparence
si difFérents, prouve deux choses : 1" que le très grand nombre
des animaux mordeurs, dits suspects, étaient bel et bien atteints
de rage ; 2" qu'il y a lieu de traiter avec la même sévérité les
personnes des tableaux A et G.

Les statistiques spéciales, dressées séparément pour les
morsures du visage, des mains ou des membres, témoignent à
leur façon de l'efficacité de la vaccination antirabique. On sait
que dans les anciennes statistiques, la mortalité moyenne de
toutes morsures était évaluée à 10, 15 ou 20 7o' selon les
observateurs, et que la mortalité par morsure faite à la tête ou
au visage s'élevait à 80 et 88 7o- Dans nos tableaux, la mortalité
après morsure à la tête ou au visage est de 3,84 "/o si on compte
tous les morts; elle est en réalité de 1,82 "/y, si on écarte les
morts survenues dans la quinzaine qui a suivi le traitement.
Ainsi, dans ce genre de morsure, la moitié des morts survient
dans les quinze premiers jours après le traitement, ce qui est
une nouvelle preuve de leur gravité exceptionnelle. Mais, cette
période dangereuse passée, le traitement est presque aussi effi-
cace pour elles que pour les morsures communes. Nous nous
expliquons ce résultat par la vaccination particulièrement éner-
gique donnée aux personnes mordues à la tête ou au visage.

L'écart du chiffre réel de notre statistique : 1,82 7oi ^t des
chiffres des statistiques classiques : 80 et 88 7oi est tellement
considérable qu'il est impossible de méconnaître l'intervention
bienfaisante du vaccin antirabique.

Les statistiques étrangères concordent avec les nôtres :
A Saint-Pétersbourg , le laboratoire fondé par Son Altesse
Impériale le Prince Alexandre d'Oldenbourg, et entretenu à ses
frais, a vacciné, depuis le 13 juillet 1886 jusqu'au 13 septembre
1888, 484 personnes. La mortalité moyenne a été de 2,08 "/o-

Des renseignements fournis par M. le D' Kraïouchkine,
médecin de la station antirabique, il résulte que la mortalité,
un peu plus élevée que la nôtre, de cette statistique, s'explique
par la gravité extrême des morsures.

' A Odessa, dans le laboratoire dirigé par M. le professeur
Metchnikoff, M. le D'Gamaleïa a vacciné :

18 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

En 1886, 324 personnes par divers traitements simples.
Mortalité : 3,39 "/q.

En 1887, 345 personnes par le traitement intensif. Morta-
lité : 0,o8 7o.

En 1888, 364 personnes par le traitement intensif. Morta-
lité : 0,64 Vo-

Pendant ces trois années, 1,1 3S personnes ont subi le trai-
tement antirabique avec une mortalité moyenne de 1,41 Vo.

A Moscou., à l'Institut antirabique fondé sous les auspices du
prince Do]goroukow,M. le D' Gwozdeff a vacciné:

En 1886, 107 personnes par le traitement simple. Mortalité :
8,40 V„.

En 1887, 280 personnes par le traitement intensif. Morta-
lité : 1,27 »/o.

En 1888, 246 personnes par le traitement intensif. Morta-
lité : 1,60 Vo.

A Varsovie, M. Bujwid a inoculé :

297 personnes par divers traitements simples. La mortalité
moyenne a été de 3 «/o.

370 personnes avec la méthode intensive. La mortalité,
jusqu'ici, est nulle. (Déjà, 16 mois se sont écoulés depuis le
commencement de l'application de cette méthode et deux mois
depuis le traitement du dernier malade.)

A Samara, le D"" Parchenski a vacciné o3 personnes, dont
4 mordues par des loups, La mortalité, ici fort élevée : .^,67 Vo,
s'explique par le traitement insuffisamment énergique et insuf-
fisamment prolongé, ainsi qu'il résulte des renseignements
fournis par une lettre du D' Parchenski.

A CharhoiL\ et probablement pour les mêmes raisons, mais
nous manquons de renseignements précis, M. le D'" Protopopoff
a vacciné 233 personnes avec une mortalité de 3,80 Vo-

A Turin, M. Bordoni Uflreduzzi a vacciné en 1886-87 et 88
502 personnes appartenant au tableau A. Mortalité 2.50 Vo- 221
appartiennent au tableau B. Mortalité 1.30 Vo. 43 appartiennent
au tableau G. Mortalité nulle.

A Milan, M. le D'' Baratieri a vacciné 335 personnes, 2 sont
mortes malgré le traitement : mortalité 0,60 "/o.

A Palerme, M. le prof. A. Gelli a vacciné, du l^'" mars au
30 septembre 1888, 109 personnes sans insuccès.

INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR. i9

A Naples, M. le prof. Cantani, assisté de MM. les D"^' Vestea
et Zagari a dû fermer sou laboratoire, faute de subsides de la
municipalité, de janvier à août 1888.

Dans cette ville les adversaires de M. Pasteur, très nom-
breux, avaient réussi, malgré un vote de confiance et d'encou-
ragement de l'Académie de Naples, à ébranler Topinion publique
et à indisposer la junte municipale contre la méthode de M. Pas-
teur. Mais, pendant cette période d'interruption de sept mois,
9 morts par rage étant survenues à Naples, la municipalité a pro-
mis un subside, le gouvernement et la province de Naples en ont
promis d'autres, et le laboratoire a été ouvert de nouveau. Il est
aujourd'hui en plein fonctionnement.

246 personnes ont été vaccinées à Naples, 199 depuis le jour
de l'ouverture du laboratoire (22 septembre 1886) jusqu'à
janvier 1888 et 34 depuis la réouverture. La mortalité après vac-
cination est de 1,3 "/o.

A Constantinople, M. le général docteur Zoëros-Pacha a
vacciné 34 personnes, mortalité 0. — Cet institut a été fondé
par ordre et sous les auspices de Sa Majesté le Sultan.

A la Havane, dans l'Institut antirabique de M. le D^ Santos
Fernandez, M. le D' Tamayo a inoculé 170 personnes, parmi
lesquelles cinquante mordues par des animaux dont la rage
fut prouvée expérimentalement. La mortalité est de 0,60 "/o-

A Rio de Janeiro, dans la station vaccinale due à l'initiative
de Sa Majesté l'empereur du Brésil, M. le D'Ferreira dos Santos
a vacciné 66 personnes. Jusqu'à présent il n'a pas d'insuccès '.

Messieurs, je ne puis passer sous silence la statistique du
département de la Seine qui, chaque année, est l'objet d'un rapport
spécial au conseil d'hyg-iène et desalubrité. Le rapport pour 1887
a été fait par M. le D'' Dujardin-Beaumetz qui a pris ses docu-
ments à la Préfecture de police, et, pour ce qui concerne les
personnes vaccinées, au laboratoire de M. Pasteur. Or, en 1887,
le nombre des personnes mordues et vaccinées s'élève à 306 sur

i. Le laboratoire de Constantinople n'a pas été cité dans le rapport la par
M. Grancher, le 14. novembre, parce que nous manquions à cette date de rensei-
gnements précis. Il en est de même pour la statistique de Turin. Pour l'Institut
de Rio de Janeiro, nous avions donné le chiffre de 53 personnes inoculées. Ce
chiffre était exact à l'époque où nous avoBs reçu le rapport de M. Ferreira dos
Santos ; il s'élève aujourd'hui à 66.

20 INAUCiURAÏION DE L'INSTITUT PASTEUR.

lesquelles deux sont mortes ' : mortalité 0,76 "/„; d'autre pail,
sept cas de mort par rage sont survenus parmi les 44 personnes
qui fio^urentsur les listes administratives comme n'ayant pas subi
la vaccination antirabique. Dans ce groupe la mortalité atteint
15,90 f/o, chiffre que M. Leblanc avait donné et que MM. Pasteur
et Brouardel avaient accepté comme représentant la mortalité
moyenne avant la vaccination.

Et M. Dujardin-Beaumetz conclut: « Je ne connais pas de
témoignage plus éclatant à invoquer à l'appui de la méthode des
inoculations. »

Le rapport de M. Beaumetz contient une autre conclusion
non moins intéressante, c'est que la rage est une maladie qu'on
peut combattre par mesures sanitaires administratives. Il a rap-
pelé qu'en Allemagne la rage a presque disparu, grâce à une
prophylaxie intelligente. En effet, la rage n'est jamais spontanée,
elle est toujours transmise par inoculation d'un animal à un
autre, et de tous les animaux le chien est de beaucoup le plus
susceptible. Or, la surveillance des chiens est facile à exercer
quand l'autorité est vigilante çt la population disciplinée.

Nous avons fait tracer un graphique qui donne la preuve écla-
tante du bon et prompt effet des mesures de police sanitaire. A
voir cette courbe rapidement décroissante, à partir de mai 1888,
époque de l'arrêté du préfet de police au sujet des chiens errants,
ne semble-t-il pas certain qu'avec un peu de persévérance de
la part des pouvoirs publics, et un peu de bonne volonlédelapart
delà population, on réussirait à réduire la rage à un petit nombre
de cas, en France comme en Allemagne?

Vous savez. Messieurs, que l'Institut Pasteur a été fondé non
seulement pour le traitement de la rage, mais aussi pour l'étude
scientifique des moyens de combattre pratiquement les maladies
qui déciment l'espèce humaine: la diphtérie, la fièvre typhoïde,
la phthisie, etc. Les vastes laboratoires qui vont s'ouvrir aux
médecins français et étrangers seront ainsi pour l'humanité une
source de bienfaits, et un puissant moyen de diffusion et d'expor-
tation de la science française.

1. Ces chifTres sont ceux du rapport de M. Beaumetz. Depuis que ce rapport
a été fait une troisième personne vaccinée a succombé à la rage, ce qui élève la
mortalité à 0,97 "/q.

INAUGURATION DE LINSTITUT PASTEUR.

21

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Courbe indiquant par mois le nombre de personnes mordues
dans le département de la Seine et traitées à l'Institut Pasteur.

M. Christophle, gouverneur du Crédit Foncier deFrance, le trésorier
de la souscription, lut un rapport sur l'exposé financier qui provoqua
dès les premiers mots les applaudissements,

DISCOURS DE M. CIlRiSTOPliLE.

Monsieur le Président de la République,

Messieurs, '

Le rapport de votre trésorier pourrait commencer comme un
conte de fées : Il était une fois, dans un coin de Paris, mais un

22 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

coin si peu connu des Parisiens qu'aujourd'hui encore il faut des
indications spéciales pour le découvrir, un vaste terrain qui
appartenait depuis cent cinquante ans à une famille de maraî-
chers. Les rares promeneurs qui s'égaraient dans ce quartier
pouvaient se donner le plaisir d'embrasser d'un coup d'œil onze
mille mètres de légumes. Chaque jour, depuis le lever du soleil
jusqu'à la tombée de la nuit, on voyait passer et repasser dans
cet enclos des braves gens qui avaient la philosophie de Candide,
sans l'avoir lu, et répétaient comme lui :

« Il faut cultiver son jardin. »

Or, un jour, à la fin de mai 1887, ainsi que l'on voit dans
Cendrillon une citrouille changée en carrosse doré, tous ces
pieds de laitue si correctement alignés semblèrent être frappés
par un coup de baguette et changés en tombereaux. Des centaines
d'ouvriers se précipitèrent sur cet hectare de salades. En un tour
de main, tout fut arraché, bouleversé. On creusa en toute hâte,
à d'énormes profondeurs, pour établir les bases d'un monument
que l'on voulait indestructible. S'il n'y avait pas eu à régler la
question du payement aux propriétaires du sol — ce qui nous fait
rentrer un peu dans la réalité — tout dans cette histoire serait
extraordinaire.

Les architectes, M. Petit et M.Brébant, déclaraient, avant de
commencer leurs plans, qu'ils n'accepteraient aucun honoraire
et, ce qui est plus surprenant encore, qu'ils ne dépasseraient pas
les devis; les entrepreneurs apportaient des comptes fantastiques
par leur simplicité; les maçons parlaient de travailler le lundi.

Quelle était donc, Messieurs, la fée assez puissante pour ren-
verser ainsi toutes les habitudes de la vie, toutes les notions
connues ? C'était la fée Enthousiaste qui s'était invitée elle-même
dès le jour où elle avait entendu parler de l'Institut Pasteur.
Comme il s'agissait de combattre contre de mauvais génies que
M. Pasteur pouvait emprisonner dans des flacons de verre, et non
seulement réduire à l'impuissance, mais encore transformer en
génies protecteurs, cette fée, accompagnée de sa sœur la Généro-
sité, se mit en campagne. Toutes deux parcoururent les com-
munes de France et même de l'étranger, en annonçant la bonne
nouvelle dans les palais, dans les châteaux et dans les chau-
mières.

Comme toujours^ et pour ne pas faire mentir le conte, elles

INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR. 23

rencontrèrent parfois sur leur route des fées plus ou moins
redoutables qui, soit isolées, soit en conseil, essayèrent de leur
jeter un sort en prononçant des paroles dont personne ne se
souvient aujourd'hui. Ainsi d'ailleurs que les choses se passent
dans les contes qui finissent bien, les bonnes fées triomphèrent
et tous leurs souhaits furent les plus beaux du monde. Nous
avons essayé de les mettre en pratique.

C'est à la Banque de France et au Crédit Foncier, Messieurs,
que toutes les sommes ont été centralisées. Les deux registres
qui sont là, sous vos yeux, contiennent la liste des souscripteurs.
En entendant le rapport de M. Grancher, vous pouviez vous dire
que les chiffres ont leur éloquence; j'oserai dire, en parlant des
nôtres, qu'il ont leur émotion. Les sommes prodigieuses et les
offrandes minimes, tout est inscrit — avec les noms en regard
— dans ce livre d'or dont les pages feront un jour un dés
chapitres les plus touchants et les plus glorieux de l'histoire de
cette maison.

Je conseillerais à ceux qui ne voient l'humanité que sous un
vilain jour, qui vont répétant que tout est pour le pire ici-bas,
qu'il n'y a dans le monde ni désintéressement ni dévouement, de
jeter un coup d'œil sur les documents humains dellnstitut Pas-
teur. Ils apprendront là, pour commencer par le commencement,
que l'on rencontre dans les ^Académies des confrères que non
seulement la gloire d'un autre n'offense pas, mais qui trouvent
leur bonheur et mettent leur fierté dans cette gloire; que les
hommes politiques et les journalistes ont souvent la passion du
vrai et du bien; que jamais à aucune époque les Français n'ont
mieux aimé leurs grands hommes, qu'ils leur rendent justice dès
ce monde ■— ce qui est encore la meilleure manière — que nous
avons acclamé la fête de Victor Hugo, le centenaire de Chevreul
et l'inauguration de l'Institut Pasteur. « Quand un Français dit
du mal de lui, disait un jour un des confrères de M. Pasteur, ne
le croyez pas : il se vante. » A l'itiverse d'une phrase célèbre et
pessimiste, on pourrait dire que, dans cette souscription, toutes
les vertus se perdent dans le dévouement comme les lleuves se
perdent dans la mer.

Qije d'exemples je pourrais citer, si les plus généreux dona-
teurs n'avaient demandé que l'on ne prononçât pas leur nom!
Mais si je ne puis parler des souscriptions isolées, vous me per-

24 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

mettrez, Messieurs, de rappeler quelques souscriptions collectives,
depuis les dotations offertes par l'admirable festival du Trocadéro
où, comme le disait M. Pasteur, « les grands charmeurs de l'hu-
manité heureuse apportèrent leur glorieux concours à ceux qui
veulent servir l'humanité souiïranle, » jusqu'aux fêtes de petites
villes et de villages où l'on se cotisait pour offrir « le cadeau de
la misère ». Un jour, des ouvriers de la verrerie d'Aumale de-
mandèrent au poète des humbles, àM. François Coppée, des vers
pour mieux honorer le génie de M. Pasteur et envelopper leur
obole. En les envoyant à M. Pasteur, M. Coppée finissait ainsi :

Ils ont le compliment rimé qui leur manquait
Et peuvent te l'offrir, Pasteur, comme un bouquet
Au patron, le jour de sa fêle.

11 y eut une souscription plus touchante encore. Ce fut celle
de 43,000 francs qu'apportèrent les Alsaciens-Lorrains. C'est
d'Alsace qu'était venu le petit Joseph Meister, qui fut le premier
inoculé, et qui est resté en correspondance avec « son cher
M. Pasteur », comme il l'appelle toujours. Ces lettres intimes,
ces pièces à l'appui, je les ai demandées à M. Pasteur. Mais il
n'a pas voulu me les donner. Jamais rapporteur n'a été moins
secondé que moi. Heureusement, j'ai les chilfres de la souscrip-
tion.

Elle s'est élevée à Fr. 2,586,680

Dans ce chiffre , il faut compren-
dre les 200,000 francs votés par les
Chambres et le don offert par M. le
Président du Conseil.

Les dépenses s'élèvent à ce
jour, à 1,22.3,786

Nous avons encore à payer aux en-
trepreneurs 240,000

L'achat des instruments des labora-
toires exig-era 100,000

Les dépenses totales s'élèveront
à 1,563,786

Ce qui laissera un solde disponible,
qui formera la dotation de l'Institut Pas- ,

leur, de Fr. 1,022,894

INAL'GLRATIUN DE L'INSTITUT PyVSTEUK. 23

Si on veut connaître la nature de ces dépenses, on voit
qu'elles se décomposent ainsi :

Achat du terrain et droits Fr. 441,475

Terrassements et constructions 1)17,577

Instruments de laboratoires 100,0(10

Frais de circulaires, imprimés, bulletins de

souscriptions, récépissés 12,421

Frais d'actes notariés 41G

Entrelien des laboratoires pendant trois ans. 91.897

Total Fr. 7,563,786

On remarquera que celte souscription , qui a produit
2,586,680 francs, et qui. après toutes les dépenses payées, laissera
à l'Institut Pasteur un capital disponible de 1,022,894 francs,
n'aura coulé que 12,421 francs de frais. Si je ne craignais de
commettre une indiscrétion, je rappellerais que, dans une séance
du comité, M. l'amiral Jurien de la Gravière, dont nous regret-
tons vivement l'absence dans cette fête, avait proposé de consa-
crer une somme de 6,000 francs à la publicité. Mais le concours
si bienveillant de la presse nous a permis d'économiser celte
somme.

Il me reste. Messieurs, à vous faire connaître un dernier
donateur qui abandonne à l'Inslilut les bénéfices de la vente, en
France, des vaccins découverts dans le laboratoire. MM. Cham-
berland et Roux ont suivi leur maître dans sa générosité. Après
avoir provoqué cette grande œuvre, M. Pasteur aura été un des
plus grands souscripteurs.

C'est ainsi, Monsieur (car mon incompétence scientifique
bien plus encore que ma modestie naturelle me défend de vous
dire : illustre maître, et je n'ose d'autre part, usant de la fami-
liarité naïve du jeune Meister, vous appeler: mon cher monsieur
Pasteur), c'est ainsi. Monsieur, que la générosité publique, le
concours du gouvernement, votre désintéressement, enfin, ont
fondé et consolidé l'établissement que nous inaugurons aujour-
d'hui. C'est ainsi qu'a été assuré à votre œuvre ce pain quotidien
qui fait parfois défaut aux plus ardentes prières et auquel l'avenir
ajoutera, je l'espère, pour ce qui vous concerne, les douceurs

26 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

complémentaires, presque aussi nécessaires que le pain de
chaque jour.

La sollicitude publique qui a entouré cette œuvre à sou
berceau ne lui fera pas défaut. L'élan des cœurs généreux ne
s'est pas ralenti : demain nous apportera ce qui fait défaut
aujourd'hui, et vos collaborateurs, vos élèves et vos successeurs
pourront poursuivre avec sécurité et avec confiance le cours do
leurs travaux.

Certes, c'est pour vous, Monsieur, un bonheur rare et
presque inespéré. Qu'il vous console des luttes passionnées, des
émotions poignantes, des crises parfois terribles que vous avez
traversées! Quand je songe à ce passé si plein de troubles et de
dangers, je songe aussi malgré moi à l'ironie de ces phrases
toutes faites qui parlent de la sérénité de la science et de la paix
des laboratoires.

Mais je m'écarte, Monsieur, et je vous en demande pardon,
de l'objet précis de ma mission. C'est votre faute, après tout.
Vous nous avez mis dans la maison. Vous avez cru obligeam-
ment que nous serions bons à quelque chose, ne fût-ce qu'à
maintenir l'ordre dans la comptabilité, la régularité dans la
gestion de ce trésor qui était bien le vôtre et avec lequel vous
avez constitué une puissante réserve pour la science, en vue des
découvertes de l'avenir. Vous ne nous avez pas défendu d'ajouter
au zèle que vous attendiez de nous notre respect et notre affection.
C'est votre faute, encore une fois. On ne peut vous entendre
sans vous admirer. On ne peut vivre à côlé de vous sans vous
aimer.

M. Pasteur, ne pouvant maîtriser son émotion, dut charger son fils
de lire son discours :

DISCOURS DE M. l'ASTEUA.

Monsieur le Président,

Messieurs,

Celui qui, dans vingt ans, écrira notre histoire contempo-
raine et recherchera quelles ont été, à travers les luttes des

INAUGURATION BE L'INSTITUT PASTEUR. 27

partis, les pensées intimes de la France, pourra dire avec fierté
qu'elle a placé au premier rang- de ses préoccupations l'ensei-
gnement à tous les degrés. Depuis les écoles de village jusqu'aux
laboratoires des hautes études, tout a été soit fondé, soit renou-
velé. Elève ou professeur, chacun a eu sa part.

Les grands maîtres de l'Université, soutenus par les pou-
voirs publics, ont compris que, s'il fallait faire couler comme
de larges fleuves l'enseignement primaire et l'enseignement
secondaire, il fallait aussi s'inquiéter des sources, c'est-à-dire
de l'enseignement supérieur. Ils ont fait à cet enseignement la
place qui lui est due. Une telle instruction ne sera jamais réser-
vée qu'à un petit nombre ; mais c'est de ce petit nombre et de
son élite que dépendent la prospérité, la gloire et, en dernière
analyse, la suprématie d'un peuple.

Yoilà ce qui sera dit et ce qui fera l'honneur de ceux qui ont
provoqué et secondé ce grand mouvement. Pour moi, Messieurs,
si j'ai eu la joie d'aller, dans quelques-unes de mes recherches,
jusqu'à la connaissance de principes que le temps a consacrés et
rendus féconds, c'est que rien de ce qui a été nécessaire à mes
travaux ne m'a été refusé.

Etlejouroii, pressentant l'avenir qui allait s'ouvrir devant
la découverte de l'atténuation des virus, je me suis adressé direc-
lementà mon pays pour qu'il nous permit, par la force et l'élan
d'initiatives privées, d'élever des laboratoires qui non seulement
s'appliqueraient à la méthode de prophylaxie de la rage^ mais
encore à l'étude des maladies virulentes et contagieuses, ce
jour-là la France nous a donné à pleines mains

Souscriptions collectives, libéralités privées, dons magni-
fiques dus à des fortunes qui sèment les bienfaits comme le
laboureur sème le blé, elle a tout apporté, jusqu'à l'épargne
prélevée par l'ouvrier sur le salaire de sa rude journée.

Pendant que se faisait celte œuvre de concentration fran-
çaise, trois souverains nous donnaient un lémoignag^e de sym-
pathie effective. Sa Majesté le sultan voulait être un de nos
souscripteurs ; l'empereur du Brésil, cet empereur homme de
science, inscrivait son nom avec la joie d'un confrère, disait-il,
et le tsar saluait le retour des Russes que nous avions traités
par un don vraiment impérial.

Devant les médecins russes qui travailleront dans nos labo-

28 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

raloireset sont déjà présents parmi nous, j'adresse au Isarriiom-
mage de notre respectueuse gratitude.

Comment toutes ces sommes ont été centralisées au Crédit
Foncier de France et l'usage qui en a été fait, vous venez de l'ap-
prendre, Messieurs. Mais ce que M. Christoplile ne vous a pas
dit, c'est avec quel souci il a géré ce bien national.

Avant la pose de la première pierre, le comité de patronage
de la souscription a décidé, malgré moi, que cet Institut porte-
rait mon nom. Mes objections persistent contre un titre qui
réserve à un homme l'hommage dû à une doctrine. Mais, si je
suis troublé par un tel excès d'honneur, ma reconnaissance
n'en est que plus vive et plus profonde. Jamais un Français
s'adressant à d'autres Français n'aura été plus ému que je ne le
suis en ce moment.

La voilà donc bâtie, cette grande maison dont on pourrait
dire qu'il n'y a pas une pierre qui ne soit le signe matériel d'une
généreuse pensée. Toutes les vertus se sont cotisées pour élever
cette demeure du travail.

Hélas ! j'ai la poignante mélancolie d'y entrer comme un
homme « vaincu du temps », qui n'a plus autour de lui aucun
de ses maîtres, ni même aucun de ses compagnons de lutte, ni
Dumas, ni Bouley, ni Paul Bert, ni Vulpian qui, après avoir été
avec vous, mon cher Grancher, le conseiller de la première
heure, a été le défenseur le plus convaincu et le plus énergique
de la méthode !

Toutefois, si j'ai la douleur de me dire : ils ne sont plus,
après avoir pris vaillamment leur part des discussions que je
n'ai jamais provoquées, mais que j'ai dû subir; s'ils ne peuvent
m'entendre proclamer ce que je dois à leurs conseils et à leur
appui; si je me sens aussi triste de leur absence qu'au lende-
main de leur mort, j'ai du moins la consolation de penser que
tout ce que nous avons défendu ensemble ne périra pas.

Notre foi scientifique, les collaborateurs et les disciples
qui sont ici la partagent.

Le service du traitement de la rage sera dirigé par M. le pro-
fesseur Grancher, avec la collaboration des docteurs Chante-
messe, Charrin et Terrillon.

M. le ministre de l'instruction publique a autorisé M. Du-
claux, le plus ancien de mes élèves et collaborateurs, aujourd'hui

[NAU(ii:ilATU)N DE LliNSTITUT PASTEUR. 20

professeur à la Faculté des sciences, à transporter ici le cours
de chimie biologique qu'il fait à la Sorbonne. 11 dirigera le labo-
ratoire de microbie générale.

M. Cbamberland sera chargé de la microbie dans ses rap-
ports avec l'hygiène :M. le docteur Roux enseignera les méthodes
microbiennes dans leurs applications à la médecine. Deux savants
russes, les docteurs MetchnikotF et Gamaleïa, veulent bien nous
prêter leur concours. La morphologie des organismes inférieurs
et la microbie comparée seront de leur domaine.

Votfs connaissez, Messieurs, les espérances que nous don-
nent les travaux du docteur Gamaleïa. C'est à dessein que je me
sers du mot espérances. L'application à l'homme est loin d'être
faite en ce moment; mais la plus rude étape est franchie.

Constitué comme je viens de le dire, notre Institut sera à
la fois un dispensaire pour le traitement de la rag-e, un centre de
recherches pour les maladies infectieuses et un centre d'ensei-
gnement pour les études qui relèvent de la microbie. Née d'hier,
mais née tout armée, cette science puise une telle force dans ses
victoires récentes qu'elle entraine tous les esprits.

Cet enthousiasme que vous avez eu dès la première heure,
gardez-le, mes chers collaborateurs, mais donnez-lui pour com-
pagnon inséparable un sévère contrôle. N'avancez rien qui ne
puisse être prouvé d'une façon simple et décisive.

Ayez le culte de l'esprit critique. Réduit à lui seul, il n'est
ni un éveilleur d'idées, ni un stimulant de grandes choses. Sans
lui, tout est caduc. Il a toujours le dernier mot. Ce que je vous
demande là et ce que vous demanderez à votre tour aux disciples
que vous formerez, est ce qu'il y a de plus difficile à l'inventeur.

Croire que l'on a trouvé un fait scientifique important,
avoir la fièvre de l'annoncer, et se contraindre des journées, des
semaines, parfois des années à se combattre soi-même, à s'ef-
forcer de ruiner ses propres expériences, et ne proclamer sa
découverte que lorsqu'on a épuisé toutes les hypothèses con-
traires, oui, c'est une tâche ardue.

Mais quand, après tant d'efforts, on est enfin arrivé à la
certitude, on éprouve une des plus grandes joies que puisse res-
sentir l'âme humaine, et la pensée que l'on contribuera à l'hon-
neur de son pays rend cette joie plus profonde encore.

Si la science n'a pas de patrie, l'homme de science doit en

30 INAUGURATION DE L'INSTITUT PASTEUR.

avoir une, et c'est à elle qu'il doit reporter riuflaence que ses
travaux peuvent avoir dans le monde.

S'il m'était permis, Monsieur le Président, de terminer par
une réflexion philosophique provoquée en moi par votre présence
dans celte salle de travail, je dirais que deux lois con traires
semblent aujourd'hui en lutte : une loi de sang et de mort qui,
en imaginant chaque jour de nouveaux moyens de combats,
oblige les peuples à être toujours prêts pour le champ de bataille,
et une loi de paix, de travail, de salut, qui ne songe qu'à déli-
vrer l'homme des fléaux qui l'assiègent. *

L'une ne cherche que les conquêtes violentes, l'autre que
le soulagement de l'humanité. Celle-ci met une vie humaine au-
dessus de toutes les victoires ; celle-là sacrifierait des centaines
de mille existences à l'ambition d'un seul.

La loi dont nous sommes les instruments cherche même à
travers le carnag-e à guérir les maux sanglants de celte loi de
guerre. Les pansements inspiréspar nos méthodes antiseptiques
peuvent préserver des milliers de soldats.

Laquelle de ces deux lois l'emportera sur l'autre ? Dieu
seul le sait. Mais ce que nous pouvons assurer, c'est que la
science française se sera efforcée, en obéissant à cette loi d'hu-
manité, do reculer les frontières de la vie.

Les applaudissements, qui avaient éclaté à chaque paragraphe de
ce discours, reprirent enthousiastes, à cette dernière page. Dans celte
assemblée composée d'éléments si divers, il n'y eut plus qu'une âme
commune, l'âme de tout un peuple qui vibrait avec l'âme de cet
homme de labeur, de patriotisme et d'humanité. Ce fut une minute
inoubliable d'émotion haute et généreuse.

M. le Président de la République, après avoir serré la main de
M. Pasteur, se leva et dit :

« M. Pasteur n'a voulu d'autre récompense que celle que nous
pouvons donner à ses collaborateurs : M. GrancheretM. Duclauxsont
nommés officiers de la Légion d'honneur, M. Clianlemesse est nommé
chevalier de la Légion d'honneur. Les palmes d'officier d'Académie
sont décernées à M. Brébant, architecte de l'Institut Pasteur. *

APPENDICE

Dans les journées des 13, 14 et 43 novembre, M. Pasteur a reçu de l'é-
traniT-er un grand nombre de télégrammes de félicitations, justifiant une
fois de plus la pensée rappelée dans son discours que la science n'a pas de
patrie.

Profondément touché des vœux formés pour sa personne et la prospérité
de l'établissement qui vient d'être inauguré, M. Pasteur prie les sociétés
savantes et les personnes dont les noms suivent de vouloir bien agréer ici
l'expression de sa vive reconnaissance :

La Société entomologique du midi de la Russie, à Odessa;

La Société impériale des Amis de la nature, à Moscou;

La Société des naturalistes d'Odessa;

La Station bactériologique d'Odessa;

L'Académie impériale de médecine de Saint-Pétersbourg;

La Société de médecine d'Odessa;

Les médecins de l'hôpital de la ville d'Odessa;

La Société des pharmaciens d'Odessa;

La Régence provinciale de Bessarabie ;

Le Comité des Congrès des médecins russes, à Saint-Pétersbourg;

Les étudiants de l'Université d'Odessa;

Le Conseil médical russe, à Saint-Pétersbourg;

La Conférence des médecins de l'hôpital militaire de Moscou;

La Société de chirurgie de Moscou;

Le Congrès des médecins et des représentants du gouvernement de
Cherson;

La Société des médecins praticiens de Saint-Pétersbourg;

La Société des sciences médicales de Lisbonne;

S. A. le prince Alexandre d'Oldenbourg, en son nom et au nom de la
Station antirabique de Saint-Pétersbourg;

Le professeur Protopopofî, de KarkofT;

Le professeur Hueppe, de Wiesbaden;

Le professeur sir James Paget, de Londres;

Le professeur Poehl, de Saint-Pétersbourg;

Le directeur du journal de la Société agricole impériale d'Odessa;

Le professeur Cantani, de Naples;

La famille de Herz, de Bucarest;

L'a famille Retzius, de Stockholm;

José Julio Rodriguez, de l'École polytechnique de Lisbonne;

Le docteur E. Ullmann, de Vienne;

Le professeur Anrep, de Saint-Pétersbourg;

Le docteur Burnay, de Lisbonne...

SCEAUX. — IMPRIMERIE CHARAIRE.

2me ANiNEE. JANVIER 1888. N" 1

ANNALES

DE

L'INSTITUT PASTEUR

SIR LA DESTRLCTION DES LAPINS EN AISTR4LIE

ET DANS LA NOUVELLE-ZÉLANDE,

F»ar» IM. F»ASTEtJIÎ.

M. Pasteur a adressé à MM. les agents généraux des posses-
sions de l'Australie et de la Nouvelle-Zélande la communication
que voici :

Paris, le S janvier 1888,

La Revue des Deux-Mondes a publié, dans son numéro du
15 août 1887, un article de M. C. de Varigny, dont j'extrais les
passages suivants :

Enrichis subitement par la guerre de Sécession aux États-Unis, qui fît
liausser le prix des laines, en arrêtant la production américaine, les colons
de l'Australie se trouvèrent tout à coup disposer de revenus considé-
rables...

Imitateurs zélés des coutumes anglaises, ils se prirent de passion pour
la chasse, et fondèrent en Australie et à la Nouvelle-Zélande des sociétés
d'acclimatation pour importer d'Europe des lièvres et des lapins. Ce fut
une véritable rage, un vent de folie qui souffla sur la colonie... Tout grand
propriétaire n'eut plus qu'une idée : se créer une chasse réservée. Le sol et
le climat convenaient si merveilleusement aux lapins, qui en Angleterre
ont de quatre à six portées par an, de trois à quatre petits, qu'en Australie
ils eurent jusqu'à dix portées par an, de huit à dix petits chacune...

Vainement on tenta d'encloro les terrains de treillis, ils creusaient par-
dessous et gagnaient 1p lavgp, au grand désespoir des propriétaires qui

1

2 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

redoublaient d'efforts et de soins pfour en accroître le nombre. Ils ont si
bien réussi que, aujourd'hui, cette peste désole la Nouvelle-Zélande et
l'Australie. Les jardins maraîchers sont dévastés; les terrains qui produi-
saient, il y a quelques années, ISO boisseaux d'orge et de 75 à 80 de blé à
l'hectare, durent être abandonnés, toute culture, dans certains districts,
étant devenue impossible.

M. Gravi'ford cite l'exemple d'un grand propriétaire qui, après avoir
dépensé 40,000 livres sterling (1 million de francs) pour se débarrasser de
ce fléau d'un nouveau genre, fut obligé d'y renoncer. Sur certaines fermes,
on évalue leur nombre à des centaines de mille, et, chaque année, leur
taille augmente avec leur nombre. D'une voracité extraordinaire, ils
mangent l'herbe jusqu'à la racine et convertissent d'immenses pâturages,
qui nourrissaient vingt-cinq à trente moutons à l'hectare, en terrains dénu-
dés et poussiéreux. Les vignobles ont été ruinés, et, jusqu'ici, les moyens
employés pour détruire ces animaux n'ont abouti à aucun résultat appré-
ciable. On les chasse, on les tue, on les empoisonne, et ils fourmillent.

M. Williamson dépose que, dans une excursion qu'il fit avec un délégué
du gouvernement, ils reconnurent que dans tout le district l'herbe avait
disparu. Des bandes d'énormes lapins parcouraient le pays, s'écartant à
peine pour faire place à leur voiture.

Le sol. raviné de terriers, no permettait d'avancer qu'avec précaution :

« Partout des lapins, dit-il, sur la route et dans la plaine; ils gambadent
en troupes, se poursuivent dans les sables; on les voit assis par centaines a
l'entrée de leurs terriers... Traqués sur un point, ils se réfugient sur un
autre, et ils se multi|)lient avec une rapidité telle qu'un cataclysme de la
nature pourra seul en avoir raison. »

La publication suivante vint doaner récemment une confir-
mation aux récits qui précèdent.

Le 9 novembre et le 2 décembre 1887, le journal le Temps,
de Paris, publiait l'avis officiel suivant, émané du gouvernement
de la Nouvelle-Galles du Sud :

Direction des Mines. Sydney, le 31 août 1887.

Il est donné avis, par la présente, que le gouvernement de la Nouvelle-
Galles du Sud payera la somme de 623,000 francs (£ 25,000) à quiconque fera
connaître et démontrera, à ses frais, une méthode ou un procédé encore
inconnu dans la colonie, pour exterminer d'une manière efficace les lapins,
procédé assujetti aux conditions suivantes :

lo Que cette méthode ou ce procédé recevra, après un essai d'une année,
l'approbation d'une Commission nommée à cet effet par le gouvernement,
avec l'avis du Conseil exécutif.

2o Que telle méthode ou tel procédé sera, d'après l'opinion de ladite
Commission, inoffensif pour les chevaux, moutons, chameaux, chèvres, porcs

DESTRUCTION DES LAPINS EN AUSTRALIE. 3

et chiens, et ne présentera pas l'emploi de matières ou substances qui
pourraient Imir nuire.

3» La Commission sera tenue de ne pas divulguer les détails de ces
méthodes ou de ces procédés, à moins que cette Commission ne décide
d'expérimenter ladite métiiode ou ledit procédé.

Toutes les communications relatives à ce ({ui précède doivent être
adressées à the Honourable F. Abi!,^ail, Secretary for Mines Abigail. Sydney

Très peu de jours avant que cette nouvelle fût publiée parle
journal le Temps, j'avais reçu d'un habitant de la Nouvelle-
Zélande le récit des désastres que les lapins occasionnent égale-
ment dans cette île.

Le 27 novembre 1887, j'écrivis au journal le Temps la lettre
suivante, qui fut insérée le 29 novembre :

A Monsieur le Directeur du Temps.

Votre journal annonçait, il y a peu de jours, que le gouvernement delà
Nouvelle-Galles du Sud était tellement impuissant à lutter contre un fléau
d'un genre particulier — la puUulation des lapins — qu'il proposait un prix
de 625,000 francs pour la découverte d'un procédé destiné à leur extermi-
nation. Des portions considérables de la Nouvelle-Zélande, non moins
ravagées que l'Australie, sont abandonnées par les fermiers, qui renoncent
à l'élevage des moutons par l'impossibilité de les nourrir. Chaque hiver on
tue les lapins par millions, sans que ce carnage paraisse en diminuer le
nombre. Voulez-vous me permettre de faire parvenir dans ces lointains
pays, par l'organe du Tenips^ certaines idées dont l'application pourrait
peut-être avoir quelque succès?

On a employé jusqu'à présent, pour la destruction de ce fléau, des
substances minérales, notamment des combinaisons phosphorées.En s'adres-
sant à de tels moyens, n'a-t-on pas fait fausse route? Pour détruire des
êtres qui se propagent selon les lois d'une progression de vie effrayante,
que peuvent de tels poisons minéraux? Ceux-ci tuent sur place, là où on les
dépose; mais, en vérité, pour atteindre des êtres vivants, ne faut-il pas
plutôt, si j'ose le dire, un poison comme eux doué de vie, et, comme eux,
pouvant se multiplier avec une surprenante fécondité?

Je voudrais donc que l'on cherchât à porter la mort dans les terriers de
la Nouvelle-Galles du Sud et de la Nouvelle-Zélande, en essayant de commu,
niquer aux lapins une maladie pouvant devenir épidémique.

11 en existe une que l'on désigne sous le nom de choléra des poules et
qui a fait l'objet d'études très suivies d^ns mon laboratoire. Cette maladie
est également propre aux lapins. Or, parmi les expi'tiences que j'avais
instituées, se trouve celle-ci : je rassemblais dans un espace limité un
certain nombre de poules, et, en leur donnant une nourriture souillée par

4 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

le microbe qui est la cause du choléra des poules, elles ne tardaient pas à
périr. Les basses-cours sont, quelquefois, ravagées par de véritables épi-
démies de ce mal, dont la propagation est due, sans nul doute, aux
déjections dos premières poules malades qui souillent le sol et les ali-
ments.

J'imagine que la mémo chose arriverait. pour les lapins, et que, rentrant
dans leurs terriers pour y mourir, ils communiqueraient la maladie à
d'autres qui pourraient la propager à leur tour. Mais comment faire pour
que les premiers lapins ingèrent dans leur corps le mal destructeur? Rien
n'est plus facile.

Autour d'un terrier, je placerais une barrière volante entourant un
certain espace oii les lapins viendraient chercher leur nourriture. Des expé-
riences nous ont appris qu'il est facile de cultiver, en état de pureté parfaite
et sur une échelle aussi grande qu'on peut le désirer, le microbe du choléra
des poules, dans des bouillons de viandes quelconques. De ces liquides
pleins de microbes, on arroserait la nourriture des lapins qui, bientôt,
iraient périr ici et là et répandre le mal partout.

J'ajoute que le parasite de la maladie dont je viens de parler est inof-
fensif pour les animaux des fermes, excepté, bien entendu, pour les poules,
mais celles-ci n'ont pas besoin de vivre en pleine campagne.

Je ne doute pas qu'il n'y ait, dans les pays infestés, des personnes toutes
prêtes à appliquer le moyen que je propose, moyen très simple, qui, en tous
cas, vaut la peine d'être tenté.

Veuillez, etc..

Aussitôt après l'envoi de cette lettre, j'eus la curiosité de
faire des expériences directes sur les lapins. Je me rappelais
que le choléra des poules se communique facilement aux lapins ;
mais je n'avais pas fait d'étude suivie sur ces rongeurs; souvent
j'avais vu mourir des lapins qui avaient été placés dans des cages
non désinfectées oii des poules avaient succombé du choléra.
C'est une question de savoir, question résolue affirmativement
par plusieurs, si le choléra des poules n'est pas simplement la
septicémie des lapins, étudiée autrefois par le D'' Davaine.

Je fus bientôt assuré de la facilité avec laquelle le moindre
repas donné aux lapins, après avoir souillé la nourriture par
une culture du microbe du choléra des poules, entraîne rapide-
ment la mort de ces rongeurs.

Voici quelques-unes des expériences que j'ai fait faire à
M. Loir, étudiant en médecine attaché à mon laboratoire.

Le 27 novembre, on place dans une caisse cinq lapins; ils y
restent jusqu'à 6 heures du soir sans prendre de nourriture; à
6 heures, on met dans une petite cuvette lOO'c d'une culture

DESTRUCTION DES LAl'INS EN AUSTIULIE. 5

virulente du choléra des poules, où l'on trempe les feuilles d'un
chou. On laisse égoutter ces feuilles, puis on les donne à man-
ger aux cinq lapins qui, après quelques minutes, ont achevé
leur repas. On place avec eux, à minuit, trois lapins neufs non
contaminés.

Le 28 novembre, à 8 heures du matin, les cinq lapins conta-
gionnés paraissent malades. A M heures, deux sont morts,
dix-sept heures après le début du repas. Les trois autres meu-
rent à 3 heures de l'après-midi, vingt heures après leur repas.

Le 28 novembre, à 7 heures du soir, on trouve mort un des
lapins mi-s la veille, à minuit, avec ceux qui ont mangé le repas
infectieux. Les deux autres lapins ne sont pas devenus malades.

Le samedi 3 décembre, à 5 heures du soir, on donne à man-
ger à quatre lapins des feuilles de chou sur lesquelles ont été
répandus 10'-'^ de culture virulente de choléra des poules, étendus
de 100'^^'^ d'eau stérilisée. A minuit, tout le repas a disparu
depuis plusieurs heures; on place avec eux quatre lapins neufs.

Le 4 décembre, à 8 heures du matin, deux lapins semblent
tristes. A 11 heures, il y a un mort ; à 2 heures, deux autres
morts; à 4 heures meurt le dernier de ceux qui ont mangé.

On laisse les cadavres avec les lapins neufs mis la veille, à
minuit, dans la caisse.

Le 5 décembre, on trouve un de ces lapins mort; le 6 décem-
bre, un autre; le 7, un troisième; enhn le quatrième meurt le
y décembre.

Les lapins précédents étaient des lapins domestiques.

Le 17 décembre, on donne à un lapin de garenne 10*^^ de
culture de choléra des poules, également sur une feuille de chou.

Le 18 décembre, il meurt.

Dans tous les cas précédents, on a vérifié que la mort était
bien due au microbe du choléra des poules.

Le 3 décembre et jours d'après, on fait des expériences sur
les animaux suivants : porcs, chiens, chèvres, moutons, rats,
chevaux, ânes, toujours par contamination des repas. Aucun de
ces animaux n'a été malade.

Il y a plus : l'action sur les lapins est si rapide, il est si peu
besoin de multiplier les repas que je suis persuadé, en me
reportant à mes anciennes expériences sur les poules, que
celles-ci même ne mourraient pas si on les laissait sur le sol que

6 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

les repas des lupins auraient pu souiller en partie; elles ont,
pour la maladie, beaucoup moins de réceptivité que les lapins.
Au contact de l'air, le microbe du choléra des poules meurt
assez promptement. II perd sa virulence à 51° C, température
quelquefois atteinte, dit-on, en Australie pendant Tété, mais il
ne serait jamais nécessaire de s'occuper des lapins, au milieu
du jour, en pleine chaleur.

La conservation du microbe du choléra des poules est facile,
au contraire, à l'abri de l'air et pendant plusieurs années : on
pourra donc toujours se procurer de la semence très virulente.
Mes expériences d'autrefois communiquées à l'Académie des
Sciences en sont la preuve.

Les cultures du choléra des poules peuvent être failes dans
les bouillons les plus divers d'animaux quelconques. Un des
plus économiques serait sans doute celui qu'on pourra préparer
avec la chair des lapins.

Il résulte des expériences qui précèdent que, non seulement
les lapins qui ont ingéré une nourriture souillée par le microbe
meurent très rapidement, en moins de vingt-quatre heures,
mais que les lapins associés à ces derniers, qui n'ont point eu
d'aliments contaminés, meurent également en grand nombre.
Je réserve la question du mode de contagion. C'est un point
que j'examinerai plus tard.

Est-il vrai que les lapins d'un terrier ne se mêlent pas à ceux
des terriers voisins ?

On peut envisager, sans appréhension pour la réussite du
procédé, le cas où les lapins d'un terrier ne frayeraient pas avec
ceux des terriers voisins et n'y porteraient pas la contagion
après qu'ils auraient été contaminés.

La maladie se communique si facilement par les repas que,
alors même que la contagion n'existerait pas des lapins infectés
aux autres non infectés, la destruction de ces animaux n'en
serait pas moins facile.

Je parle, dans ma lettre au journal le Temps, de barrières
volantes placées autour des terriers. Cette complication serait
inutile.

Je me représente l'épreuve en grand de la manière suivante :
autour d'un ou plusieurs terriers, je ferais faucher une certaine
quantité d'herbe qui serait ramenée ensuite avec des râteaux à

DESTRT^CTTON DES LAPINS EN AUSTRALIE. 7

la portée des lai>iiis, avant leur sortie du soir. Cette herbe,
souillée de la culture du microbe, serait mangée par les lapins
dès qu'ils la rencontreraient sur leur passage. Une barrière
serait inutile pour les arrêter et les forcer à mang-er. On aurait
ainsi, en quelque sorte, la répétition de l'expérience de Reims,
dont je vais parler.

Il était bien désirable qu'une expérience pût avoir lieu sur
une grande échelle.

Le hasard vint bientôt me l'oiïrir dans les conditions les plus
favorables.

jyjme yve Pommerv^^ de Reims, propriétaire de la grande mai-
son de vins de Champagne qui porte son nom. m'adressa la
lettre suivante, après avoir lu ma note insérée dans le Temps :

Reims, le 3 décembre 1887.
Monsieur,

Je possède à Reims, au-dessus de mes caves, un clos de huit hectares,
totalement entouré de murs. J'ai eu la fâcheuse idée d"y mettre des lapins
pour procurer une chasse, en ville, à mes petits-enfants.

Ces bêtes ont tellement pullulé et minent le sol à un tel point que je
désire les détruire. Les furets sont impuissants à les faire sortir de tas
énormes de craie où ils se réfugient.

S'il pouvait vous être agréable d'expérimenter le procédé que vous préco-
nisez pour la destruction de ces animaux, en Australie, j'offre de vous en
faciliter le moyen.

Recevez, etc.

Signé : V" Pomme ry.

Rientôl après, j'appris de mon intelligente correspondante
que, dans la crainte de voir les lapins de son clos, poussés par
la faim, prolonger outre mesure leurs g-aleries souterraines et
compromettre la solidité des voûtes des caves, on avait eu
depuis longtemps l'idée de les retenir dans leurs terriers, non
loin de la surface du sol, en leur servant, chaque jour, un repas
de luzerne ou de foin distribué autour des terriers. On comprend
dès lors aisément combien il était facile de tenter la destruction
des lapins du clos de M™*^ Pommery.

Le vendredi, 23 décembre, j'envoyai à Reims M. Loir arroser
le repas du jour d'une culture récente du microbe de choléra
des poules.

Comme à l'ordinaire, la nourriture fut consommée dans

8 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

rintervalle de quelques minutes. Le résultat en fut pour ainsi
dire surprenant.

jyjiiie Pommery m'écrivit, le 26 décembre :

Samedi matin (par conséquent dès le lendemain du repas mortel), on
compta dix-neuf morts en dehors des terriers.

Le dimanche, le clos ne fut pas visité.

Le lundi matin, on compta encore treize morts, et depuis samedi on n'a
pas vu un seul lapin vivant courir sur le sol. En outre, comme il était
tombé un peu de neige pendant la nuit, on ne vit nulle trace de pattes de
lapins autour des tas de craie.

En général, les lapins meurent dans leurs terriers. Les
trente-deux cadavres trouvés sur le sol du clos devaient donc
représenter une très faible minorité parmi les morts, ainsi qu'on
le verra tout à l'heure.

Dans une autre lettre du mardi 27, M"^^ Pommery m'écrit :

La luzerne (luzerne déposée autour des terriers le lundi soir) n'a pas été
touchée et de nouveau on n'a vu nulle trace de pattes imprimées sur la
neige. Tout est mort...

Et M'"^ Pommery, faisant allusion à des journaux anglais
qui avaient beaucoup critiqué le procédé que j'avais proposé,
journaux qu'elle avait eu l'obligeance de m'adresser, ajoute :

Que deviennent les attaques anglaises en pr(''se)ice d'un tel résultat ? Un
clos de 8 hectares fourmillant de lapins, devenu un champ de mort.

M. Pasteur empoisonne un repas ordinaire de ces lapins, et les jours
suivants rien ne remue; tout est fini, tout est mort.

Combien de lapins sont morts dans les terriers? Il est difli-
cile de le savoir exactement. Cependant M"'" Pommery m'in-
forme, par une lettre que je viens de recevoir, aujourd'hui 5 jan-
vier, « que les ouvriers estiment à beaucoup plus dun mille le
nombre des lapins qui venaient manger chaque jour les huit
grosses bottes de foin qu'on distribuait autour de leurs terriers ».

D'autre part, ajoute M"^" Pommery, partout où l'on découvre
un peu les monceaux de craie, demeure habiluelle des lapins,
on voit des tas de cadavres de deux, trois, quatre et cinq lapins.

mmim keciierciies sir la race

Par le D^ BARDACH,

Sous-directeur à l'Institut bactériologique d'Odeasa.

I. INOCULATIONS SOUS-CUTANÉES.

Dans ]o premier numéro des Annales, M. Pasteur émet
l'opinioii que peut-être on pourrait obtenir l'immunité par l'ino-
culation préventive de moelles longuement desséchées, et conte-
nant par suite une quantité de virus assez petite pour no plus
provoquer la rage chez les lapins inoculés sous la dure-mère.
J'ai fait à cet égard l'expéj'ience suivante sur six chiens.

Aux dates des 2, 4 et 6 février, six chiens furent inoculés
sous la peau, chacun par trois seringues pleines de moelles dé-
layées et âgées de sept jours — du 2G, 28 et 31 janvier.

Ces émulsions furent inoculées en même temps à des lapins.
Celui du 2 février mourut le 22, le lapin de passage, inoculé avec
son bulbe, a résisté ; celui du 4 février mourut le O'" mars, le lapin
de passage eut une période d'inoculation de sept jours; le troi-
sième lapin du 6 février, resté indemne, fut employé pour d'au-
ti^es expériences après un mois et demi, terme complètement
suffisant pour la manifestation de la rage.

Le 12 février, les six chiens, plus un septième de contrôle, et
deux lapins furent inoculés par trépanation avec du virus de rage
des rues (2* passage, incubation de 13 jours).

Le 22 février un des chiens fut pris de rage furieuse et mou-
rut le 24. Un second tomba malade le 24 et mourut le 26. Le
20, ce furent le chien témoin, le troisième des chiens inoculés,
et un des lapins qui tombèrent malades; le chien de contrôle et
le lapin moururent le 28, et le troisième chien le 29. Le second
lapin de contrôle et le quatrième des chiens tombèrent malades
le 28 février et moururent le 1*^'" mars. Les deux autres chiens
supportèrent la trépanationetsbntencore aujourd'hui dans notre
chenil.

40 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Cette expérience sert ainsi d'appui à l'opinion de M. Pasteur,
d'après laquelle les moelles à faible virulence peuvent à elles
seules rendre l'organisme réfractaire. L'immunité se développe
en raison de l'adaptation des phagocytes à digérer le virus vivant,
comme l'a exposé M. Gamaléia dans le 5* numéro des Anjiales.

La preuve que c'est justement le virus vivant, inoculé sous
la peau, qui développe l'immunité dans l'organisme, ressort des
principales expériences que M. Pasteur fit sur les chiens : il
leur inocula jusqu'à la moelle d'un jour et ne fit qu'ensuite l'o-
pération du trépan ; tous les chiens survécurent.

J'ai fait des expériences analogues : six chiens inoculés de
cette même manière supportèrent impunément une inoculation
sous la dure-mère.

D'un autre côté je fis des inoculations préventives à trois
chiens, en commençant par une moelle de 14 jours et termi-
nant par celle de 4 jours. Le 11 novembre, les chiens furent ino-
culés de la rage des rues. Le 26 novembre, un d'eux fut pris de
rage paralytique, et le 8 février, c'est-à-dire après 87 jours, le
second mourut de rage furieuse. Le troisième chien avait acquis
un état réfractaire. La durée inusitée de l'incubation — 87 jours
— du second chien s'explique peut-être par une vaccination,
nommée « partielle » par M. Pasteur.

Ainsi, dès qu'on réduit l'inoculation à des moelles de viru-
lence faible, en supprimant celles d'un, de deux et de trois jours,
la préservation, au lieu d'être absolue, ne devient que relative :
elle se réduit à la minorité des cas, un sur trois.

L'inoculation préventive du second chien n'a fait que pro-
longer la période d'incubation.

Mes expériences d'inoculations sous-cutanées de virus de pas-
sage servent de preuve encore plus convaincante que ce sont
principalement les moelles les plus virulentes qui élaborent
l'immunité.

Le 22 novembre, sept chiens furent inoculés sous la peau du
flanc, chacun par une pleine seringue de virus de 138*^ passage.
Le 19 décembre, l'un d'eux fut pris de rage paralytique et mou-
rut le 21. Les six autres survécurent et furent trépanés le 1*"" fé-
vrier ainsi que deux lapins, à l'aide d'une moelle de rage des
rues (3^ passage, 13 jours d'incubation).

RECHERCHES SUR LA RAGE. 11

Le 13 février, deux des chiens et un lapin furent pris de rage
paralytique et succombèrent le 15 et le 16. Un autre lapin et le
troisième ciiien tomiaèrent malades de rage paralytique le 15 fé-
vrier et moururent le 17.

Les lapins, inoculés avec une émulsion du bulbe des chiens
succombés eurent la période d'incubation de la rage des rues,
c'est-à-dire de 14 (dans deux cas) et de 15 jours (dans le troisième).

Les autres sont encore aujourd'hui en bonne santé. Ils furent
de nouveau inoculés le 8 mai avec le bulbe d'un chien enragé et
résistèrent, tandis que le chien témoin tomba malade le 13 mai
et succomba à la rage paralytique le 15.

Ainsi une inoculation sous-cutanée, même d'une seule seringue
de virus de passage, a rendu l'organisme assez réfractaire (dans
trois cas sur six) pour résister à des trépanations réitérées.

M. Pasteur a prouvé, comme l'on sait, qu'il y a des cas où le
virus depassag-e, inoculé sous la peau, ne provoque point la rage
et quelquefois même rend l'organisme réfractaire à des inocula-
tions subséquentes sous la dure-mère. L'expérience ci-dessus,
et celles qui vont suivre servent d'appui à cette conclusion.

Le 8 février, on inocula trois chiens, très grands, par cinq
seringues de virus du 150® passage sous la peau de la tête ; ils
survécurent tous. Après trois mois, le 8 mai, ils furent inoculés
(en même temps que les chiens de l'expérience précédente), avec
le bulbe d'un chien enragé. L'un des chiens tomba malade le
25 mai et mourut le 27; les deux autres restèrent vivants. Le
lapin de passage eut une incubation de 14 jours.

Le 13 février, on inocula deux chiens par deux seringues de
bulbedu23^passage(incubationde8jours);ilssurvécurenttousles
deux. Le 8 mai, ils furent trépanés avec les précédents et tom-
bèrent malades tous les deux le 24 mai, ils moururent le 26. Le
lapin de passage eut une incubation de 13 jours.

A partir du 24 et du 25 mai, j'ai inoculé cinq chiens, journaliè-
rement, pendant dix jours, par une seringue de virus de passage
chacun, et cinq autres par une seringue de virus de la rage des
rues'. Pas un de ces chiens ne tomba malade. Le 8 et le
12 novembre, tous les dix furent trépanés.

1. Le bulbe du chien euragé était conservé dans la glycérine et à la glacière.
Un lapin, inoculé dis jours après, le 3 juin, fut pris de rage le 18 juin, ce qui
prouve que la moelle était encore virulente.

12 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Tous les chiens inoculés par virus de la rage des rues suc-
combèrent aux dates des 20, 2i et 26 novembre: deux d'entre
eux de rage furieuse et trois de rage paralytique.

Des cinq chiens inoculés avec le virus de passage, un seul
mourut le 24 novembre de rage paralytique. (Le lapin de passage
eut une incubation de 14 jours.) '

On peut déduire deux conclusions de ces expériences :

1° On peut quelquefois obtenir l'immunité par l'introduction
sous la peau d'une seule seringue de virus fixe, et cette possibilité
s'accroît avec la quantité du virus de }»assage introduit ; ainsi
sur six chiens inoculés par une seringue pleine, trois devinrent
réfractaires; sur trois, inoculés avec 5 seringues pleines, deux le
devinrent; sur 5, inoculés avec 10 seringues pleines, quatre le
devinrent. En tout, 9 sur 14 obtinrent l'immunité, tandis que
ceux qui furent inoculés avec une seringue de moelle de passage
(23") de lapin et avec 10 seringues de moelle à rage des rues suc-
combèrent tous à une nouvelle inoculation sur la dure-mère.

Ainsi, aumoins d'après mes expériences, ce n'est que le virus
de passage qui peut contribuer au développement de l'immunilé;
le virus des rues, renforcé ou en recrudescence (23^ passage; n'y
contribue point.

On peut faire la supposition suivante à cet égard : peut-
être le virus rabique, ayant passé par plusieurs générations de
lapins et étant devenu fixe, a acquis la faculté d'élaborer, en se
cultivant dans le système nerveux d'autres animaux, de certains
produits, résultant de son activité vitale, qui accroissent l'énergie
des phagocytes à digérer les microbes rabiques et donnent ainsi
une immunité durable. J'espère pouvoir confirmer cette hypothèse
par des expériences ultérieures.

2° L'inoculation sous-cutanée de bulbes à virus fixe, ainsi que
celle de la rage des rues, paraît être défavorable à la culture et à
la propagation du microbe rabique; ainsi, des 22 chiens inoculés
sous la peau, il n'y en a eu qu'un pris de rage.

IL INOCULATION DANS LE TISSU NERVEUX.

En présence des résultats précédents, on se pose la question
suivante : quel milieu dans notre corps est le plus favorable à la
transmission du virus au système nerveux central? Le tissu nerveux

UECllERCHES SUR LA RAGE. iS

étant le meilleur milieu pour la culture et la propagation de ce
virus, il est naturel de supposer que la transmission s'opère par
voie du système nerveux périphérique. Les expériences, entre
prises par moi à cet égard, donnèrent les résultats suivants.

Le !"'■ juin, j'introduis très graduellement sous le névrilème
du nerf radial droit, dégainé dans ie tiers supérieur de l'épaule
d'un chien, une demi-seringue de virus fixe (79'-' passage). Le
lapin inoculé en même temps, par trépanation, tomba malade
le 8 et mourut le 10. Le 3 juin, je fais la même expérience avec
un chien et un lapin. Ce dernier tomba malade le 10 et suc-
comba le H.

Le o juin, même expérience avec un chien et un lapin. Celui-
ci tomba malade le 12 juin et mourut le 14.

Le 6 juin, même expérience sur 4 chiens et 2 lapins. Ceux-ci
tombèrent malades le 13 et moururent le 15.

Le 13 juin, le chien inoculé dans le nerf radial droit, à la
date du 3, cessa de manger, commença à avoir des envies de
mordre, sa démarche devint chancelante, son aboiement hurlant,
ses mouvements incoordonnés, et il succomba le lendemain aune
paralysie complète.

Les inoculations de premier et deuxième passages, faites avec
le bulbe de ce chien, donnèrent une incubation de 7 jours et
la mort après 9 jours.

Le 20 juin, ce fut le chien inoculé le 6 qui tomba malade. Il
cessa de manger, sa voix devint rabique, il s'affaissait du côté
droit en voulant se relever, le train de derrière fut paralysé, il eut
des crampes chroniques à la jambe gauche, la sensibilité et les
réflexes excités, et il succomba le lendemain à une paralysie
complète. A l'aide de son bulbe, on fit deux passages de lapin à
lapin, qui furent pris de rage après 7 jours et succombèrent après
9 et 10 jours. En outre, des lapins inoculés à l'aide des deux
nerfs radiaux tombèrent malades au bout de 9 jours et succom-
bèrent le 11'' jour.

Les 5 autres chiens résistèrent. 11 n'en résulte pas moins que
le virus rabique, mis en contact immédiat avec le système nerveux
périphérique, trouve en lui quelquefois un milieu favorable à
sa propagation, et alors la durée de l'incubation est de 10 à
14 jours.

Il est possible que la résistance de la majorité des chiens soit

14 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

due à ce que le nerf radial est entouré dans sa partie antérieure
d'un réseau de menus vaisseaux. Il est facile de s'en assurer en
injectant une solution saturée de couleur quelconque, par exemple
de violet de gentiane, qui fait alors voir un réseau de belle cou-
leur bleue de profonds vaisseaux lymphatiques, débouchant dans
le conduit brachial. La tension des vaisseaux produite par l'in-
jection fait peut-être émigrer des phagocytes, qui englobent et
digèrent les microbes rabiques et, par cela même, rendent l'or-
ganisme réfractaire. Cette explication est appuyée parles résultats
des injections subséquentes sous la dure-mère de ces mêmes
chiens.

Le 13 septembre, les 5 chiens qui avaient résisté furent ino-
culés par la moelle de 7^ passage de la rage de loup (incubation
de 12 jours); en même temps on inocula 2 lapins, qui tombèrent
malades le 26 septembre et moururent le 29.

Le 27, 2 des chiens furent pris de rage paralytique et mouru-
rent le 29. Le virus de passage donna une incubation de 12 jours.

Le troisième chien fut pris de rage paralytique le 29 et mou-
rut le 30. Le virus de passage donna une incubation de 12 jours.

Les 2 autres chiens sont encore aujourd'hui vivants. Gela
fait que des 5 chiens ayant résisté à l'inoculation du virus dans
le nerf, — 2 avaient acquis l'immunité.

Il est ainsi hors de doute que les nerfs périphériques peuvent
servir quelquefois à la transmission et à la propagation du
virus rabique. Les faits cliniques suivants s'accordent complète-
ment avec cette conclusion.

S. I... a reçu le 25 mars quatre profondes plaies par morsure de
loup dans le lieu de ramification du nerf radial gauche. Il fut
pris de rage le 2S avril et mourut le 27. L'infection suivit au
début le cours du nerf : pendant que S. I... mangeait, buvait
et avait encore une température normale, il se développa une
tumeur dans la région de ramification du nerf radial droit ; le
malade eut une sensation comme s'il maniait de la fourrure, et
des sensations d'engourdissement, de fourmillement. Ces symp-
tômes m'engagèrent à porter mes expériences de nécropsie sur
le quart inférieur du tronc du nerf radial; je m'en servis pour
faire l'opération du trépan à deux lapins. Les premiers symptômes
de la maladie se manifestèrent chez eux le IS avril, et la mort
survint le 17. Je fis encore trois passages de lapin à lapin, qui

REGIIEIICIIES SUR f.A RAGE, 15

donnèrent une période d'incubation de 14 à 16 jours et le tableau
complet de la rage du lapin.

Le nerf radial gauche du malade ne fut malheureusement
pas expérimenté, de sorte que la question de savoir si ce nerf
non endommagé contenait du virus ne put point être résolue. Le
cas suivant est par suite beaucoup plus démouslratif.

G. M..., attaqué par un loup enragé, s'efforça de l'étrangler
de la main droite, en lui bouchant en même temps la gueule de
la main gauche ; celle-ci y resta prise près d'une demi-heure et
ne fut retirée que lorsqu'on trancha la mâchoire supérieure du
loup. De nombreuses blessures étaient concentrées dans la
région du nerf médian et du cubital. Les premiers symptômes
de la maladie se manifestèrent par un exsudation sérosanguine
dans le lieu des morsures, par des douleurs et une sensation de
pesanteur dans le bras gauche jusqu'à l'articulation de l'épaule.
Ces phénomènes n'eurent pas lieu du côté droit.

Les troncs des nerfs médian et cubital, droit et gauche, furent
pris et la trépanation, faite à leur aide, donna les résultats sui-
vants.

Le 29 mai, on inocula deux lapins avec une émulsion du nerf
médian; ils tombèrent malades le 12 et le 43 juin et moururent
le 14.

Le 29 mai, on inocula deux lapins avec une émulsion du nerf
cubital; ils tombèrent malades le 13 et le 14 juin, et moururent
le 13 et le 16.

Les cinq passages de lapin à lapin eurent une incubation de
12 à 16 jours, et la maladie présenta les symptômes ordinaires.

Les lapins de contrôle, inoculés avec les nerfs médian et
cubital droits, résistèrent.

Ainsi, dans les deux cas de maladie, le développement du
virus se faisait par la voie du système nerveux; les expériences
autant que les observations cliniques donnent ainsi à croire
que les nerfs sont une des voies par lesquelles le virus se dirige
vers le cerveau.

IlL DU VIRUS RABIQUE DANS LA SALIVE HUMAINE.

La question de la présence du virus rabique dans la salive, ou,
ce qui est la même chose, dans les glandes salivaires des per-

16 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

sonnes enragées n'a pas été résolue jusqu'à présent. Je vais
exposer ici les résultats que j'ai obtenus à cet égard.

Dans tous les cas suivants, on fit des inoculations par l'opéra-
tion du trépan à des chiens et à des lapins, à l'aide d'émulsions
des glandes salivaires, retirées de 12 à 24 heures après la mort.
Huit de nos rabiques nous étaient arrivés déjà malades, et
n'avaient ainsi point subi d'inoculations préventives.

Parallèlement à ces inoculations, on en faisait toujours d'au-
tres, aussi à des chiens et à des lapins, à l'aide d'une émulsion du
bulbe de ces mêmes malades. Tous les animaux ainsi traités
mouraient toujours après 44 à 20 jours.

Le 3 juillet, 1886 on trépane deux lapins a l'aide d'une émulsion de la
glande salivaire de G., mordu par un chien enragé. Tous les deux tombè-
rent malades le 26 juillet et moururent le 28. Incubation de 23 jours.

Le 10 juillet, on trépane deux lapins (J. J..., mordu par un loup); ils
furent pris de rage le 29 juillet et moururent le 30. Incubation de 19 jours.

Le 12 octobre, on trépane trois lapins (Gh..., mordu par un chien
enragé). Tous les trois tombèrent malades le 26 octobre et moururent le 28.
Incubation de 14 jours.

Le 13 octobre, on tréi)ane deux lapins à l'aide de la glande salivaire de
K..., mordu par un chien enragé. L'un fut pris de rage le 29 octobre, l'autre
le 30. et ils moururent le l*i" et le 2 novembre. Incubation de 16 jours. Le
premier lapin de passage eut une incubation de 14 jours.

Le 15 décembre, on trépane deux lapins (glande salivaire de V. S.,
mordu par un loup). Ils tombèrent malades le 30 décembre et moururent le
1''' janvier. Incubation de 15 jours.

Le 17 décembre, on trépane deux lapins (glande salivaire de V..., mordu
par un loup). Ils furent pris de rage les 7 et 8 janvier, et moururent le 10,
Incubation de 21-22 jours.

Le 18 décembre, on trépane deux lapins (G..., mordu par un loup); ils
tombèrent malades le 4 janvier et moururent le 5. Incubation de 17 jours.

Le 21 décembre, on trépane deux lapins (M..., mordu par un loup); ils
tombèrent malades le 8 janvier et moururent le 9 et le 10. Incubation de
18 jours.

Le 3 janvierl887, on trépane deux lapins (P..,, mordu par un chien); ils
tombèrent malades le 20 janvier et moururent le 22. Incubation de 17 jours.

Le 16 janvier, on trépane deux lapins (B..., mordu par un loup); ils tom-
bèrent malades le 31 et moururent le 2 février. Incubation de 15 jours.

Le 20 janvier, on trépane deux lapins (B..., mordu par un loup); ils tombè-
rent malades le 13-14 février et moururent le 15. Incubation de 24-25 jours.

Le 22 février, on trépane un chien (D..., mordu par un chien) ; il fut pris
de rage furieuse le 2 avril et mourut le 5, Incubation de 40 jours.

Le 25 février, on trépane deux lapins (S,.., mordu par un loup) ; ils tombé-

RECHERCHES SUR LA RAGE. 47

rent malades le 47 avril et moururent le 18. Incubation de 20 jours. Un
chien, trépané à l'aide de la même émulsion, fut pris de rage furieuse le
25 avril et mourut le 27. Incubation de 28 jours.

Le 28 mars, on trépane deux lapins (J..., mordu par un loup); ils tombèrent
malades le 13 et le 15 avril, et moururent le 15 et le 16. Incubation de 16
et 48 jours. Un chien, trépané avec la même émulsion, fut pris de rage
furieuse le 13 mai et mourut le 17. Incubation de 45 jours. Le lapin de pas-
sage eut une période d'incubation de 14 jours.

Le 1 1 mai, on trépane deux lapins (J..., mordu par un chien), qui tombè-
rent malades le 26 mai et moururent le 28. Incubation de 15 jours. Un chien
trépané avec l'aide de la même émulsion fut pris de rage paralytique le
29 mai, et mourut le 30. Incubai ion de 18 jours.

Le 29 mai, on trépane deux lapins (M..., mordu par un loup); ils tombè-
rent malades le 13 juin, et moururent le 16 et le 17. Incubation de 16 jours.
Deux chiens furent trépanés avec l'aide de la même émulsion. L'un fut pris
de rage paralytique le 27 juin, et mourut le 30. Incubation de 28 jours.
L'autre, après 51 jours, manifesta une légère parésie des extrémités posté-
rieures, une démarche chancelante ; le 22 juillet, la parésie des extrémités
progressa ; le jour suivant, par contre, il n'y eut qu'une légère incoordination
des mouvements qui disparut le 24 juillet. Le chien est encore aujourd'hui
bien portant.

Le 20 juillet, on trépane deux lapins (P..., mordu par un loup) ; ils tom-
bèrent malades le 4 août et moururent le S. Incubation de 15 jours.

Le 22 juillet, on trépane deux lapins (P.... mordu par un loup) ; ils tom-
bèrent malades le 3 aoiit et moururent le 5 et le 6. Incubation de 12 jours.

Le 12 août, on trépane un lapin (glande salivaire de Ka..); il tomba malade
le 25 août et mourut le 27. Incubation de 13 jours.

Le 42 août, on trépane un lapin (glande salivaire de Kr. .); il tomba
malade le 27 août et mourut le 28. Incubation de 16 jours.

Le 16 août, ont répane un lapin avec l'aide de laglande salivaire de E... ;
il tomba malade le 1" septembre et mourut le 3. Incubation de 16 jours.

Le 21 août, on trépane un lapin avec l'aide de la glande salivaire de A. .. ;
il tomba malade le 3 septembre et mourut le 5. Incubation de 14 jours.

Ainsi, dans 22 cas, tous les lapins succombèrent à la rage, avec
une période d'incubation de 18 jours, et, sur six chiens, cinq
succombèrent avec une période d'incubation de 32 jours.

La prolongation de l'incubation est, sans doute, due dans la
majorité des cas à la petite quantité de virus contenue dans la
glande salivaire; mais néanmoins sa présence doit être reconnue
comme indubitable. Par conséquent l'opinion émise par M. Pas-
teur, d'après laquelle la rage pourrait être transmise par mor-
sure humaine, est appuyée expérimentalement.

â

NOTES DE LABORATOIRE SUR LA PRÉSENCE DU VIRUS RABIiiUE

DANS LES NERFS,

F»ar E. roux:.

Par quelle voie le virus rabique va-t-il de la morsure aux
ceutres nerveux ? par quelle voie se rend-il aux glandes salivaires ?
ce sont là des questions d'un grand intérêt dans l'étude de la rage.
Les expériences faites au laboratoire de M. Pasteur ' ont mon-
tré que le virus rabique pouvait arriver au cerveau et à la moelle
par la voie sanguine. D'un autre côtelés démangeaisons, les dou-
leurs partant de la blessure, que l'on observe si souvent chez les
personnes mordues, ont fait croire depuis longtemps que le virus
rabique se propageait le long des nerfs. M. Duboué, de Pau, a
soutenu que c'était toujours par les nerfs que le virus rabique
atteignait les centres nerveux. Le récent mémoire de MM. Ves-
tea et Zagari, qui a été analysé page 92 de la première année de
ces Annales, a de nouveau appelé l'attention sur cet intéressant
sujet. Dans ce numéro même, M. Bardach consacre à cette question
une partie de son travail. Nous avons donc pensé que le moment
était bien choisi pour exposer quelques-unes des expériences
faites au laboratoire de M. Pasteur sur la présence du virus rabi-
que dans les nerfs.

Dans une note présentée en 1884 à l'Académie des Sciences,
MM. Pasteur, Chamberland et Roux ^ ont annoncé qu'ils
avaient donné la rage à des animaux par l'inoculation des nerfs
pneumogastriques et sciatiques d'un chien enragé. La matière
nerveuse avait été inoculée par trépanation, et la durée de
l'incubation de la maladie avait été beaucoup plus longue que
lorsqu'on inocule de la même façon la substance du cerveau ou

1. Pasteur, Chamberland, Roux et TliuilJier, Comptes rendus. Acad.des .fc. t. XGV,
p. 4487, 488i2.

4. Comptes rendus Acad. des se, p. 457, t. XCVIIl.

VIRUS RABIQUE DANS LES NERFS. 19

de la moelle, comme si le viras rabique était très peu abondant
dans le tissu des nerfs. Dans une expérience, on a inoculé à
trois chiens le nerf pncumog-astrique, divisé en trois tronçons :
chaque animal reçut sous la dure-mère le liquide obtenu en
broyant séparément un de ces tronçons dans un liquide stérilisé.
Les animaux qui avaient reçu le bout supérieur et le bout infé-
rieur du pneumogastrique prirent la rage, celui qui avait été
inoculé avec le bout intermédiaire resta bien portant. Il semble
donc que le virus rabique est peu abondant dans les nerfs, et il
faudra, pour le mettre en évidence, inoculer une quantité aussi
grande que possible de la matière du nerf qne l'on veut étu-
dier.

Si le virus rabique se propage le long des nerfs, on aura
quelques chances de le rencontrer dans les cordons nerveux qui
partent de la blessure. Nous avons pu inoculer les nerfs du mem-
bre mordu de plusieurs personnes ayant succombé à la rage.
Nous allons citer quelques-unes de ces expériences.

Le 6 novembre 1883, nous faisons, à l'Hôpital des enfants, l'autopsie d'un
enfant de sept ans mordu au bras droit à travers ses vêtements, 55 jours
auparavant. L'enfant avait succombé, le 5 novembre, à une rage caracté-
ristique. Dès le 24 octobre, il avait éprouvé un malaise général, et de temps
à autre une gêne dans le bras mordu. Le 3 et le 4 novembre, la cicatrice de
la morsure est douloureuse, et l'enfant accuse dans le bras une douleur qui
remonte jusqu'à l'aisselle.

A l'autopsie, on trouva les ganglions de l'aisselle rouges, très augmentés
de volume et succulents; les nerfs du bras avaient leur aspect normal. On
enlève, avec pureté, tout le paquet nerveux de l'aisselle sur une étendue de
trois centimètres environ, on broyé les nerfs dans du bouillon stérilisé.
L'émulsion est passée sur une toile de platine fine préalablement chauffée

au rouge, et avec le liquide ainsi obtenu, on inocule, par trépanation, un

chien neuf et un lapin.

Le 26 novembre, le lapin est pris de rage (20 jours d'incubation). Le

4 décembre, le chien est devenu mordeur, il a la voix rabique. Le 5, il est

extrêmement furieux ; il meurt le 6 décembre (28 jours d'incubation).
Deux lapins inoculés avec le bulbe de cet enfant avaient été pris de

rage : l'un le 16 novembre (incubation 10 jours), l'autre le 23 novembre

(incubation 17 jours).

Dans ce cas, les nerfs du bras mordu contenaient le virus
rabique, mais on peut se demander si le virus venait du point
d'inoculation ou s'il s'était propagé de la moelle épinière dans les
nerfs, comme cela a lieu évidemment chez les animaux inoculés

20 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

de la rage par trépanation, et dont les nerfs sont souvent viru-
lents.

Dans les expériences qui suivent nous avons inoculé, par
comparaison, les nerfs du membre mordu et les nerfs du mem-
bre sain.

Cl... Eugène est mordu le 7 août 1886 par son chien à l'avanl-bras droit
nu, qui porte trois morsures profondes. Il est traité à l'Institut Pasteur du
H août au 23 août. Le 12 octobre, Cl... éprouve des fourmillements dans le
bras droit, et comme un engourdissement dans le petit doigt et dans
l'annulaire de la main droite. La douleur se fait sentir jusque dans l'épaule.
Le 15 octobre, les symptômes rabiques sont caractéristiques, impossibilité
d'avaler, aérophobie, etc. — Cl... succombe à l'hôpital Tenon dans la nuit
du 17 au 18 octobre.

L'autopsie est faite le 19 octobre au matin : on enlève séparément et
avec pureté, le nerf cubital, le nerf radial et le nerf médian du bras mordu,
sur une longueur de 15 centimètres environ à partir des cicatrices : on
extrait de même les nerfs cubital, radial et médian du côté sain. Chaque
nerf est broyé séparément, et l'émulsion, obtenue avec chacun d'eux, est
inoculée par trépanation à un lapin : on a soin d'injecter une assez grande
quantité de liquide dans la cavité arachnoidienne. Aucun des animaux
inoculés avec les nerfs, soit ceux de côté sain, soit ceux du côté malade,
n'a pris la rage. Ils ont, cependant, été conservés en observation pendant
plus de sept mois.

Les sensations d'engourdissement et de fourmillements
éprouvées dans le petit doigt et l'annulaire, trois jours avant que
la rage fût déclarée, semblaient indiquer que le virus rabique avait
suivi le trajet du nerf cubital, et cependant celui-ci n'a rien
donné à l'inoculation. Peut-être le virus rabique était-il en
quantité insuffisante dans les nerfs pour communiquer la rage
aux lapins. On peut aussi supposer qu'il s'était cultivé silen-
cieusement dans les nerfs pendant l'incubation de la maladie et
qu'il n'y existait plus au moment de l'autopsie. Les lapins
inoculés avec le bulbe furent pris de rage le 14e jour, ainsi que
ceux qui avaient recula moelle ; ceux inoculés avec la substance
d'une circonvolution frontale droite et d'une circonvolution
frontale gauche étaient enragés le 16'' jour.

Le 10 avril 1887 mourait de la rage, à l'Hôpital des enfants, une petite
fille mordue au poignet droit. Il fut impossible de savoir si l'enfant avait
éprouvé des douleurs dans le bras mordu pendant les jours précédents.
Elle ne s'était pas plainte, et la cicatrice de sa morsure ne paraissait nulle-

VIRUS RABIQUE DANS LES NERFS. 21

ment douloureuse. On prend tout le paquet nerveux à la partie supérieure
du bras mordu et du bras sain. On broie ensemble les divers nerfs du bras
mordu, et on inocule l'émulsion par trépanation à deux lapins. On fait la
même chose pour les nerfs du bras sain, qui sont inoculés également par
trépanation à deux lapins. •

Deux lapins inoculés avec le bulbe furent pris de rage le 26 avril (incu-
bation : 15 jours).

Les lapins inoculés par le paquet nerveux du bras mordu furent pris de
rage le 4 mai (incubation : 34 jours).

Les lapins inoculés par le paquet nerveux du bras sain furent pris de
rage le 44 juin (incubation : 65 jours).

Il semble que dans ce cas les nerfs du bras mordu étaient
plus riches en virus rabique que ceux du bras sain.

Le 30 mai 1887, H... est mordu par un chien enragé au pouce droit :
lo sur l'ongle qui a été traversé; 2o sur le dos de la première phalange;
3û dans la pulpe du pouce ; 4o sur le bord interne du pouce. Toutes ces
blessures sont profondes et ont bien saigné. H... est traité à l'Institut Pasteur.
Bien portant, en apparence, jusqu'au 30 juin, il a, cependant, souffert du
mal de tête le 27 juin. Le ler juillet, douleurs dans le pouce droit et le bras
droit, et aussi douleurs passagères dans la jambe droite. L'hydropliobie se
montre dans la journée du 1er juillet. H... est transporté, le 2 juillet, à
l'hôpital Saint-Antoine. Il meurt dans la nuit du 3 au 4 dans le service de
M. leD'Hayem.

Le 5 juillet, on enlève avec pureté le paquet nerveux du bras mordu, et
le paquet nerveux du bras sain au niveau des aisselles. Avec les nerfs du
bras mordu, broyés dans du bouillon stérilisé, on inocule par trépanation
un lapin. Tout ce qui reste de l'émulsion est injecté sous la peau d'un autre
lapin. Le liquide, obtenu par le broyage des nerfs du bras sain dans du
bouillon, sert à inoculer sous la dure-mère un lapin, et ce qui reste est
injecté sous la peau d'un autre lapin. Enfin un cinquième lapin est inoculé
sous la peau avec la matière du bulbe.

Le lapin inoculé par le bulbe sous la peau est pris de rage le 2 septembre
(28 jours d'incubation).

Le lapin trépané, inoculé par les nerfs du bras mordu, est pris de rage
le 24 août (50 jours d'incubation).

Le lapin inoculé sous la peau par les nerfs du bras mordu est pris de
rage le 5 août (30 jours d'incubation).

Le lapin trépané, inoculé avec les nerfs du bras sain, est pris de rage le
7 octobre (94 jours d'incubation).

Le lapin inoculé sous la peau avec les nerfs du bras sain est pris de
rage le 5 août (30 jours d'incubation).

Dans les expériences que nous venons de rapporter les nerfs
du côté mordu et du côté sain contenaient le virus rabique. On

22 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

remarquera que les lapins qui ont été pris de rage les premiers
ne sont pas ceux qui ont été trépanés, mais ceux qui ont été ino-
culés sous la peau. Cela tient à ce que la quantité de matière
inoculée sous la peau était beaucoup plus considérable que celle
déposée à la surface du cerveau. Les expériences précédentes
nous ont montré que les nerfs contiennent toujours peu de virus
rabique : il peut alors arriver que les quelques gouttes injectées
dans la cavité arachnoïdienne ne contiennent pas de virus
rabique ou en renferment trop peu pour donner la rage. Il con-
vient donc, quand on recherche le virus rabique dans les nerfs,
d'inoculer une quantité notable de matière nerveuse, et alors il
faut avoir recours, soit à l'injection intra- veineuse, soit à l'ino-
culation sous-cutanée.

La présence du virus rabique dans les nerfs du côté mordu
et dans ceux du côté sain ne prouve pas du tout que le virus soit
arrivé aux nerfs en partant de l'axe nerveux dans lequel il
aurait pullulé tout d'abord. Car il se pourrait aussi qu'après avoir
suivi les nerfs du bras mordu, il se soit cultivé dans la moelle à
leur point d'origine, et qu'il soit passé ensuite' dans les nerfs du
bras opposé i. Pour surprendre cette propagation du virus de la
plaieaux centres nerveux, par les nerfs qui partent du point d'ino-
culation, il faudrait expérimenter sur ceux-ci pendant la durée
même de l'incubation. L'expérience directe sur les animaux
pourra donner des résultats plus nets que ceux que nous venons
de rapporter.

L'inoculation pratiquée directement dans un tronc nerveux
donne la rage, souvent avec une période d'incubation assez
courte, surtout si on emploie le « virus de passage». Mais, dans
les conditions ordinaires des morsures, l'inoculation directe dans
un tronc nerveux se rencontre rarement. Nous avons inoculé, à
l'extrémité de la queue, des chiens avec du virus rabique, et nous
avons soigneusement observé chez eux l'apparition des pre-
miers signes de la rage. Si le virus suit la voie nerveuse, le début
de la rage devra se manifester par des symptômes qui relève-
ront de la moelle inférieure, et cette portion de l'axe spinal

i . Des fragments de nerfs du bras mordu ont e'te' examinés au point de vue des
lésions histologiques en même temps que les nerfs du bras sain. M. Vaillard, qui
a une compétence spéciale, a bien voulu se charger de cet examen. Il n'a trouvé
dans ces nerfs aucune lésion apréciable.

VIRTTS RABIOUE DANS LES NERFS. 23

devra contenir le virus rabique avant la moelle supérieure et le
bulbe :

Le 24 avril 1886, nous inoculons, avec M, Nocard, cinq chiens au bout
de la queue avec quatre ifouttes d'une émulsion de la moelle de 70« passage.
Ces chiens sont attentivement surveillés plusieurs fois par jour, pendant tout
le temps de l'expérience. Le 19 mai, au matin, un de ces chiens a des
allures bizarres, le regard est changé, et vers onze heures du matin il se
met i'i hurler, la voix est modifiée. Pas de faiblesse musculaire, il reconnaît
très bien les personnes qui l'appellent, et essaye de lécher la main qu'on lui
tend. 11 lèche avec fureur un chien que l'on met avec lui, puis se précipite
sur lui pour le mordre. Bref, ce 19 mai au matin (25 jours après l'inocu-
lation), ce chien présente les symptômes typiques d'une rage furieuse au
début sans le moindre prodrome de paralysie. A deux heures de l'après-
midi, on le sacrifie par strangulation, on l'ouvre, on prélève aussitôt des
segments du bulbe de la moelle lombaire et de la moelle dorsale, ainsi que
les glandes sous-maxillaires droite et gauche.

Un lapin est inoculé par trépanation avec la substance du bulbe.

A un autre lapin, on injecte dans les veines un centimètre cube de
l'émulsion du bulbe.

Un lapin est inoculé par trépanation avec la matière de la moelle dorsale.

A un autre lapin, on injecte dans les veines un centimètre cube de
l'émulsion de la moelle dorsale.

Un lapin est inoculé par trépanation avec la substance de la moelle
lombaire.

A un autre lapin on injecte dans les veines un centimètre cube de
l'émulsion de la moelle lombaire.

Enfin un lapin est inoculé par trépanation avec la substance des glandes
maxillaires droite et gauche broyées ensemble.

Un autre reçoit dans une veine un centimètre cube du liquide de broyage
des glandes.

On a eu soin de prélever dans chacune des régions bulbaire, dorsale et
lombaire, des segments assez volumineux intéressant toute l'épaisseur de la
moelle, pour être bien sûr de mettre en évidence le virus rabique alors même
qu'il serait localisé dans un point de l'axe spinal, dans un des cordons
latéraux ou postérieurs par exemple.

Le lapin inoculé par trépanation avec le bulbe est pris de rage le
9 juin (20 jours d'incubation).

Le lapin inoculé dans les veines avec le bulbe est pris de rage le 28 juillet
(70 jours d'incubation).

Le lapin inoculé par trépanation avec la moelle dorsale est pris de rage
le 10 juin (22 jours d'incubation).

Le lapin inoculé dans les veines avec la moelle dorsale n'a pas pris la
rage.

Le lapin inoculé par trépanation avec la moelle lombaire est pris de rage
le 7 juin (19 jours d'incubation).

24 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Le lapin inoculé dans les veines par moelle lombaire est pris de rage le
22 août (95 jours d'incubation).

Le lapin inoculé par trépanation avec les glandes salivaires est pris de
rage le 10 juin (21 jours d'incubation).

Les premières manifestations de la rage chez ce chien
pouvaient faire croire que les rég-ions du système nerveux
atteintes tout d'abord par le virus rabique étaient le bulbe et
les circonvolutions cérébrales; comme l'inoculation avait été
faite à la queue, il ne semblait pas que le virus eût suivi la voie
nerveuse qui l'aurait d'abord conduit à la partie inférieure de la
moelle. Or on n'a observé aucun affaiblissement dans le train pos-
térieur. Cependant les inoculations faites au lapin ont montré que le
virus rabique existait dans la moelle lombaire et dans la moelle
dorsale aussi bien que dans le bulbe, et qu'il était présent dans
la moelle épinière sans avoir donné lieu à aucun symptôme
spécial qui pût y faire soupçonner sa présence. Cette expérience,
qui au premier abord semble contraire à l'idée de la propagation
par les nerfs, ne prouve en réalité rien contre elle. Elle montre
que le virus a pu suivre silencieusement le cordon médullaire
comme il chemine dans un nerf. La culture ne s'est pas géné-
ralisée; elle s'est faite dans quelques faisceaux nerveux que le
virus a suiviscomme un conducteur jusqu'aux cellules du bulbe,
En sacrifiant l'animal quelques jours avant l'apparition de la
rage, peut-être aurait-on surpris le virus dans la moelle avant
que le bulbe soit atteint. Nous avons ainsi été conduit à recher-
cher le virus rabique dans la moelle avant l'apparition d'aucun
symptôme rabique. Avant d'exposer ces essais, il convient d'in-
sister, sur ce fait, que, chez le chien dont nous venons de parler
les glandes salivaires contenaient le virus dès le début de la rage,
bien que l'inoculation ait été pratiquée à la queue. Il y était sans
doute déjà présent avant le jour où l'animal a été sacrifié,
alors qu'il paraissait en parfaite santé. Tl faut donc se garder de
déclarer inoffensives les morsures faites par des animaux
enragés dans les jours qui ont immédiatement précédé l'explo-
sion de la maladie. Il serait fort intéressant de faire des
expériences systématiques pour savoir à quel moment le virus
rabique apparaît dans la salive. Mais continuons l'exposé des
résultats de noire expérience.

VIRUS RABIQUE DANS LES NERFS. 25

Un second chien de cette série parut un peu triste le 30 mai au soir. Le
31 mai. les jambes postérieures sont fléchissantes, l'animal a manifestement de
la paraplégie. Il ébauche fréquemment des mouvements de coït. Il présente
un type de rage médullaire au début. A 10 heures du matin, il est sacrifié.
On prélève des segments de moelle lombaire et de bulbe; les segments
comprennent toute l'épaisseur de la moelle sur une étendue de deux centi-
mètres. Avec chacun d'eux, broyé à part dans du bouillon stérilisé, on
inocule un lapin à la surface du cerveau, un lapin dans les veines : ce
dernier lapin reçoit une forte dose de substance nerveuse.

Le lapin inoculé par trépanation avec le bulbe est pris de rage le
84* jour. Celui injecté dans les veines est resté bien portant.

Le lapin inoculé par trépanation et celui injecté dans les veines avec la
moelle dorsale n'ont pas pris la rage.

Le lapin inoculé par trépanation avec la moelle lombaire est pris de
rage le 47» jour, et celui inoculé dans les veines avec la même moelle est
pris de rage le 28e jour.

Ces deux chiens inoculés en même temps à l'extrémité de la queue ont
présenté l'un une rage furieuse cérébrale et bulbaire, l'autre une rage
paralytique, une rage médullaire type. Le résultat des inoculations dans le
second cas montre que le virus a abordé la moelle par la partie inférieure
dans la région d'origine des nerfs qui viennent du lieu de l'inoculation. Au-
dessus du renflement lombaire le virus est peu abondant, la culture ne fait
que commencer. La moelle dorsale n'a pas donné la rage, et le bulbe ne l'a
donnée qu'au bout d'un temps très long.

Les trois autres chiens de cette série sont restés bien
portants.

Le virus rabique s'est déjà cultivé dans les centres nerveux
avant l'apparition de tout symptôme de rage, et on peut le mettre
en évidence chez les animaux, alors qu'en apparence ils sont en
parfaite santé '.

Le 18 juin 1886, on inocule, par trépanation, quatre lapins neufs avec
1/10^ de centimètre cube du liquide obtenu en broyant un peu du bulbe d'un
lapin enragé de 70o passage, dans environ dix fois son volume de bouillon
stérilisé. On sait, par de nombreux essais, que ce virqs de 70'-' passage
donne aux lapins auxquels ou l'inocule par trépanation, une rage dont
l'incubation est exactement de huit jours.

Cinq jours après l'inoculation, on sacrifie, par strangulation, un de ces
lapins qui paraît en pleine santé, et on puise, au milieu du bulbe, un peu de
matière nerveuse qui sert à inoculer deux lapins neufs, à la surface du
cerveau.

Le lendemain 26 juin, on sacrifie un autre lapin et soii bulbe est inoculé

1. Voir les expériences de MM. Vestea et Zagari sur le même sujet dans ces
Annales, p. 493, 1 Vol.

26 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

à deux lapins neufs par trépanation. Le 27 juin, on sacrifie un troisième
lapin dont le bulbe est aussi inoculé à deux lapins neufs.

Le 3 juillet, les lapins inoculés avec le bulbe du lapin sacrifié le 5e jour
après l'inoculation sont pris de rage (incubation : 8 jours).

Le 4 juillet, les lapins inoculés avec le bulbe du lapin sacrifié le 6« jour
sont pris de rage (incubation: 8 jours).

Le 5 juillet, les lapins inoculés avec le bulbe du lapin sacrifié le T'' jour
sont pris de rage (incubation : 8 jours).

La durée totale de l'incubation de la rage causée par le virus
de 70 passage est de huit jours, et dès le 5" jour après l'inocu-
lation, par trépanation, le virus rabique s'est cultivé dans le bulbe
sans qu'aucun symptôme ait manifesté sa présence.

Dans une autre expérience, on a recherché le virus rabique
pendant la période d'incubation non dans le bulbe, mais dans un
point plus éloigné du lieu de la trépanation, dans la moelle
inférieure.

Le 8 juillet 1887, on inocule, par trépanation, six lapins avec le bulbe
d'un lapin de 74^' passage. A partir du H juillet, on sacrifie chaque jour
un de ces lapins, et on inocule des fragments de sa moelle inférieureetde son
bulbe (pris dans le centre du cordon médullaire) à deux lapins.

Le bulbe et la moelle lombaire du lapin sacrifié le 3" jour n'ont pas
donné la rage.

Il en est de même pour le bulbe et la moelle lombaire du lapin sacrifié
le 4c jour.

Le bulbe du lapin sacrifié le ^^ jour a donné la rage en 8 jours. La
moelle lombaire n'a rien donné.

La moelle lombaire du lapin sacrifié le 6'' jour donne la rage en
10 jours.

Les deux lapins non sacrifiés sont pris régulièrement de rage le
8« jour.

Donc, deux jours avant qu'aucun symptôme rabique se soit
manifesté, la moelle inférieure contenait le virus rabique qui
s'était déjà cultivé dans le bulbe un jour auparavant. Il existe
donc une période de culture latente du virus rabique dans les
centres nerveux.

Dans son étude sur la pathogénie de la rage publiée dans le
tome P'de ces Annales, M. Gamaleïa avait déjà conclu àl'existence
de cette période de culture latente.

Nous avons entrepris, M. Nocard et moi, quelques expériences

VIRUS RABIOT JE DANS LES NERFS. 27

pour rechercher comment le virus rabique se propage dans les
nerfs et avec quelle rapidité.

Pour cela nous avons inoculé un àne clans le nerf plantaire externe au
niveau du canon. La grosseur de ce nerf chez Tâne permet de faire facile-
ment l'inoculation dans le tissu nerveux; de plus, sa longueur le désignait
particulièrement pour l'expérience que nous nous proposions. Le virus
employé était du virus de 144*3 passage; huit jours après l'animal était
sacrifié et le nerf enlevé jusqu'à l'épaule. Le point d'inoculation est marqué
par une zone rouge. Le nerf est divisé en huit fragments qui sont broyés à
part. Avec chaque tronçon, on inocule par trépanation un lapin et on injecte
sous la peau d'un autre ce qui reste de l'énnilsion. Seize animaux reçoivent
donc ainsi la substance de ce nerf; aucun d'eux n'est tombé malade. Ils
ont été conservés depuis le mois de mars 1887 jusqu'au mois d'octobre de
la même année.

Le 22 mai l'expérience est répétée sur le nerf plantaire externe d'un
cheval, avec cette différence que l'on inocule du virus de la rage des rues.
Le 7 juin le cheval est sacrifié, et le nerf, divisé en cinq tronçons à partir du
point d'inoculation, est inoculé à des lapins. Chaque segment sert à inoculer
un lapin par trépanation, un lapin sous la peau avec une grande quantité de
matière, et un lapin dans les veines avec deux centimètres cubes du liquide
d'inoculation. Aucun de ces animaux n'a pris la rage ; ils sont encore tous
en bonne santé, même ceux qui avaient reçu la portion du nerf où on avait
pratiqué l'inoculation. Dans ces deux essais, le virus employé était virulent,
puisqu'un chevreau et des lapins inoculés dans l'œil succombaient à la rage
en 14 jours.

Il faut se demander si ce cheval et cet âne auraient contracté
la rage, s'ils avaient été conservés? Il semble que non seule-
ment le virus ne s'était pas cultivé, mais même qu'il avait dis-
paru au point où on l'avait inséré.

Le 20 mars 1887, nous avons inoculé avec du virus fixe deux moutons
dans le nerf collatéral du canon de la patte postérieure; ces deux animaux
conservés pendant neuf mois n'ont pas pris la rage, tandis que le même
virus inoculé dans l'œil à un autre mouton le faisait périr de rage 43 jours
après.

On voit donc que l'inoculation dans les nerfs ne donne pas
toujours la rage, et qu'elle ne présente point la sécurité de
l'inoculation par trépanation ni même celle de l'inoculation
dans l'œil.

DE LA CULTtJRG SIR PONIIIE DE TERRE

F»ar E. FIOUX.

L'aspect caractéristique que prennent les colonies de certains
microbes lorsqu'ils croissent sur la pomme de terre rend très
précieux pour les bactériolog-istes ce mode de culture. De plus, la
pomme de terre permet les cultures à haute température que
Von ne peut pas faire avec la gélatine. La technique de la
culture sur pomme de terre, telle qu'elle a été fixée par M. Koch,
est assez compliquée, elle prescrit des lavages préalables de la
pomme de terre, la stérilisation de sa surface dans une solution
de sublimé de façon à la débarrasser des germes qu'elle apporte
avec elle, et qui résistent à une température supérieure à celle
employée pour sa cuisson. Enfin il est difficile de conserver
longtemps des cultures pures sur pomme de terre, surtout après
que l'on a fait des prises dans les colonies. L'emploi des boîtes
en verre munies d'une ouverture latérale fermée par un tampon
de coton, semblables à celles que nous avons décrites, M. Nocard
et moi, dans notre note sur la culture de la tuberculose, permet
d'éviter presque sûrement les germes qui tombent sur la pomme
de terre lorsqu'on fait les ensemencements ou les prises d'essai.

Depuis plus d'une année' nous faisons la culture sur pomme
de terre dans des tubes à essai dans les conditions suivantes :
on taille la pomme de terre en tranches, sans aucune précau-
tion de lavage antiseptique, de façon que les tranches puissent
entrer dans un tube à essai de deux centimètres et demi de
diamètre environ, figure 1 . Ce tube porte vers le quart inférieur un
étranglement qui empêche la tranche de pomme de terre de
tomber au fond ; dans la partie inférieure se rassemblera le
liquide qui sort de la pomme de terre après la cuisson. 11 n'est
pas nécessaire que le tube soit stérilisé h l'avance. Lorsque la

1. Ce procédé est enseigné depuis plusieurs mois dans le cours de technique
bactériologique que M. Chautemesse fait à l'École de médecine de Paris.

DE LA CULTURE SUR POMME DE TERRE.

29

pomme de terre est introduite dans le tube, enferme celui-ci par
un tampon de coton, et on le porte dans l'autoclave où on le
chauffe jusqu'à Ho" : on le maintient à cette température pen-
dant 13 minutes. Les tranches doivent être assez épaisses pour
ne pas s'affaisser après la cuisson. A la sortie de l'autoclave, la
surface de la pomme de terre est un peu humide, il suffit de

Fig. i.

B

Fig. 2.

placer les tubes verticalement pendant quelques heures à l'étuve
pour que l'eau s'égoutte et que sa surface se sèche, elle est alors
prête pour l'emploi. Les avantages de ce procédé sont faciles à
saisir, il permet de préparer en très peu de temps autant de
tranches de pomme de terre que l'on voudra, et qu'il est facile
de conserver en recouvrant le tube à essai d'un capuchon de
caoutchouc. Il évite les lavages aux antiseptiques et l'emploi de
vases de verre encombrants. Il donne aux cultures sur pomme
de terre la précision, la commodité et toute la sécurité des
cultures sur gélose. Mais son principal avantage est daus la

30 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

stérilisation de la pomme de terre à H5°, qui assure en un temps
très court sa stérilisation parfaite.

En modifiant légèrement le tube que nous venons de décrire,
il est facile d'obtenir des cultures d'anaérobies sur la pomme de
terre. Pour cela on soude au tube à essai au-dessous de l'étran-
g-lement un tube latéral, étiré en a (fig-. 2, A), et muni d'un tampon
de coton, comme le montre la figure. Après avoir introduit la
tranche de pomme de terre dans le tube, on stérilise le tout à
l'autoclave comme il a été dit plus haut, puis, quand la surface de
la pomme de terre est égouttée, ou sème l'organisme anaérobie
que l'on veut cultiver, et on ferme à la lampe lapartie supérieure
du tube comme on le voit (fig. 2, B). La tubulure latérale est
reliée à la pompe à mercure et on fait soigneusement le vide. La
tranche de pomme de terre est maintenue pendant quelques
instants sous le vide de la machine pour que l'air qu'elle contient
s'échappe, puis avec un trait de chalumeau porlé en«, on détache
le tube. 11 est facile de suivre à travers la paroi du verre le
progrès de la culture. Nous avons ainsi obtenu de belles cultures
du vibrion septique qui creusent un sillon dans la pomme de
terre.

Au lieu de faire le vide, on pourrait, après avoir étiré la
partie supérieure du tube, faire passer un courant de gaz privé
d'oxygène, et fermer ensuite à la lampe le tube en haut et en
bas.

NOTE m LA RÉACTION CHIMIQUE DES BACILLES DU CHOLÉRA,

Par m. ODO BUJVID, de Varsovie.

Dans un travail, résumé page 307 du tome I«'" de ces Annales,
M. Ali-Cohen dit que la réaction chimique des bacilles du
choléra qu'on produit au moyen des acides chlorhydrique et
sulfurique, n'est pas caractéristique pour ces bacilles, qu'elle
s'observe ég'alement avec ceux de Finkler, de Miller, de Deneke,
et qu'elle dépend de la présence de l'acide azoteux dans les
acides employés.

Il y a du vrai et du faux dans cette affirmation. On peut,

RÉACTION CHIMIQUE DES BACILLES DU CHOLÉRA. 31

d'abord, obtenir la réaction avec un acide qui ne peut pas
apporter d'acide azoteux, par exemple, l'acide oxalique, qu'on
peut préparer dans un grand état de pureté. Il suftit d'en mettre
quelques cristaux dans une culture de bacille du choléra faite
dans un bouillon légèrement alcalin, à 2 0/0 de peptone, et
additionné de 0,5 0/0 de sel marin, pour observer le même
résultat qu'avec les acides sulfurique ou chlorhydrique. Avec
les autres bacilles, l'acide oxalique ne donne rien. Avec l'acide
chlorhydrique pur et ne renfermant pas d'acide azoteux, on
n'obtient de même la réaction d'un rouge violet foncé qu'avec
les bacilles du choléra, et c'est pour cela que j'ai recommandé
l'emploi de cet acide de préférence à l'acide sulfurique.

Ce dernier renferme, en effet, ordinairement de l'acide
azoteux, et il donne alors la même réaction avec les bacilles de
Miller, de Deneke, d'Emmerich, les bactéries fécales, et le
bacillus pyogenes fœtidus qu'avec le bacille du choléra. Elle est
seulement beaucoup plus intense avec ce dernier.

Seul, le bacille de Finkler, après 4 jours de culture à 37°,
donne avec l'acide chlorhydrique une réaction qui se rapproche
de celle des bacilles du choléra. Mais avec ces derniers, elle est
beaucoup plus prompte et s'observe quelques heures seulement
après l'ensemencement.

Salkowski explique cette réaction, en disant qu'elle n'estautre
que celle de l'indol sur l'acide azoteux. Ce qui caractérise la cul-
ture du bacille de Koch, c'est la production simultanée et rapide
d'indol et d'un azotite qui, décomposé par un acide, donne le
rouge observé. Les autres bactéries donnent de l'indol, mais pas
d'acide azoteux. D'après ce que nous avons dit plus haut, le bacille
de Finkler diffère des autres bacilles étudiés en ce qu'il donne
aussi de l'indol et un nitrite, comme les bacilles de Koch, mais
en un temps beaucoup plus long.

La réaction que j'ai signalée, appliquée dans les conditions
que j'ai indiquées, reste donc caractéristique du bacille-virgule.

REVUES ET ANALYSES

SUR L'ABSORPTION PAR INHALATION DES GERMES MORBIDES-

REVUE CRITIQUE.

BucHNER. Sur les conditions du passage des microbes dans l'air et sur leur
inhalation. Aerlzt. Intelligent, n"* 12, 13 et 14, 1880. — Flugge. Les
microorganismes, 2"= éd. 1886, p. 605. — Arnold. Recherches sur l'inha-
lation et la métastase des poussières. Leipzig 1885. — Muskatbluth. Nou-
velles recherches sur l'infection par les poumons, Ce7itralbl. f. Bact.,
t. I, p. 321, 1887. — KocH, Mittheilungen, etc., 1884. — Cadeac et Mallet,
Comptes rendus, t. CV, p. 1190. — Buchner. Nouvelles recherches sur l'inha-
lation des spores charbonneuses, Munch. med. Wocliens., 1881,^. 1027.

Par quelles voies une affection microbienne passe-t-elle de l'individu
malade sur l'individu sain ? C'est là une question longtemps discutée, sur
laquelle nous commençons seulement à avoir quelques renseignements
précis. La loi générale de notre organisation, telle qu'elle résulte des mémo-
rables expériences de M. Pasteur, est que l'intérieur de notre corps est d'or-
dinaire fermé aux germes des microbes. Par où passent ceux qui réussissent
à y pénétrer? Profitent-ils pour cela d'une porte antérieurement ouverte,
d'une lésion, d'une effraction quelconque de la peau ou d'une muqueuse ?
Ou peuvent-ils franchir d'eux-mêmes ces obstacles, en vertu d'une loi de leur
physiologie ? Tel est le problème; on voit qu'il n'en est guère de plus impor-
tant en théorie et en pratique. N'est-il pas surprenant que l'on ignore
encore, par exemple, si le virus du chancre mou peut se développer lors-
qu'il est déposé sur une muqueuse saine, ou s'il a besoin d'une érosion
préexistante?

Je laisserai pourtant de côté, dans cette revue, tout ce qui se rapporte
aux modes de pénétration des microbes par la peau ou la muqueuse intesti-
nale. Là, il y aurait trop à dire, si on voulait creuser la question, et trop
peu, si on voulait résumer à son sujet l'état actuel de la science. Nous
sommes un peu mieux renseignés sur l'absorption pulmonaire, qui, pouvant
se produire sur une surface considérable, au travers d'un épithélium très
fin, a été tout naturellement mise en cause des premières pour expliquer
l'extension épidémique de certaines maladies. C'est ainsi que Pettenkofer,
même pour des maladies comme le typhus et le choléra, admettait que les
germes de ces affections étaient absorbés par le poumon, passaient de
là dans le sang, et ensuite dans l'intestin pour y subir leur évolution carac-
téristique.

REVUES ET ANALYSES. 33

Toutefois, à cette mise en suspicion de l'absorption pulmonaire, on pou-
vait répondre par quelques arguments. S'il y avait là une voie ouverte ou à
peu près ouverte, on ne comprendrait pas que l'intérieur du corps fût,
comme nous l'avons rappelé plus haut, fermé d'ordinaire aux germes patho-
gènes que nous sommes si souvent exposés à rencontrer autour de nous. On
ne comprendrait guère aussi l'absence des germes non pathogènes, s'il
est vrai, comme l'a montré M. Wyssokowitsch (V. ces Annales, t. I, p. 45),
que beaucoup de bactéries vulgaires, comme le B. subtilis, peuvent résister
et vivre longtemps dans le sang, quand elles y ont pénétré.

Cette conséquence avait sans doute frappé M. Wyssokowitsch quand il
s'est mis à étudier, dans le laboratoire de M. Fliigge, la perméabilité du
poumon, et aussi celle de la peau, pour les germes des microbes. Dans les
deux cas, il a constaté que tant que l'épiderme ou la muqueuse étaient
intacts, il n'y avait aucune pénétration des bactéries dans le sang. Pour le
poumon en particulier, il a soumis ses animaux d'expériences à des inha-
lations de poussières sèches de cultures du bacille de la fièvre typhoïde, de
staphylococcus ou d'autres microbes. Il leur a fait respirer les liquides de
culture eux-mêmes après les avoir pulvérisés, ou encore les leur a injectés
dans la trachée. Il n'a jamais pu constater l'arrivée des microbes dans le
sang, alors même « que l'injection avait déterminé dans le poumon les
manifestations maladives les plus accentuées ».

Ces résultats étaient d'accord avec ceux que Arnold avait obtenus aupa-
ravant en soumettant ses animaux à l'inhalation de poudres colorées, qu'on
pouvait retrouver anatomiquement dans les tissus. Ni le noir de fumée, ni
l'outremer, ni l'émeri n'ont pu être décelés dans le sang ni dans les organes
profonds. On les retrouvait tout au plus dans les ganglions bronchiques.
Arnold a montré aussi que le poumon de l'homme se comporte à cet égard
comme celui des animaux. Le noir de fumée n'y pénètre jamais que par des
voies anormales.

Voilà des conclusions bien nettes. Sans doute, faites pour des matières
mortes, elles ne s'étendent pas nécessairement aux microbes, et Arnold lui-
même fait des réserves à ce sujet, mais, unies à celles de Wyssokowitsch,
elles témoignent d'une sorte d'imperméabilité de la muqueuse pulmonaire.
Faut-il maintenant envisagercette imperméabilité comme absolue? On aurait
bien tort, car l'histoire de la tuberculose nous montre nettement qu'au
moins pour cette maladie il peut y avoir pénétration pulmonaire directe.

On sait que la croyance à la contagiosité de la tuberculose, si bien établie
au siècle dernier, n'a pas été déracinée partout par les efforts du corps
médical, et qu'elle existe encore à l'état vivant dans beaucoup de campagnes.
Mais c'est M. Villemin, qui, dans son heureuse et féconde tentative de réaction
contre les idées de son temps, lui a donné le premier une consécration
expérimentale, en prouvant que des animaux, soumis à une inhalation
de poussières d'organes tuberculeux, devenaient tuberculeux. M. Koch a
recommencé depuis ces expériences, en leur donnant le cachet de précision
et de netteté que permettait sa belle découverte du bacille de la tuberculose.
En soumettant des animaux à l'inhalation, sous la forme d'eau pulvérisée,
de cultures pures de ce bacille, il a vu devenir tuberculeux tous ceux qui

3

SA ANNALES DE L'INSTITUT PASTEIJR.

appartenaient à des espèces très accessibles à cette maladie, les cobayes, les
lapins, les souris des champs et les chats. Les espèces plus résistantes, chiens,
rats, et souris blanches, finissent aussi par succomber à l'infection par de
grandes quantités de cultures pures.

M. Koch opérait d'ordinaire en diluant dans l'eau une culture du bacille,
jusqu'à obtenir un liquide presque clair, et en soumettant les animaux,
pendant 3 jours de suite, à une demi-heure d'inhalation pendant laquelle
on pulvérisait, dans la caisse d'expérience, environ 50cc de ce liquide. En
recommençant ces essais pour juger de la réceptivité de l'appareil respira-
toire pour les bacilles de la tuberculose, MM. Cadéac et Mallet ont constaté,
comme M. Koch, que l'inhalation de liquidés tuberculeux pulvérisés, ou
l'injection intra-traehéale de matières tuberculeuses, rendaient tubercu-
leux tous les animaux d'expérience. Mais ils sont aussi arrivés à ce résultat
imprévu que l'inhalation des poussières tuberculeuses sèches était presque
toujours inoffensive.

Quelques détails sont nécessaires pour apprécier la valeur de ce résultat.
MM. Cadéac et Mallet dessèchent à l'éluve de 30 à 33° des crachats de
phtisiques, ou laissent se dessécher à l'air de tout petits morceaux de pou-
mons de vaches tuberculeuses, pulvérisent ensuite dans un mortier, et pas-
sent le tout au moulin à poivre; puis, à l'aide de petits soufflets pour poudres
insecticides, ou d'autres moyens mécaniques, ils disséminent, en les fraction-
nant, « un ou plusieurs litres de poussières tuberculeuses dans l'atmosphère
de caisses hermétiquement fermées oiàon place journellement, pendant plu-
sieurs heures, un certain nombre d'animaux ». Relevons seulement, pour le
moment, dans ce court exposé, deux points sur lesquels nous aurons à re-
venir tout à l'heure : le premier est que ces poussières paraissent, au
moins à première vue, n'avoir été ni très sèches ni très fines; en second
lieu les animaux en expérience étaient soumis à des inhalations multipliées
(une demi-heure par jour pendant plusieurs jours consécutifs) dans un air
qui doit avoir été très riche en poussière, car on a dans une expérience
injecté 2 litres de poussières, en 3 semaines, dans une caisse d'un mètre cube
de capacité, et qui renfermait 8 lapins et 8 cobayes. Nous verrons bientôt
que le mode opératoire n'est pas indifférent.

On peut dire toutefois, au sujet de toutes ces expériences, que, très inté-
ressantes au point de vue de la tuberculose, elles se rapportent uniquement
à un être qui trouve dans le poumon un milieu d'élection, s'y cultive facile-
ment et y amène, avec la maladie qu'il produit, des désordres qui favori-
sent sa pénétration dans les organes profonds et la généralisation de la
maladie. Elles ne nous renseignent pas sur le mode de pénétration des
microbes qui ne deviennent pathogènes que dans les organes profonds, et
pour lesquels le poumon n'est qu'un lieu de passage. Comment ces derniers
s'ouvrent-ils cette porte?

Pour résoudre cette question, Buchner s'est adressé à la bactéridie char-
bonneuse. Celle-ci a un défaut. SitAt qu'elle a pénétré dans le sang, elle
devient rapidement mortelle, et la mort de l'animal interrompt brusque-
ment la période de transition qui est le point capital de l'étude. Peut-être
Buchner et les savants qui l'ont suivi dans cette voie auraient-ils trouvé intérêt

REVUES ET ANALYSES. 35

et profit à se servir d'une bactéridio déjà atténuée, ou à opérer sur des ani-
maux vaccinés. Mais ils n'en sont pas moins arrivés à quelques résultats,
très intéressants, et que nous allons résumer.

Dans ses premières expériences, Buchner avait mélangé de spores char-
bonneuses dos poudres fines et bien sèches de charbon de bois ou de talc,
qu'il avait répandues en nuage dans une caisse renfermant les animaux
d'expérience. Il avait vu ces animaux, qui étaient des souris blanches,
Jiiourir du charbon quelques jours après l'inhalation. On pouvait dire que
l'infection avait tout aussi bien pu se produire par des érosions à la surface
de la peau ou par le canal intestinal que par voie pulmonaire; mais Buchner
avait répondu à cette objection en saupoudrant d'autres animaux avec des
poussières infectieuses, ou en les leur faisant avaler, et n'avait vu aucun
d'eux mourir charbonneux. Par voie d'exclusion, il mettait donc directement
en cause l'absorption pulmonaire.

Mais si ces expériences prouvaient que la pénétration était possible, elles
ne disaient pas comment elle se faisait. C'est le point qu'a étudié M. Muskat-
bluth. Il a employé pour cela deux méthodes différentes.

Dans la première, il injectait dans la trachée de lapins de petites quan-
tités (0,2 à 0,3 ce.) d'un liquide très riche en bacilles du charbon. Puis,
comme il y avait alors à redouter l'infection locale de la blessure, il sacrifiait
les animaux environ 16 heures après l'opération, avant que cette infection
locale n'ait pu venir troubler les résultats. Il retrouvait alors les bacilles
injectés sur les parois des alvéoles, enveloppés dans des cellules que leur
forme et leur position doivent faire considérer comme desdébris de l'épi thélium
alvéolaire, les cellules à poussière {Staubzelle7i) ; ces cellules sont bondées de
bacilles et contiennent fréquemment aussi de longs fils enroulés. On trouvait
aussi des bacilles dans les ganglions bronchiques, mais seulement dans les
lymphatiques du ganglion, et pas du tout dans les vaisseaux sanguins.
Cependant, les bacilles avaient déjà pénétré dans la circulation, car sur un
lapin tué 17 heures après l'injection on a trouvé, parla méthode des cultures,
des bacilles charbonneux dans le foie et dans la rate.

Dans un second procédé opératoire, M. Muskatbluth trachéotomisait
d'abord ses lapins, et ne faisait l'injection, et encore au travers de la canule,
que lorsque la plaie était entièrement fermée et cicatrisée. Assuré ainsi
contre toute infection locale, il pouvait attendre la mort de l'animal, qui
survenait au bout de 40 ou 48 heures, pour faire l'examen microscopique
des poumons. Le tableau était alors exactement l'inverse de tout à l'heure.
On ne trouvait plus de bacilles que dans les vaisseaux sanguins du poumon,
les cellules à poussière étaient presque toutes vides de microbes, et dans
les ganglions bronchiques toutes les bactéridies avaient disparu des vais-
seaux lymphatiques.

Ces expériences permettent de conclure : i° que le poumon est perméable
pour les bacilles charbonneux; 2° que les voies de pénétration sont les lym-
phatiques, les ganglions et le tronc lymphatique, d'où les bacilles passent
dans les vaisseaux sanguins.

Le seul point un peu obscur dans ces études, est le rôle des cellules à
poussière; sont-elles des agents d'expulsion ou des agents de pénétratiori des

36 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

microbes. Eu les voyant remplies de bacilles, on est tenté d'en faire des
phagocytes. Mais on n'aperçoit aucune trace de dégénérescence chez les ba-
cilles qui les habitent, et qui continuent à se colorer très bien. Elles ne
laissent pourtant pas que d'avoir un rôle protecteur. Beaucoup sont élimi-
nées avec les sécrétions bronchiques, et éliminent ainsi les bacilles qui les
contiennent. Or, l'intensité de la sécrétion dépend de l'intensité de l'inflam-
mation pulmonaire; elle augmente avec l'énergie de la desquamation et
de l'infiltration cellulaire, de sorte que s'il survient une pneumonie, une
partie des bacilles étant éliminée par voie mécanique, une autre se trouvant
noyée dans des liquides d'infiltration qui remplissent les bronches ou les
alvéoles, et privée ainsi, sinon de nourriture, au moins d'air, l'évolution du
charbon peut se trouver arrêtée par la maladie intercurrente provoquée par
l'inflammation pulmonaire. M. Muskatbluth en cite un exemple, et nous allons
en. trouver d'autres dans les dernières expériences de Buchner.

Mais nous n'avons pas besoin d'attendre pour conclure que l'inhalation
de poussières infectieuses ou non infectieuses met peut-être en jeu un
mécanisme de résistance dont il importe de tenir compte dans le dispositif
des expériences et dans l'interprétation des résultats. Sans qu'on sache
encore grand'chose sur ce mécanisme, on a le droit de penser que, pour
réussir une inoculation tuberculeuse, il faudra d'abord arriver jusqu'aux
alvéoles, ce qui exigera l'emploi d'une poudre très fine et très sèche, puis
tacher de réduire au minimum l'inflammation pulmonaire, puisqu'on ne
peut l'éviter totalement, et pour cela opérer avec une faible quantité de
poussière aussi infectieuse que possible. Toutes les expériences dans lesquelles
ces conditions ne sont pas réunies risquent d'être troublées par la cause
d'erreur ou d'insuccès que nous relevions tout à l'heure, et c'est ainsi peut-
être qu'on s'explique comment MM. Cadéac et Mallet n'ont pas trouvé infec-
tieuses par voie puhuonaire des poussières tuberculeuses sèches qui, insérées
sous la peau, donnaient la tuberculose aux animaux inoculés.

Dans ses dernières expériences sur le cliarbon, Buchner a retrouvé le
succès des premières, en réunissant les conditions que nous venons de
signaler. Comme substance pulvérulente, il emploie les spores de Lyco-
perdon giganteum, dont le diamètre n'atteint pas la moitié du diamètre d'un
globule du sang humain, dont la légèreté est très grande, et qui, bien
sphériques, échappent au reproche qu'on peut faire aux poudres minérales de
présenter quelquefois des arêtes à bords tranchants qui peuvent léser la
muqueuse si délicate du poumon. Il imbibe largement cette poudre d'une
culture de bactéridies où. il n'y a que des spores, la dessèche bien sur le
chlorure de calcium, et la transforme en nuage dans une chambre close
où respirent les animaux. La quantité de poudre mise en suspension dans
l'air est très faible, elle n'est que de 0,2o gr. dans une chambre de 3 litres
environ de capacité, renfermant cinq souris blanches, du double dans une
chambre de 14 litres, renfermant deux cobayes. L'inhalation ne dure que
de 10 à 15 minutes, et les animaux n'y sont exposés qu'une fois.

On voit que nous sommes loin des conditions des expériences de
MM, Cadéac et Mallet. Il est vrai qu'il ne s'agit plus de tuberculose, mais les
résultats sont très nets. Les souris succombent au charbon en moyenne

REVUES ET ANALYSES. 37

après 60 heures, et les cobayes du 3° au 5° jour. Sur 43 souris soumises à
rcxpérienee, il y en a eu 36 mortes par le charbon, 5 par pneumonie, et 2
restées vivantes. Sur 18 cobayes, 13 sont morts du charbon, 5 ont survécu.

Les cas de pneumonie nous rappellent notre obser^ation de tout à l'heure.
Ici aussi, le microbe de la pneumonie, présent par hasard ou à la suite d'une
afTection antérieure, et favorisé dans son développement par l'inflammation
pulmonaire résultant de l'inhalation, avait si bien arrêté l'évolution du
bacille qu'il a été impossible d'en retrouver dans les poumons des animaux
pneumoniques, ni au microscope, ni par voie d'ensemencement.

Nous avons aussi le droit de rappeler ici l'insuccès des expériences de
Wyssokowitscli que nous avons résumées plus haut, et dans lesquelles l'in-
jection répétée de petites quantités de culture de bacilles dans la trachée
s'était montrée inofîensive, « même lorsque le poumon montrait les mani-
festations maladives les plus accentuées ». Gomme le font remarquer
MM. Muskatbluth et Buchner ce n'est pas même, c'est parce que qu'il aurait
fallu dire sans doute.

C'est parce que le poumon était devenu le siège d'une congestion ou
d'une afTection à marche rapide que l'évolution du microbe inhalé avait été
arrêtée. Quoi qu'il en soit, on voit tout le danger de l'inhalation des pous-
sières charbonneuses. M. Buchner a cherché à pousser plus loin sa démons-
tration en apportant la preuve directe de la pénétration de. la bactéridie
par les poumons. Les nombreuses tentatives qu'il a faites à ce sujet peuvent
se résumer dans l'expérience suivante, qui rappelle celles de M. Muskatbluth.

Une souris, tuée par le chloroforme 20 heures après l'inhalation, et dans
un état apparent de santé parfaite, a été soumise à un examen microsco-
pique soigneux. Dans ses poumons, on a trouvé, en deux points, des amas
de bacilles charbonneux dans les diverses couches de la paroi alvéolaire.
Comme l'inhalation avait porté uniquement sur des spores, il fallait bien
qu'il y eût eu végétation. Cette végétation ne résultait pas à son tour d'un
retour dans le poumon de bacilles ayant pullulé à l'intérieur du corps, car
d'abord, la rate, étudiée par la méthode des cultures, ne contenait aucun
bacille, puis on ne trouvait aucun bacille dans le réseau capillaire des pou-
mons, ce qui eût été nécessairement le cas si les microbes avaient été
transportés par le sang dans les poumons. Enfin, comme dernière preuve,
au milieu d'un des amas de bacilles révélés par le microscope, on a trouvé,
adhérent à la paroi alvéolaire, le fragment inhalé de poudre de charbon qui
avait apporté le germe. M. Buchner estime donc avoir le droit de tirer la
conclusion suivante qui résume ses expériences et celles de ses prédécesseurs:

« Les spores charbonneuses ou les bacilles qui en proviennent ont le pou-
voir de traverser la surface du poumon en dehors de toute lésion mécanique,
de passer dans les voies lymphatiques, et d'aller ainsi végéter dans les
organes profonds. Des phénomènes d'inflammation dans le tissu du poumon
ne sont nullement nécessaires pour tout cela, et constituent au contraire un
obstacle à la pénétration des bacilles. » Dx.

38 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Max Voelsch. — Contribulion à la question de la résistance des bacilles
tuberculeux. Beitr. z.patli. Anat., t. II, 4887.

Le Mémoire de M. Voelsch est consacré à l'étude de quelques points très
controversés de l'histoire biologique du bacille tuberculeux, c'est-à-dire de
sa résistance à la putréfaction, à la chaleur, à la dessiccation.

Sur le premier point, les savants sont divisés en deux camps. Dans l'un,
nous trouvons Baumgarten', Fischer- et Falk ^, qui, les deux premiers pour
la tuberculose transmise par les voies digestives, le dernier, pour la tuber-
culose d'inoculation, prouvent qu'après quelques jours de putréfaction, les
matières tuberculeuses perdent tout pouvoir infectieux. De Toma^ est tout
récemment arrivé à des conclusions analogues pour la putréfaction des cra-
chats tuberculeux. Mais en face de ces affirmations se dressent les résultats
contradictoires obtenus dans le laboratoire de M. Koch par Schill et
Fischer^, qui ont pu inoculer avec succès un crachat tuberculeux en putré-
faction depuis trois jours. M. Koch^ a confirmé ces résultats, et Wesener ne
les a pas conti;edits.

L'incertitude n'est pas moins grande sur d'autres points, pourtant très
importants, l'action de la chaleur, par exemple. L'ébuUition peut-elle
rendre inofTensif un lait tuberculeux ? Schill et Fischer répondent qu'après
deux minutes d'ébuUition un crachat tuberculeux n'a pas perdu sa viru-
lence, mais qu'il l'a perdue après cinq minutes. Wesener ajoute que l'ébul-
lition détruit plus sûrement les bacilles sans spores que les spores. Mais
Falk n'est d'accord ni avec eux ni avec de Toma sur l'influence d'une
longue conservation à haute température.

Enfin, au sujet de l'influence de la dessiccation, nous avons encore à
choisir entre des affirmations qui ne sont plus, il est vrai, aussi contradic-
toires, mais qui prêtent à l'embarras par leur manque de précision. Ce sont
ces incertitudes que M. Voelsch a essayé défaire disparaître.

Il s'est demandé si elles ne tenaient pas en partie à ce que les savants
cités plus haut avaient opéré tantôt sur des bacilles tuberculeux sans spores,
tantôt sur des bacilles sporifères peut-être plus résistants. Il a donc porté
son attention de ce côté, et s'est servi de semences tuberculeuses provenant
de trois sources. Une culture artificielle lui donnait des bacilles à peu près
privés de spores ; un crachat tuberculeux des bacilles très riches en spores,
et enfin un tissu tuberculeux jeune lui fournissait un mélange de bacilles à
spores et de bacilles sans spores.

Avec chacune de ces semences, il a fait l'étude de l'influence de la putré-
faction, de la dessiccation à basse et à haute température, d'un simple et
d'un double chauffage à 400*^. C'était beaucoup entreprendre. Ajoutons tout

1. Centralbl. f. Klhi. M éd., 188 i, u» 2.

2. Arch. f. exp. Path. u. Pharmak., t. XX.

3. Arch. f. path. Anut. und Physiol., t. XCIII.
4.. Annali unie, di medic. chirurg., 1886.

o. Mittheil. d. k. Gesund., t. II, p. îiiS.
6. Id., p. 78.

REVUES ET ANALYSES. 39

de suite que vingt-neuf lapins lui ont suffi pour étudier toutes ces questions.
Ajoutons encore que, faute de temps, ces lapins ont été tués une quinzaine
de jours après l'inoculation, avant toute évolution possible d'une tubercu-
lose généralisée, et qu'on a jugé du degré d'affaiblissement subi par la
semence par le degré de développement du tubercule local produit au point
d'inoculation. Ajoutons enfin que le point capital qu'on pouvait essayer de
viser dans ce dispositif expérimental, à savoir la comparaison entre les
effets des divers traitements sur les bacilles sans spores de la culture
artificielle et les bacilles à spores du crachat tuberculeux, s'est entièrement
dérobé à l'expérience, par suite de l'intervention fortuite, dans l'une des
séries d'essai, d'une septicémie du lapin, dont les germes existaient sans
doute dans le crachat tuberculeux auquel on a emprunté la semence, et qui a
pris le pas sur la tuberculose. Il suffit de cette courte esquisse de la phy-
sionomie du Mémoire de M. Voelsch pour comprendre qu'il n'ait pu avan-
cer beaucoup les questions dont il a entrepris l'étude.

Ce qu'il trouve est un peu vague et difficile à résumer. Le point le plus
net est relatif à l'influence d'un simple et d'un double chauffage à 100*^. La
semence en sort affaiblie, mais non morte. Mais le résultat n'a rien de bien
nouveau. Il avait été trouvé par quelques-uns des savants cités plus haut,
s'il avait été contesté par d'autres. Ce qui nous intéresserait, ce n'est pas
de savoir dans quel camp M. Voelscli se place, ni s'il a jugé plus juste de se
tenir entre les deux, ce serait d'apprendre de lui pourquoi, sur une question,
en apparence si simple, la science est divisée en deux camps, pourquoi des
savants ont trouvé inoffensive l'inoculation d'un bacille tuberculeux chauffé,
pourquoi d'autres savants, également habiles et autorisés, l'ont trouvée
virulente. Y avait-il une influence, restée inaperçue des uns ou des autres,
de la prédisposition individuelle ou de la race des animaux inoculés, ou de
la nature de la semence, ou de la réaction acide ou alcaline du milieu qui
les contenait, ou du mode de chauffage, ou de la température atteinte, ou
du mode d'échauffement ou de refroidissement, qui prolonge plus ou moins
l'action des températures voisines de la température mortelle? Un seul de
ces points, convenablement élucidé dans le mémoire de M. Voelsch, lui
aurait donné une autre valeur que celle que lui donne son vaste pro-
gramme, resté à l'état d'ébauche.

Nous pourrions en dire autant au sujet de la putréfaction. M. Voelsch
trouve qu'elle affaiblit aussi la virulence, mais ne la fait pas disparaître.
Il se place ainsi à côté de son maître, M. Baumgarten, de Falk, de
Fischer, etc. Mais ces questions ne sont pas des questions de majorité.
Pourquoi la putréfaction s'est-elle montrée active à Berlin, inactive à
Kœnigsberg? et d'abord, de quelle putréfaction s'agit-il? M. Voelsch, comme
ses prédécesseurs, parle de la putréfaction comme d'un phénomène simple.
Mais il y a certainement plusieurs centaines de putréfactions diverses, ame-
nées par dos microbes qui sécrètent des diastases difi'érentes, donnent lieu
aux produits vitaux les plus variés, communiquent au liquide putride une
réaction tantôt acide, tantôt alcaline, et ne peuvent se ressembler dans leur
action sur les bacilles tuberculeux. Le moindre renseignement sur ce sujet eût
singulièrement diminué notre embarras à choisir entre des affirmations rivales,

40 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Enfin, au sujet de l'influence de la dessiccation, M. Vnelsch constate que la
virulence décroît lentement par une longue conservation à la température
ordinaire, et plus rapidement à l'étuve. Sur ce point, pas plus que sur les
autres, « il ne s'est révélé de différence bien sensible entre les bacilles spo-
rifères et non sporifères, ce qui revient à dire que la ténacité des bacilles
tuberculeux non sporifères est assez grande ». Ce serait le cas de faire
ici quelques réserves sur ce qu'on appelle spores dans le bacille tuberculeux,
mais comme cette question, dans le Mémoire de M. Voelsch, est plutôt
visée que traitée, nous attendrons une autre occasion pour l'étudier avec le
soin qu'elle mérite. Dx.

Th. Kitt. — Recherches sur le rouget des porcs et son inoculation. Centralbl.
Bacteriol. u. Parasit., t. II, 1887, p. 693.

Le Mémoire de M. Kitt, résumé d'autres Mémoires plus étendus, publiés
dans d'autres recueils ', touche à une foule de points. Nous ne parlerons
que de ceux qui sont d'un intérêt général et sur lesquels M. Kitt apporte des
notions nouvelles.

Ce sont surtout les questions d'atténuation qu'il a étudiées, et sur les-
quelles il se trouve en contradiction avec ce qu'on croyait savoir déjà.
M. Pasteur avait montré que, par des passages successifs au travers du
pigeon, la virulence du bacille du rouget s'exalte vis-à-vis du porc, qu'elle
s'atténue, au contraire, par des passages successifs au travers du lapin.
M. Kitt n'a pas pu observer ces variations de virulence, et se demande
comment on a pu les observer ailleurs. La durée de l'incubation et celle de
la maladie étant très courtes avec les petits animaux, chez lui, souris,
pigeons et lapins périssent également vite, qu'on les inocule avec le
premier vaccin Pasteur contre le rouget, qui doit ne renfermer que des
bacilles atténués, avec le second vaccin ou avec du rouget de porc. Les souris
meurent entre i et 4 jours, les pigeons entre 3 et 6 jours. Il y a pourtant là
une marge assez notable pour mettre en évidence des effets d'atténuation.

Il n'a pas été plus heureux dans l'étude de l'atténuation par des ino-
culations en série. Avec les souris, il n'a pu resserrer entre des limites
plus précises que celles de 1 à 3 jours les durées d'évolution du microbe

i. Nous profitons de l'analyse du travail de M. Kitt sur le rouget pour donner
la bibliographie complète du sujet, depuis la découverte du bacille :

Pasteur et ThuilUer, sur le rouget ou mal rouge des porcs, C.-Rendus, 1883,
t. XCXV; Bull, de l'Ac. de méd., 1883, n" iS.

Loeffler. Recherches expérimentales sur le rouget. Arb. a. d. k. R. G. A..
1885. t. I.

Schulz. Arch. f. wiss. und prakl. Thierheilk. Berlin, d88o, t. XI; et 1886, t, XII;
et Arbeiten a. d. k. R. G. A., 1880-86.

Lydtin et Schottellus. Le rouget des porcs. Weisbaden, 1883.

Cornevin. Première étude sur le rouget du porc. Paris, 1885.

Baillet. Recherches sur le rouget. Recueil de méd. vét., 1884.

T. Kitt. Recherches sur le rouget des porcs et sou inoculation. Jnlircsbericht d,
bayer. Thierzarzneisch, 1886. — Oesterreich. Revue f. Thierheilk., 1886.

REVUES ET ANALYSES. 41

inoculé. Avec les pigeons, les résultats de l'inoculation on série ont été
plus réguliers : la imu-t survenait d'ordinaire au bout de 3-i jours. L'ino-
culation se faisait à chaque fois à la lancette, trempée dans le sang du
pigeon qui venait de mourir, et avait lieu sous la peau du grand pectoral.
La quantité de virus inoculé était ainsi très faible, et la mort eût sûrement
été plus rapide si on en avait inoculé davantage. Mais s'il y avait eu
une diminution de virulent-e, elle aurait dû apparaître, pense M. Kitt,
dans la série de 30 pigeons inoculés, et on n'en trouvait trace, ni dans
la durée d'évolution de la maladie, ni dans les résultats de l'inoculation
de ces virus de passage du pigeon à la souris ou au lapin, qui mouraient
aussi vite que lorsqu'on les inoculait avec du rouget de porc.

Avec les lapins, la contradiction est encore plus marquée et plus
curieuse. M. Pasteur a montré, comme on sait, que dans le passage au
travers du lapin, la virulence du bacille du rouget décroît vis-à-vis du porc,
mais croit vis-à-vis de cet animal qui, dans des inoculations en séries, périt
de plus en plus vite. M. Cornevin a trouvé le même résultat. M. Kitt con-
firme la décroissance de la virulence vis-à-vis du porc par le passage au
travers du lapin, et a même réussi à conférer l'immunité à un porc par
l'inoculation d'un bacille ayant traversé une seule fois l'organisme d'un lapin;
mais il trouve, chose plus imprévue, que le transport du bacille de lapin
à lapin ne peut se faire au delà de deux fois de suite, et que d'ordinaire,
après une première génération « sa virulence est tellement afïaiblie qu'une
nouvelle inoculation sur le lapin est impossible ».

L'impossibilité rencontrée par M. Kitt tient peut-être à son mode opéra-
toire. Le sang des lapins contient très peu de microbes, et l'insuccès des
■transplantations successives à la pointe de la lancette tient peut-être à
cette circonstance. M. Kitt eût sans doute obtenu d'autres résultats s'il
avait inoculé ses animaux en série avec un fragment de rate broyée.

Chercher, comme il le fait tant sur ce sujet que sur d'autres, l'explica-
tion des différences entre ses résultats et ceux des savants qui l'ont précédé,
dans l'impureté possible des cultures en milieux liquides en usage au labo-
ratoire de M, Pasteur, c'est porter contre ce mode de culture une accusation
sans preuves. Comment admettre que, depuis 1882, on conserve au labora-
toire de M. Pasteur des cultures de rouget, donnant l'immunité aux porcs
auxquels on les inocule, si ces cultures étaient impures à l'origine. N'est-il
pas évident que, dans cette longue série de cultures en milieux liquides,
cette impureté aurait fini par disparaître ou dominer, et que ces cultures
auraient en ce moment des propriétés toutes différentes de celles qu'elles
possédaient autrefois? La condition de perpétuité dans les cultures et de la
préparation indéfinie des vaccins est précisément leur pureté absolue.

Ce n'est pas d'ailleurs la première fois, et ce ne sera sans doute pas la
dernière qu'on trouvera exprimée, dans des Mémoires étrangers, la pensée
que la culture en milieux liquides n'assure pas la pureté autant que la cul-
ture sur milieux solides. Ainsi M. Pasteur n'aurait jamais connu, à l'état
pur, les ferments alcooliques et le ferment lactique ; Raulin, ÏAspergillus
niger; Van Tieghem, le ferment de l'urée, pour ne parler que des premiers

qui ont suivi M. Pasteur dans les voies nouvelles qu'il avait ouvertes. L*C'^

y*' \\ ■- ■ 'ti'"' i i

42 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

culture sur milieux solides a été un grand progrès, mais dédaigner tout ce
qui ne vient pas d'elle est ou une prévention, contre laquelle l'expérience
proteste, ou une prétention, amusante comme toutes les prétentions, et qu'il
faut laisser passer, en la saluant d'un sourire. Pour le microbe du rouget,
en particulier, la figure la plus exacte qui en ait été tracée est une pho-
tographie du D'' Roux, que tout le monde a pu voir, en 1884, au labora-
toire de M. Pasteur, qui a été présentée, en 188S, à la Société de Biologie,
et publiée dans le premier volume des Annales.

Le Mémoire do M. Kitt contient, en outre, le résultat de ses études sur
le mode de propagation du rouget. Il trouve queles excréments des animaux
souffrant de cette maladie (souris, pigeons, porcs) sont extrêmement infec-
tieux, qu'une putréfaction de quelques jours leur laisse leur virulence, mais
qu'ils la perdent assez vite par la dessiccation.

On n'est pas encore bien fixé sur les espèces domestiques qui peuvent
contracter le rouget. M, Pasteur dit que les moutons sont dans ce cas, et
Lydtin dit la môme chose, avec réserve, il est vrai, pour les bœufs. MM. Gor-
nevin et Herbet contredisent ces deux assertions. M. Cornevin a constaté
aussi l'état réfractaire du mulet, de l'âne, du chien, du chat et du cobaye,
de la poule, de l'oie et du canard. M. Kitt confirme quelques-unes de ces
conclusions, mais il y ajoute que le mulot [Waldmaus] est aussi indemne,
ce qui est un argument à ajouter à ceux qu'ont avancés MM. LoefTler et
Schutz, pour établir l'identité entre le microbe du rouget et celui de la sep-
ticémie de la souris, qui, pathogène pour la souris blanche et la souris
grise, ne l'est pas pour la souris des champs. Cette question d'identité ne
nous paraît pas aussi démontrée que le pense M. Kitt. Mais ce n'est pas le

moment d'aborder cette question.

Dx.

J. PoELS. Les microcoques du coryza contagiosa dos chevaux. Fortschritte d.

Medicin, t. VI, 1888, p. 4.

M. Poels désigne sous le nom de glande [Druse), une affection conta-
gieuse du cheval, identique sans doute à ce que nous nommons gourmes
en France, et qui se caractérise par une hypersécrétion delà muqueuse respi-
ratoire, souvent suivie d'un gonflement et d'une formation secondaire d'ab-
cès dans les ganglions lymphatiques de la région.

L'inflammation est d'ordinaire bornée aux narines et à l'arrière-gorge,
mais elle peut aussi gagner le larynx, les voies respiratoires, les sinus
maxillaires et frontaux.

C'est une maladie très redoutée, parce que, dès qu'elle a pénétré dans
une écurie, elle s'étend sur presque tous les chevaux, tuant les jeunes, et
arrêtant les animaux de travail.

Quelle que soit la forme affectée par cette maladie, M. Poels a toujours
trouvé, dans le mucus nasal ou le pus des glandes des chevaux qu'il a
étudiés, un micrococcus, tantôt en articles isolés, tantôt en paires, tantôt
en chaînettes de 3, 4 ou 5 articles. Les chaînes ne sont jamais très
longues.

REVUES ET ANALYSES. 43

Ce cocciis est iniid iiii un pmi ;ill()ngp, ol dans vo cas il iimiitrc, quand
il est en voie de division, deux pôles plus fortement colorés, en forme de
demi-sphère, en contact par leur surface plane. C'est là le début de la
multiplication. Les deux mntiés du coccus s'arrondissent ensuite, s'allon-
gent à nouveau et se multiplient ainsi.

La plupart de ces coccus sont entourés d'une enveloppe non colorable,
mais ils ne l'emportent pas avec eux dans tous les milieux de culture.

Sur la i^élatine ou la gélose, on n'observe aucun développement super-
ficiel. Sur la gélatine, il ne se forme sur la piqûre que des colonies isolées.
Dans le bouillon, il n'y a qu'un trouble léger au-dessus d'un abondant dépôt
de fond. C'est sur le sérum du sang de cheval que le coccus se développe
le mieux, à la condition que ce sérum ne soit pas trop fortement coagulé.
Quand il est encore à moitié gélatineux, il s'y forme des colonies mu-
queuses, demi-transparentes, qui ressemblent à de petites gouttelettes d'eau
superficielles. Quand on les touche avec un fil de platine, on s'aperçoit qu'elles
sont un peu visqueuses, mais cela ne les empêche pas de couler le long de
la surface si on incline le tube de sérum qui les nourrit. Le coccus y pousse
aussi dans la profondeur.

Dans ce milieu, il montre, lorsqu'on le traite par une solution de violet
de gentiane, une belle capsule colorée, et quelques-unes de ces enveloppes
ressemblent beaucoup à celles du microbe de Friedlaender.

On les trouve non seulement autour des articles isolés, mais entourant
aussi les chaînettes.

<( On trouve quelquefois des capsules dans lesquelles on ne voit aucun
coccus, et qui apparaissent alors parfaitement homogènes, ou présentent à
la place que devraient occuper les coccus des parties brillantes qui ont tout
à fait la forme de coccus. » Il ne s'agit sans doute, dans cette description,
que d'un effet de mise au point. Si l'enveloppe et ce coccus sont inégalement
réfringents, on doit, suivant les cas, voir le coccus clair sur un fond gris
ou le coccus noir sur un fond clair.

Sur la gélatine, la gélose et le bouillon, les capsules disparaissent pour
reparaître si on reporte la culture sur le sérum de sang.

Ce coccus est pathogène pour la souris, le lapin et le cobaye. Son inocu-
lation sous-cutanée à la souris provoque un gonflement et une infiltration
séreuse du tissu conjonctif. Parfois, ce gonflement et cette infiltration
gagnent de proche en proche, et sont suivis d'une infection générale qui
amène la mort à bref délai. On retrouve le coccus non seulement dans l'in-
filtration séreuse du tissu conjonctif, mais encore dans le foie et la rate de
la souris morte. Mais ces cas aigus sont rares. D'ordinaire il se forme au
point d'injection des foyers purulents, avec métastases dans le foie et ail-
leurs, qui gardent longtemps le microbe à l'état vivant.

Ce qui est plus important que ces inoculations sur la souris, c'est que
M. Poels a pu infecter à l'aide de son coccus deux chevaux bien portants.

Sur l'un on a injecté, dans le larynx une culture de S*-' génération du
coccus dans du bouillon. L'animal a eu l'inflammation de l'arrière-bouche
et le gonflement des ganglions supérieurs.

Sur un poulain âgé de 30 mois, on a injecté dans les cavités nasales,

44 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

après y avoir fait quelques piqûres, une culture de 60 génération sur du
sérum de sang de cheval, mélangée à iO grammes de bouillon. En même
temps, on inclinait la tète de l'animal, de façon à amener en contact le
liquide d'inoculation avec la muqueuse du nez et de l'arri ère-bouche. Ce
poulain présenta le coryza caractéristique avec gonflement et formation
d'abcès dans les ganglions du cou. Dans le mucus nasal et le pus des gan-
glions on retrouvait le coccus. Il semble donc qu'il n'y ait pas de doute à

avoir sur la question de cause.

Dx.

J. .Iadassohn. Sur la connaissance du rouge de choléia. Breslauer Aertzl.

ZeiUchr, n^s 10 et 17, 1887.

L'article de M. Bujwid, qu'on trouvera dans les Mémoires originaux de
ce numéro des Annales, résume bien l'état actuel de la science au sujet du
choléra-roth ou rouge de choléra. Ce rouge est une combinaison d'indol et
d'acide azoteux que l'on obtient plus hâtive etplusabondante avec le bacille du
choléra qu'avec d'autres bacilles très analogues à celui du choléra pour leurs
formes ou leurs propriétés, parce que le premier développe à la fois, dans les
cultures, l'indol et l'acide azoteux nécessaires à la formation du choléra-
roih. Il y a des bacilles qui ne produisent que de l'indol, et qui ne donnent,
dès lors, la réaction rouge qu'avec un acide souillé de produits nitreux.Le
bacille de Finkler-Prior donne à la fois de l'indol et un nitrite, et pourrait
être confondu avec le bacille du choléra s'il n'était toujours, sous ce point
de vue, beaucoupen retard sur lui. Le bacille du choléra est donc jusqu'ici le
seul qui puisse, dès les premièies heures après l'ensemencement, donner la
réaction du choléra-roth, qui se trouve être ainsi caractéristique pour lui,
à la condition de faire intervenir la question de temps.

En dehors de sa valeur pratique, cette réaction a une importance géné-
rale; elle peut servir à caractériser la présence de l'indol, c'est-à-dire d'une
substance qui, comme le scatol, le glycocoUe, la leucine, la tyrosine, est
un des produits de dislocation de la matière azotée dont se nourrissent
certains microbes. Nous ne savons pas encore grand'chose sur la forma-
tion de ces substances, dont le rôle nous apparaît pourtant de plus en plus
comme capital dans l'histoire des relations d'un microbe avec l'animal
envahi. On avait été conduit peu à peu à attribuer à ces produits d'éli-
mination du microbe quelques-uns des symptômes de la maladie ou de la
mort à laquelle il préside. Le remarquable travail de M. Roux, inséré
dans le dernier numéro de ces Annales, non?, les montre en action dans les
questions de vaccination ou d'immunité. 11 n'est donc pas inutile d'insister
un peu sur cette réaction du choléra-roth, et nous allons profiter pour cela
d'un Mémoire fait par M. Jadassohn à l'instigation de M. Neisser, et dans
lequel nous trouvons, en outre de la confirmation de faits antérieurement
connus, quelques nouveaux résultats appartenant à l'auteur.

Il débute par un court historique de la question. C'est Poehl qui a découvert
en 1886 ' la coloration rouge des cultures de bacilles du choléra sous l'in-

i. Bar. d. d. chem. Gesell.,t. XIX, p. 1163.

REVUES ET ANALYSES. 43

fluencedes acides. Cette réaction, oubliée, fut retrouvée l'année suivante par
0. Bujwid ', et étudiée : par Brieger- d'abord, qui l'envisagea surtout au
point de vue chimique, puis par Dunham ^ qui a surtout recherché les con-
ditions dans lesquelles elle se produit. Ce sont ces conditions que nous
allons résumer en prenant pour base le travail de Dunham et celui de
M. Jadassohn qui le complète à divers égards.

Ces conditions peuvent se résumer sous les chefs suivants :

a. Nature de l'acide. — L'acide nitrique, l'acide chlnrhydrique recom-
mandé à juste titre par Bujwid, et l'acide sulfurique employé par Dunham et
Brieger ne sont pas les seuls à pouvoir donner la réaction On l'obtient
aussi en traitant la culture de bacilles du choléra par les acides bronihy-
drique, phosphorique, tartrique, lactique, oxalique, mais non par les
acides acétique et formique. Ce sont les trois premiers acides qui valent
pourtant le mieux, et parmi eux l'acide chlorhydrique qui ne jaunit pas la
préparation comme le fait l'acide azotique, ou ne la noircit pas comme le
fait quelquefois l'acide sulfurique.

b. Nature du milieu. — Dunham avait trouvé que la réaction était beau-
coup plus prompte et plus belle quand le milieu nutritif contenait de la pep-
tone. D'après Jadassohn, on l'obtient encore, mais dans un temps
un peu plus long, et avec une intensité un peu plus faible, avec des milieux
albumineux ne contenant pas de peptone, tels que ceux qu'on obtient en
stérilisant à la chaleur une solution très étendue d'albumine d'oeuf, ou bien
encore en se servant de sérum de sang. Avec le lait ou le bouillon de veau,
les bacilles se développent très bien, mais la réaction ne réussit plus. Il en
est de même avec des cultures dans l'eau ou dans l'eau gélatinisée, qui se
font assez bien, comme on sait, mais ne se colorent pas par l'acide chlor-
hydrique. Avec une culture de gélatine-peptone ou de gélose-peptone, au
contraire, huit à dix heures après l'ensemencement, on peut, en versant de
l'acide chlorhydrique à la surface, voir une teinte rouge qui, d'abord confi-
née dans les couches supérieures occupées par les microbes, descend peu à
peu jusqu'au bas du tube, dans la portion qu'ils n'ont pas encore
envahie. La matière qui donne cette couleur est donc une substance diffu-
sible.

L'ensemble de ces résultats est assez d'accord avec ce qu'on aurait pu
prévoir d'avance, en sachant que l'indol est nécessaire à la réaction. Cet
indol est un dérivé encore assez compliqué de la matière albuminoïde. On
comprend donc que les bacilles du choléra en fabriquent aux dépens de l'al-
bumine ou des peptones qui en sont très voisines, mais n'en fournissent
pas avec les matériaux du bouillon ou les matières organiques qu'ils
trouvent dans l'eau. On comprend aussi qu'ils mettent plus de temps à
arriver à cet indol avec l'albumine d'oeuf qu'avec les peptones beaucoup
plus assimilables.

1. Une réaction chimique des bacilles du choléra. Zeitschr. f. Hijg., 1887, p. 82.

2. Sur le tétanos traumatique, avec des remarques sur le rouge de clioléra
Deuts. méd. Wochenschr, -1878, n"^ io et 22.

3. Sur la réaction chimique des bactéries du choléra. Zeitschr. f. Hyg., 1887,
t. II, p. 337.

46 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

c. Présence de l'oxygène. — Le bacille du choléra n'a pas uii besoin absolu
d'oxygène. Quand on lui ménage l'air, il pousse seulement un peu plus
lentement. Il se multiplie par exemple assez bien dans un milieu nutritif
recouvert d'une couche d'huile, mais même après plusieurs semaines, il ne
donne aucune réaction de choléra-roth. Ceci est plus inexplicable. La for-
mation d'un nitrite, nécessaire pour cette réaction, ne peut s'accomplir
que dans un milieu réducteur, et, à priori, il semblerait au contraire que
c'est quand le bacille est privé d'air qu'il doit donner la réaction la plus
intense.

d. Pureté des cultures. — Quel effet peut produire le mélange dans une
culture du bacille du choléra avec une espèce différente? Pour étudier cette
question complexe et délicate, M. Jadassohn emploie l'ingénieux procédé
suivant. Il stérilise une culture de bacille du choléra donnant la couleur
rouge avec les acides, y ensemence un autre microbe, et constate après deux
ou trois jours que ces cultures ne se colorent plus avec les acides chlorhy-
drique et sulfurique, mais prennent leur ancienne teinte avec l'acide nitrique.
Il a pu faire cette constatation avec plusieurs microbes qui, eux-mêmes, en
cultures isolées, ne se colorent pas par l'acide nitrique.

On obtient le même résultat en faisant des cultures simultanées de
bacille du choléra et d'autres microbes. L'auteur semble vouloir conclure
que la coloration par l'acide nitrique ne peut pas être assimilée à celles que
donnent les acides sulfurique et chlorhydrique. Mais on peut aussi s'expli-
quer ces résultats en admettant que le microbe ensemencé avec le bacille ou
après le bacille détruit les nitrites qui rendent possible la réaction par les
acides chlorhydrique et sulfurique, et que réintroduit l'acide nitrique ajouté.

A cette question de la pureté des cultures vient se rattacher celle de
savoir si le choléra-roth est, ou non, caractéristique des bacilles du cho-
léra. Sur ce point, M. Jadassohn est d'accord avec M. Bujwid, au travail
duquel nous renvoyons. Quant à savoir s'il y a beaucoup d'espèces capables
de communiquer à leurs milieux de culture la propriété de rougir sous
l'influence de l'acide nitrique ou d'un mélange d'acide nitrique etd'un autre
acide fixe, c'est une question qui est encore trop peu élucidée pour que nous
croyions devoir l'aborder ici.

Dx.

A. Gelli. Quelques-unes des propriétés du virus rabique, Bull. d. IL. Ace.
med. di Roma, fasc. 8, 1886-1887.

La municipalité de Palerme a récemment créé une station de vaccina-
tion antirabique dans laquelle A. Celli a étudié le degré de résistance du
virus rabique vis à-vis de certains agents. Ses expériences confirment
quelques-uns des résultats déjà connus depuis les classiques travaux de
M. Pasteur (insensibilité au froid, sensibilité à la lumière) et en ajoutent
d'autres dont voici le résumé :

La virulence d'une émulsion de moelle rabique disparaît après une heure
passée à 50° et après 24 heures à 4So. Elle résiste à un froid de — 16° à —
20" pendant environ 30 heures, à 60 heures de séjour dans de l'air comprimé

REVUES ET ANALYSES. 47

à 7 ou 8 atmosphères, tandis qu'elle est détruite après une exposition de
14 heures à la lumière, la température maximum de l'air au voisinage ayant
été de 37", et après une exposition de 24 heures, mais dans laquelle l'éprou-
vette contenant l'émulsion de moelle était contenue dans un vase plein
d'eau qui a atteint la température maxima de 35».

Pour essayer l'efficacité de certains agents chimiques, on a renoncé à
l'inoculation sous la dure-mère, trop rapidement mortelle, et on a choisi la
voieintrapéritonoale, après avoir constaté que 10 lapins, inoculés par celte
voie, sont tous morts de rage paralytique après une période d'incubation
qui, pour neuf d'entre eux, a été de 10 à 20 jours, et de 35 pour le dernier.
On a ainsi constaté l'inactivité complète de l'émulsion de moelle dans une
solution de sublimé à 1 p. iOOO, injectée aussitôt faite, de l'émulsion dans
une solution dliypermanganate de potasse à 2,5 p. 4000 et d'alcool à 50 et
à 90 degrés, injectées après 24 heures. L'émulsion dans de l'alcool à 25»,
inoculée après 24 heures et après 3 jours, donne la rage après des périodes
d'incubation qui sont respectivement de Set de 10 jours; inoculée après
5 jours, elle s'est montrée inactive. L'alcool à 45 degrés n'a pas altéré la
virulence après un contact de 7 jours.

Enfin une émulsion rendue nettement acide aux papiers réactifs à l'aide
de 4 ou 2 gouttes d'acide acétique, ou nettement alcaline avec un petit
cristal de carbonate de soude, s'est montrée inoffensive, bien qu'inoculée en
volume de 5" dans la cavité abdominale de deux lapins. Dx.

INSTITUT PASTEUR

RENSEIGNEMENTS STATISTIQUES SUR LES PERSONNES TRAITÉES
DU l*' AU 31 DÉCEMBRE 1887.

Personnes traitées mortes de maladies non déterminées.

Valla, Claude, 35 ans, de Salettes, commune de Sainte-Foy,
Haute-Loire, mordu le 8 novembre par son chien, reconnu
enragé par M. Gire, vétérinaire. Trois morsures, l'une sur le
bord interne de la main, près du petit doigt, les deux autres à
la paume de la main. Toutes ont saigné et ont été cautérisées
superficiellement au fer rouge. Traité du d3 au 27 novembre.

Le 17 décembre, Valla, après avoir beaucoup travaillé
dehors par un temps très froid, a été pris du mal de g'org'e avec
difficulté d'avaler, il souffrait d'une dyspnée très forte. Ces
symptômes disparurent complètement après l'application de
sinapismes. Le lendemain Valla paraissait remis, lorsqu'il tomba
en syncope et mourut subitement, le 20 décembre.

Valla n'a été vu par aucun médecin, les renseignements
précédents ont été fournis par le maire du Ghambon.

48

ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

INSTITUT PASTEUR

STATISTIQUE ' DU TRAITEMENT PRÉVENTIF DE LA RAGE. — DÉCEMBRE 1887

Morsures à la tète

et à la figure

simples . .

multiples.

CautéJ'isations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

,, • ( simples...

Morsures aux mamsj ^^J-^^^^^

Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

Morsures aux mem-j simples

bres et au tronc \ multiples.. . .
Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

Habits déchirés

Morsures à nu

Morsures multiples en divers points

du corps

Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

Habits déchirés

Morsures à nu

Tn+oiiv^ ) Français et Algériens,
lotaux. ^ Etrangers

■il

3)

11/

1%)

9»

3*

35/.

4

I
A

39

3/

2i

8«)

Total général

64^

I
B

1.12

SH

%»

93

3|
1)

4

lO

«

a

7)

i. Pour l'interprétation des termes et la signification des diverses colonnes du
tableau, se reporter aux statistiques précédentes, p. 9o, 143 et 207, t. I.

Les animaux mordeurs ont été :
Chiens, 126 fois; chats, 6 fois.

Le Gérant : G. Masson.

Sceaux. — Imprimerie Charaire et fils.

grae ANNEE. FÉVRIER 1888. N" 2

ANNALES

DE

L'INSTITUT PASTEUR

mmmî contre le charbon symptomatiqie conférée

PAR DES SUBSTANCES SOLUBLES,

Dans le numéro de décembre 1887 de ces Annales^ nous
avons montré, M. Chamberlandetmoi, qu'il est possible de donner
aux cobayes l'immunité contre la septicémie aiguë en leur injec-
tant des quantités suffisantes de sérosité septique ou de culture
de vibrion septique, complètement dépourvues d'org^anismes
vivants.

Après avoir fait cette preuve pour la septicémie, il était naturel
de la tenter pour le charbon symptomatique. Ces deux maladies
sont en effet très voisines ; les microbes qui les causent sont
tous deux anaérobies, et les lésions qu'ils produisent dans les
muscles et le tissu cellulaire des animaux sont très analogues.

MM. Arloing-, Cornevin et Thomas, auxquels nous devons
presque toutes nos connaissances sur le charbon symptomatique,
ont montré que cette affection ne récidive pas d'ordinaire, et que
l'on peut conférer l'immunité contre elle par des inoculations
préventives devirus atténués '.De plus, le charbon symptomatique
est inoculable aux cobayes, ce qui fait qu'il est facile d'expéri-
menter sur cette maladie.

Les savants expérimentateurs de Lyon ont découvert que le

1. Voir le Charbon symptomcUique du bœuf, par ;\I.\I. Arloing, Coroevia et
Thomas, 2" édition, 1887.

4

50 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

charbon symptomatiqnc est causé par un microbe spécial bien
diflerent de celui de la fièvre charbonneuse, et auquel ils ont
donné le nom de Bacterium Chauvœi. Cet organisme micros-
copique se rencontre surtout dans les tumeurs musculaires qui
caractérisent cette espèce de charbon, et dans l'œdème qui les
entoure. Il s'y trouve sous forme de bâtonnets mobiles, souvent
munis d'une spore à une des extrémités. Les bacilles sporulés
ont parfois la forme d'un battant de cloche : ces apparences
rappellent celles du vibrion septique, mais le Bacterium Ghauvœi
se dislingue nettement par son action sur les animaux. Il est
inofîensif pour le lapin, les poules, le cheval, le porc, qui sont
tués par le vibrion de la septicémie.

Le microbe du charbon symptomatique se cultive à l'abri de
l'air dans le bouillon de poule et de veau légèrement alcalins '.
Ses germes périssent lorsqu'on les maintient pendant 10 minutes
à une température humide de 100°.

Le bœuf et le mouton sont les animaux qui prennent le plus
facilement le charbon bactérien ; le cobaye présente plus de
résistance à la maladie; il ne meurt pas toujours à la suite des
inoculations faites avec la pulpe de tumeur charbonneuse.
MM. Arloing-, Gornevin et Thomas ont fait connaître un mode
d'inoculation qui amène toujours la mort des cobayes. Pour
obtenir ce résultat, il suffit de délayer le virus dans une solution
d'acide lactique au 1/5°. Avec ce moyen d'épreuve, on n'a pas à
craindre de soumettre les animaux à des inoculations inefficaces
et de voir résister les cobayes de contrôle.

Lorsqu'on injecte dans la cuisse d'un cobaye le virus du
charbon bactérien délayé dans la solution lactique, le membre
ne larde pas à gonfler, à devenir chaud et douloureux. Il ne peut
servir d'appui à l'animal, qui devient triste, hérissé, et meurt
souvent en moins de 24 heures. A l'autopsie le muscle dans le-
quel on a fait l'injection est rouge, gonflé, friable, les fais-
ceaux musculaires sont dissociés par des gaz et des épanchements
sanguins ; un œdème rougeâtre s'étend dans le tissu cellulaire
sous-cutané. Le Bacterium Ghauvœi se trouve en abondance dans
le muscle, l'œdème, la sérosité du péritoine ^.

1. Voir, pour ce qui coucerne les caractères et la physiologie du Bacterium
Cbauvœi, le remarquable travail de MM. Arloiûg, Coruevin et Tiiomas.

2. Voir Arloing, Coruevin et Thomas, loc. cit.

CHARBON SYMPÏOMATIQUE. 51

La marche suivie dans celte étude est la même que celle qui
a été exposée dans le Mémoire que nous avons publié en commun
avec M. Chambcriand sur le vibrion septique. Pour donner aux
cobayes l'immunité pour le charbon symptomalique, nous leur
injectons, dans le péritoine, de grandes quantités de culture du
Bacterium Chauvœi, après avoir tué dans le liquide tout élément
vivant par le chauffage à 115°, ou encore après avoir séparé tous
les microbes par la filtration sur porcelaine.

Toute expérience dans laquelle on n'a pas la certitude absolue
qu'aucun élément vivant n'a pu intervenir pour produire l'immu-
nité ne saurait avoir de valeur pour la démonstration qui nous
occupe. G'estpourquoi nouspratiquonsla stérilisation des liquides
de culture à lio° dans l'autoclave. Ce procédé est assurément
brutal et peut faire perdre aux substances vaccinales leur activité ;
aussi, avons-nous choisi, pour établir la possibilité de la vaccina-
tion par produits solubles, des maladies comme la septicémie
pour laquelle la matière vaccinale est résistante à la chaleur.

Les cultures du charbon symptomatique dans le bouillon de
veau sont chauffées, aprèslo jours de séjour à l'étuve, dans l'au-
toclave à 115°. Le liquide ainsi stérilisé est injecté dans la cavité
péritonéale des cobayes à la dose de 40 cent, cubes, comme nous
l'avons décrit dans le n° 12 de ces Annales {V année). Ces injec-
tions sont répétées trois fois, à deux jours d'intervalle. Les ani-
maux ainsi préparés résistent, le plus souvent, à l'inoculation,
faite dans les muscles de la cuisse, avec 1/5 de centimètre cube
de virus du charbon symptomatique délayé dans l'acide lactique
au 1/5° ; tandis que les animaux témoins inoculés en même
temps succombent quelquefois en moins de 24 heures.

Nous citerons ici, à titre de renseignements, une de nos
expériences.

Expérience. — A4 cobayes on injecte en 3 fois dans la cavité périlonéale
120 cent, cubes d'une culture du charbon symptomatique stérilisée àMoo ; à
4 autres cobayes on injecte, dans le péritoine, on 3 fois, 120 cent, cubes de bouil-
lon pur. Trois jours après l'injection, tous ces cobayes sont inoculés dans la
cuisse avec 1/5' décent, cube du liquide obtenu en délayant de la poudre viru-
lente * de charbon symptomatique dans la solution d'acide laeti([ue au 1/3*^

24 heures après, 3 des cobayes qui ont reçu le bouillon [tur sont morts,

1. Voir le livre de MM. Arloiag, CornevinetTtiomas, pour la préparation de la
poudre de charbon symptomatique.

52 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

le quatrième succombe 30 heures après l'inoculation. Les cobayes préparés
ont eu un petit gonflement de la cuisse qui s'est rapidement dissipé, ils sont
restés en bonne santé.

Dans celle expérience, les cobayes de contrôle avaient reçu
dans le périloine un volume de bouillon pur égal au volume de
cullure stérilisée employée pourla vaccination des autres cobayes.
Il nous a paru nécessaire de nous assurer que le bouillon n'avait
pas par lui-même d'action préservatrice. Parmi les substances
que l'eau extrait des muscles, il pourrait s'en trouver d'ana-
logues à celles produites par l'action des microbes, et qui seraient,
elles aussi, capables de donner aux animaux un certain degré
d'immunité. Dans l'étal d'ignorance oii nous sommes sur la
nature de ces substances vaccinales, il n'est pas déraisonnable
de faire une semblable supposition.

Il est évident que la quantité de culture injectée, nécessaire
pour produire l'immunité, varie avec les animaux et surtout
avec les cultures, qui peuvent être plus ou moins actives. Aussi,
dans ces expériences, est-il préférable de préparer en une fois de
grandes quantités de cultures, pour ne pas avoir à déterminer à
chaque nouvel essai l'activité des liquides que l'on emploie.

Comme nous l'avons vu pour les cultures de vibrion septique,
la température de 115° paraît aussi modifier les sublances actives
des cultures de charbon symplomatique. Les liquides filtrés sur
porcelaine paraissent mieux agir que ceux qui ont été chauffés.
Il est à remarquer que les cobayes auxquels on injecte les cul-
tures stérilisées de charbon bactérien sont moins affectés que
ceux qui reçoivent les cultures de vibrion septique privées de
microbes, comme si les premières ne contenaient pas des pro-
duits aussi toxiques pour eux que les secondes.

Cette différence est encore plus marquée quand on emploie
la sérosité du charbon symplomatique comparée à la sérosité
septique '. La sérosité septique filtrée, injectée à la dose de
20-' dans le péritoine d'un cobaye, le fait mourir rapidement ;

i. Pour préparer cette sérosité, uous enlevons sur les cobayes qui soûl morts
du charbon symptomatique les muscles et le tissu cellulaire œdéinatié où le
microbe s'est développé. Ces parties sont divisées dans une petite machine
à hacher, macérées dans la moitié de leur poids d'eau et pressées. Le liquide qui
s'écoule est filtré sur porcelaine. On obtient ainsi une sérosité rougeâtre, alcaline,
alburaineuse, qui peut se conserver sans altération.

CHARBON SYMPTOMATinUE. 53

une semblable quanlilé de sérosité de charbon symptomatique,
privée de microbes, rend le cobaye malade, mais ne le tue pas.
II est facile de rendre les cobayes réfractaires au charbon
bactérien en leur injectant chaque jour, sous la peau, un centi-
mètre cube de sérosité filtrée. Au bout de dix à douze injections,
l'immunité est acquise, On voit que la sérosité de l'œdème du
charbon de Chaberl se comporte absolument comm) la sérosité
seplique. (V. ces Aîmales, n" 12, t. I.)

ExpÉHiENCK. — 4 cobayes reçoivent chaque jour, sous la peau, 1 cent, cube
de sérosité de charbon symptomatique pendant 12 jours; 3 jours après, on les
inocule dans le muscle de la cuisse avec de la poudre virulente délayée dans
la solution lactique au l/S»^, en même temps que 3 cobayes neufs. 26 heures
après, les 3 cobayes témoins ont succombé. Les cobayes qui ont reçu la
sérosité sont bien portants, leurs cuisses sont un peu tuméfiées. Le gonfle-
ment disparaît les jours suivants.

Ce nouvel exemple de vaccinalionpar l'injection desubstances
solubles présente d'autant plus d'intérêt qu'il se rapporte à une
maladie qui se rencontre chez les animaux domestiques. Userait
d'un très grand intérêt de répéter ces essais de vaccination sur le
mouton et le bœuf. Le moment de les entreprendre sera venu
lorsqu'on saura préparer les matières solubles vaccinales à
l'état de pureté.

Les ressemblances qui existent entre le vibrion septique et le
Bacterium Ghauvœi nous ont conduit à chercher si les cobayes
qui ont l'immunité pour la septicémie l'ont aussi pour le charbon
symptomatique, et inversement si ceux qui ne prennent plus
le charbon bactérien résistent à la septicémie. Les cobayes
vaccinés pour la septicémie succombent au charbon symptoma-
tique. Mais ceux qui ont été rendus réfractaires à cette seconde
maladie résistent souvent à l'inoculation du vibrion septique.

Cette vaccination d'une maladie par une autre nous paraît
un point intéressant sur lequel nous reviendrons dans un pro-
chain mémoire.

DE L nnilMTÉ CONTRE LE YIRIS DE LA FIÈVRE TYPHOÏDE

CONFÉRÉE PAR DES SUBSTANCES SOLUBLES

Par mm. A. CHANTEMESSE et FERNAND ^YIDAL.

L'immunité contre une maladie virulente, conférée par les
substances chimiques qui tirent leur origine des microbes, n'est
pas une idée tout à fait neuve, mais à cette idée il manquait jus-
qu'ici le fait nécessaire et suffisant : une démonstration expéri-
mentale.

Pour la première fois, dans le Mémoire de M. Pasteur sur le
choléra des poules, celte idée se trouve nettement exprimée.
M. Toussaint crut à tort qu'il tenait la démonstration de la vac-
cination par des produits solubles, car le sang- charbonneux
chaulTé à 55", s'il donnait quelquefois l'immunité, contenait des
bactéridies vivantes. M. Chauveau attribua l'immunité des fœtus
de brebis charbonneuses à des substances chimiques, et non à
la pénétration des bactéridies dans leur sang. Les recherches de
Straus et Chamberland, confirmées par celles de Koubassofï et
d'autres savants, qui découvrirent la bactéridie vivante dans le
sang- des fœlus de bêtes charbonneuses, enlevèrent aux expé-
riences de M. Chauveau les qualités d'une preuve irréfutable.

En 1886, Salmon rendit réfractairos au choléra Hoy des
pigeons qu'il avait inoculés avec des cultures stérilisées du
microbe de cette maladie. L'expérience était peu concluante,
parce que le pigeon est doué d'une faible réceptivité pour ce
virus, et que le procédé de vaccination appliqué aux porcs et aux
autres mammifères échouait complètement.

Récemment M. Gharrin fit voir que les lapins qui avaient
reçu des cultures stérilisées du bacille de la pyocyanine de
Gessard, sans contracter l'immunité, étaient plus résistants que
les lapins non inoculés.

IMMUNITÉ CONTRE LA FIÈVRE TYPHOÏDE. 55

Il manquait une expérience inattaquable qui montrât l'im-
munité donnée à une espèce animale très sensible à un virus,
au moyen des substances soliibles sécrétées par ce virus.

Cette expérience et cette démonstration se trouvent dans le
Mémoire que MM. Roux et Chamberland ont publié au mois do
décembre 1887, dans les Amiales de Unstitut Pasteur, sur l'im-
munité contre la septicémie.

Ce travail iuaugure une ère nouvelle en bactériologie.

Dans la médecine humaine, quel rôle jouent les substances
solubles produites par les microbes pathogènes?

Des travaux dans ce sens ont été publiés en France pour
le choléra par M. Bouchard, en Allemagne pour la fièvre typhoïde
par Brieger, Sirotinin, Beumer et Peipcr.

Aucun auteur, à notre connaissance, n'a étudié expérimentale-
ment, dans un but de vaccination, le rôle des substances solubles
produites par le bacille typhique et séparées du virus vivant.

Depuis plusieurs mois nous avons entrepris cette étude et
nous en avions annoncé les résultats, en mai dernier, aux méde-
cins qui suivent les cours pratiques du laboratoire de M. Cornil.

Nous avions été amenés à cette recherche par un fait que
nous avons mentionné dans notre Mémoire publié dans les
Archives de physiologie au mois d'avril 1887.

La culture du microbe d'Eberth, ensemencé par strie sur un
tube de gélatine incliné, reste assez étroitement limitée aux points
d'inoculation. Si au bout de quelques jours on enlève, sur un
espace de 2 centimètres, les colonies qui se sont développées, et
que l'on sème sur cette place mise à nu du bacille typhique très
vivace, ce dernier ne s'y développe pas. La première culture a
modifié au-dessous d'elle le milieu nutritif d'une façon assez puis-
sante pour qu'il soit incapable de nourrir de nouveaux microbes
de la même espèce. La gélatine semble en ce point « vaccinée ».

Nous avons tenté de répéter l'observation en faisant l'expé-
rience sur des animaux.

1° Les souris sont sensibles au virus tijphique

Expérience. Trente souris blanches sont inoculées dans le
péritoine avec 4 gouttes d'un bouillon peptonisé ensemencé depuis
3 jours avec du bacille typhique virulent pris sur une rate

56 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

humaine, et laissé à l'étuve à 37°. Au bout de 36 lieures, toutes
les souris étaient mortes. L'intestin était rempli de diarrhée
liquide, les plaques de Peyer un peu tuméfiées, la rate grosse.
La rate et la moelle des os contenaient des bacilles typhiques.

Cette expérience est semblable comme résultats à celles qui
ont été publiées par Frankel et Simmonds, Seitz, Sirotinin,
Beumer et Peiper, etc., et nous-mêmes. Tous les auteurs s'accor-
dent sur ce point; le seul débat est le suivant : à quoi ont suc-
combé ces souris? ont-elles péri par infection typhique ou par
intoxication due à la ptomaïne produite par les bacilles dans le
bouillon? Les uns admettent l'infection, les autres la rejettent.
Ils disent qu'il est impossible d'assimiler cette maladie à celle de
la fièvre typhoïde de l'homme. Sa marche est trop rapide.

Nous croyons avec Frankel et Simmonds, Seitz, K. Kilcher,
qu'il s'agit bien d'une infection. Tout d'abord, en pathologie
comparée, on ne peut demander une similitude complète entre
les symptômes présentés par l'homme et par les animaux atteints
de la même maladie. Qui songe à exiger que le cobaye ait une
pustule maligne quand il contracte le charbon de l'homme ?

En second lieu, les produits solubles fournis par les bacilles
qui vivent dans un bouillon sont, il est vrai, capables de faire^
périr les souris avec des symptômes, une période de maladie,
et des lésions sensiblement pareilles aux précédentes, mais il
faut pour cela inoculer une dose de bouillon 5 ou 6 fois plus forte.

A dose ég'ale, minime, une culture stérilisée ne tue pas et une
culture vivante tue. La cause immédiate de la mort, nous le
concédons volontiers, ce sont les substances chimiques élaborées
par le bacille, mais la dose de poison contenue dans deux gouttes
de bouillon n'est suffisante qu'à condition que le microbe
continue à vivre quelque temps dans le corps de l'animal pour
y fabriquer l'appoint de la substance toxique nécessaire pour
donner la mort. Or si le bacille vit dans le corps de la souris et
y élabore des poisons, cela suffit pour dire qu'il y a infection.

2° Les souris qui ont été préalablement inoculées avec du bouillon
privé de bacilles, mais dans lequel ont vécu des colonies typhiques,
résistent au virus virulent.

Expérience L — Le 20 mai 1887, 12 souris blanches re-
çoivent dans le péritoine un demi-centimètre cube d'un bouillon

T.MMUMTE CONTRE LA FIKVRK ÏYPIIOTDK. 57

ensemencé depuis 3 jours avec du bacille lyphique virulent,
el laissé à 37°. Avant l'inoculation, le bouillon a été stérilisé à
Tautoclave à 120*^ pendant dix minutes, et il est privé de tout
germe vivant, ainsi qu'on s'en assure en semant un tube vierge.

Le 21 mai, les animaux reçoivent une même quantité de
culture vieille de 5 jours et stérilisée.

Les 22, 23, 24 et 25 mai, l'inoculation intra-péritonéale de
culture stérilisée est faite avec un 1/3 de cent, cube de bouillon
ensemencé depuis 6, 7, 8 et 9 jours.

Pendant le cours de ce traitement précipité, et difficile à sup-
porter par des animaux de petite taille, 4 succombent, 8 souris,
après avoir présenté des signes de malaise plus ou moins grands,
reviennent à la santé.

Le 30 mai, ces 8 souris traitées et 4 souris neuves sont in-
jectées dans le péritoine avec un demi-centimètre cube de culture
virulente développée depuis 3 jours à l'étuve et non stérilisée.

Le 2 juin, les 4 souris neuves étaient mortes et présentaient
à l'autopsie les lésions ordinaires.

Les 8 souris vaccinées étaient toutes vivantes et paraissaient
un peu malades. Une a succombé le 7 juin, une seconde le
29 juin. Leurs organes ne renfermaient plus de bacilles vivants.

Plusieurs de ces animaux vivaient encore à la fin de décembre.

Expérience IL — 5 souris blanches sont inoculées avec 1/4
de cent, cube de bouillon de culture typhique vieille de 3 jours,
et stérilisée. Elles résistent toutes. 5 autres souris sont inocu-
lées pour la première fois avec une culture de même origine,
vieille de 9 jours et stérilisée. Vingt-quatre heures après, 3 souris
avaient succombé sur les 5.

Par conséquent la toxicité d'une culture typhique s'accroît
avec la durée de cette culture pendant les premiers jours.

Expérience IIL — Le 20 juin, 12 souris blanches reçoivent
1/4 de cent, cube d'une culture stérilisée vieille de 3 jours.

Le 22, une même dose de culture vieille de 5 jours.

Le 24, une même dose de culture vieille de 7 jours, et enfin,
le 26, elles sont inoculées avec une culture vieille de 9 jours.

Trois ont succombé pendant la durée du traitement.

Le 1" juillet, les 9 souris traitées et 4 souris neuves sont
inoculées dans le péritoine avec un 1/4 de cent, cube de culture
typhique vieille de 3 jours, non stérilisée.

58 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Le 3 juillet, toutes les souris témoins avaient succombé ;
une seule des souris traitées était morte. Deux autres moururent
le 12 et le 20 juillet. Les survivantes restèrent bien portantes
pendant plusieurs mois.

ExpÉRiKNCE IV. — Le 5 janvier 1888, dix souris blancbes
reçoivent dans le péritoine 1/4 de cent, cube d'une culture
typhique vieille de 3 jours et stérilisée à l'autoclave.

Le 6 janvier, une souris était morte

Le 8 janvier les 9 survivantes reçoivent 1/4 de cent, cube
d'une culture stérilisée vieille de 6 jours.

Le 12, une des souris mourut.

Le 23, 5 des souris traitées et 5 souris neuves reçoivent dans
le péritoine deux gouttes d'une culture virulente vieille de 6 jours.

Le 24, toutes les souris témoins étaient mortes.

Le 25, une des souris vaccinées succombe. Les 4 autres con-
tinuent à se bien porter.

Des expériences précédentes il découle quelques faits. Les
souris neuves résistent exceptionnellement k une dose déterminée
de culture typhique virulente. Les souris traitées préventivement
résistent dans la grande majorité des cas à la même inoculation.

Elles doivent celte immunité à la seule pénétration dans leur
organisme de principes chimiques solubles élaborés par les
bacilles typhiques,

La quantité de substance soluble contenue dans une culture
croît avec l'âge de celle-ci.

L'immunité n'appartient pas aux animaux pour quelques
heures ; elle est susceptible de persister pendant un assez long-
temps, encore indéterminé (Expér. IV).

Quelle est dans nos expériences la dose suffisante de poison
pour donner l'immunité à une souris, sans dépasser la résistance
de celle-ci au poison? Quelle est aussi cette substance soluble?

Nous avons étudié l'action physiologique de cette substance
sans la connaître complètement, et nous n'avons pas déterminé
le rôle d'un alcaloïde isolé dans les cultures typhiques par Brie-
ger, sous le nom de Typhotoxine. Ce que nous pouvons dire
cependant, c'est que la substance contenue dans les cultures, qui
donne une notable immunité contre le microbe virulent, paraît
bien être de celles que les bacilles fabriquent dans l'intérieur d'un

liMMUMTK CONTRE LA FTÈVRE TYPTIOIDE. 59

organisme vivant. On peut en effet donner aux souris un degré
d'immunité sensiblement égal au précédent, en les inoculant
avec des doses extrêmement faibles d'abord, puis progressi-
vement plus grandes d'un virus virulent. La vie du bacille dans
leur organisme a peu à peu fabriqué la dose de poison qui suffit
à donner l'état réfractaire.

Mais dans la fièvre typhoïde comme dans toute autre maladie
infectieuse, l'état réfractaire n'est presque jamais absolu. On
peut bien théoriquement supposer une condition chimique de
l'organisme qui rende impossible le début d'une culture d'un
microbe, l'imprégnation par des produits solubles jouant cons-
tamment le rôle d'un antiseptique. Reste à savoir si une pareille
dose de substance toxique permettrait la vie normale des cel-
lules. Mais d'ordinaire, l'immunité n'est pas absolue et doit être
mesurée par un coefficient. Elle se compose en effet de deux
facteurs d'importance variable suivant les cas : 1" la résistance
des cellules ; 2° l'imprégnation par les produits de la vie d'un
microbe; on conçoit que si l'un quelconque de ces facteurs vient
à faiblir, les causes qui empêchaient le début d'une culture
disparaissent, et l'immunité fait place à la maladie.

Les substances qu'on injecte à des animaux aussi fragiles
que des souris, sont pour elles des poisons violents, et nous
ne pouvons qu'approximativement indiquer les doses utiles et
celles qui dépassent le but. De plus, notre méthode d'inocula-
tion intra-péritonéale d'une quantité de liquide relativement
considérable, est quelque peu brutale et dangereuse. Toutes
ces raisons font comprendre que le chiffre des animaux qui
survivent ou qui succombent peut être un peu variable, suivant
la virulence des cultures et la main de l'expérimentateur. Mais
ce qui ne change pas, c'est le sens général du phénomène que
nous avons constaté : une dose de culture typhique qui lue
invariablement des souris saines, ne tue pas dans la grande
majorité des cas les souris qui ont absorbé préventivement des
produits solubles non vivants élaborés par le bacille typhique.
Celles-ci ont acquis l'immunité.

DE L'ACTION DE QIELQIES ANTISEPTIQUES ET DE LA CHALEUR
SUR LE RACILLE DE LA TURERCULOSE,

Par m. a. YERSIN.

Chaque microbe se comportant d'une façon qui lui est parti-
culière en présence d'un antiseptique donné, le pouvoir antisep-
tique d'une substance chimique doit être étudié à part sur chacun
d'eux.

L'action des antiseptiques sur les bactéries pathogènes est
surtout intéressante à connaître parce qu'elle nous fournit des
moyens de détruire les matières virulentes, et aussi parce qu'elle
peut nous donner des indications thérapeutiques.

11 faut donc, dans l'étude de l'action d'un antiseptique sur un
microbe, rechercher : 1° Quelle est la quantité d'antiseptique
nécessaire pour faire périr le microbe dans un temps donné;
2° quelle est la quantité qu'il faut ajouter à un milieu nutritif
déterminé pour empêcher le développement du microbe.

Dans cette note, nous ferons connaître l'action de quelques
antiseptiques sur le bacille delà tuberculose ; nous ne traiterons
que le premier des points dont nous parlions plus haut, à savoir:
déterminer quelles sont les doses d'antiseptiques qui tuent le
bacille tuberculeux dans un temps donné.

Parmi les travaux qui ont été faits sur ce sujet, le plus im-
portant est celui de MU. Shill et Fischer {Ueber die Desinfection
des Amwurfs des Phthisiker) paru en 1884, dans le deuxième vo-
lume des Miltheilungen *. La matière virulente employée par
MM. Shill et Fischer était des crachats tuberculeux qu'ils ino-
culaient à des cobayes après leur avoir fait subir l'action de l'an-
tiseptique étudié. Cette méthode répondait parfaitement au but
que s'étaient proposé les auteurs et leur a donné des résultats
importants dont l'hygiène a fait son profit. Cependant elle ne
permet pas une grande précision scientifique. Rien n'est plus
variable, en effet, que le nombre des bacilles contenus dans les

1. m iUlieilungen aus dem Kaiserlichen Gesandheitsamle (12" vol. 18S4).

BACILLE DE LA TUBERCULOSE. 61

crachats tuberculeux, et par conséquent rien n'est plus variable
aussi que la quantité de virus inoculée aux animaux. La résis-
tance des bacilles aux antiseptiques varie aussi suivant les con-
ditions dans lesquelles s'est faite leur culture, selon qu'ils sont
jeunes ou vieux, qu'ils renferment des spores ou qu'ils en sont
privés. De plus, la réaction des sels métalliques sur les crachats
est complexe, une partie de la substance active se combine à la
matière organique et n'agit pas sur les bacilles. Enlin, l'inocu-
lation aux cobayes nous fait bien connaître si les bacilles sont
capables de donner, après faction de l'antiseptique, la tubercu-
lose à ces animaux, mais lorsque ceux-ci resten^ en bonne santé,
elle ne nous permet pas d'affirmer que tous les bacilles inoculés
avaient été tués. Sans parler de la réceptivité pour la tuberculose
qui n'est pas la même chez tous les cobayes, il faut remarquer
que les bacilles modifiés dans leur vitalité, par l'action passagère
d'un antiseptique, peuvent se montrer inoffensifs pour un animal,
sans avoir perdu pour cela le pouvoir de se cultiver de nouveau
dans un milieu approprié où ils reprendront peut-être leur
virulence. Outre les bacilles de la tuberculose, les crachats ren-
ferment d'autres organismes microscopiques qui peuvent, s'ils
n'ont pas succombé à l'action de l'antiseptique, rendre incertain
le résultat des inoculations. Nous avons tâché d'éviter toutes ces
causes d'incertitude.

Pour que toutes nos expériences soient aussi comparables
que possible entre elles, nous avons fait agir les antiseptiques sur
des bacilles cultivés de même âge et de même virulence. Après
leur contact avec l'antiseptique, nous éprouvions la vitalité des
bacilles, non plus en les inoculant à des cobayes, mais en les
semant sur un milieu nutritif favorable. Les perfectionnements
que MM. Roux et JNocard ont apportés dans la culture du bacille
de la tuberculose ont rendu ces expériences faciles ; elles peuvent
être multipliées et donnent des résultats très constants.

Voici la technique que nous avons suivie : avec une effilure
de verre, nous prélevons une petite parcelle de la couche blan-
châtre formée par les bacilles à la surface d'un tube de gélose
glycérinée ensemencé 15 jours auparavant '. L'effilure chargée

1. Les bacilles de ces cultures présentent déjà des spores. Une parcelle de
cette couche blancliàtro, uniquemi>nt composée de bacilles, portée sur du papier de
touruesol, donne une réaction légèrement alcaline.

62

ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

de bacilles est plongée dans un LuIdc à essai qui contient la
solution antiseptique. Après un temps déterminé, on fait une
prise dans le dépôt au moyen d'un tube effilé, et on la fait tomber
dans un tube à essai plein d'eau distillée, stérilisée. Quelques
heures après on puise de nouveau cette semence bien lavée
pour la porter dans un flacon de bouillon de veau peptonisé
glycérine, que l'on met à l'étuve à 39*'.

En opérant ainsi, les bacilles sont seuls soumis à l'action de
l'antiseptique, pendant des temps variables, sans qu'il y ait
d'action secondaire de l'antiseptique sur les milieux de culture.

Il serait fastidieux pour le lecteur de rapporter ici tous les
chiiïres relevés dans les nombreuses expériences que nous
avons faites. Le tableau suivant résume les résultats obtenus
avec les antiseptiques les plus employés.

Les proportions indiquées dans la seconde colonne le sont
en millièmes en volumes pour les liquides, en millièmes en
poids pour les solides. La troisième colonne, marquée A, donne
les durées de contact du microbe et de l'antiseptique pour les-
quelles tous les germes ne sont pas tués; la colonne B les
durées d'actions suffisantes pour tuer tous les germes.

ANTISEPTIQUES.

Millièm-'s.

A

B

Acide plionique ....

Ah'onl absohi

Élher iodofornié ....
Élher

so

10

1000

10

1000

1

3

2,5
40

lainules
5 id.

2 heures

1 heure
1 id.
1 id.

12 heures

30 secondes

1 minute
5 id.

5 id.
10 id.
10 id.

2 lieures

6 heures

Birhloruro de uiercuie.
Thymol

Eau sat. de créosole. .

id. naphtol p.

Acide salicylique. . , .

Acide borique

Les bacilles qui ont subi l'action de l'antiseptique se cul-
tivent d'autant plus lentement que l'antiseptique est plus éner-
gique, et que son action a été plus prolongée.

BACILLE DE LA TUBERCULOSE. C3

II

Dans une autre série d'expériences, nous avons déterminé la
température à laquelle sont tués les bacilles de la tuberculose.
Nous avons étudié la résistance à la chaleur des bacilles tuber-
culeux sans spores et des bacilles sporulés '.

Pour avoir des bacilles tuberculeux privés de spores, nous
avons pris de la pulpe de la rate de lapin mort à la suite d'une
injection intraveineuse de culture de tuberculose sur gélose
glycérinée. MM. Roux et Nocard ont montré que lorsqu'on in-
jecte ainsi dans les veines des lapins des bacilles cultivés par
leur méthode, les animaux succombent très rapidement (15 à
20 jours) à une tuberculose infectieuse généralisée. La rate est
très augmentée de volume, et elle contient une quantité énorme
de bacilles qui sont aussi en grand nombre dans la moelle des
os. Cependant dans aucun organe on ne voit de tubercules
appréciables à l'œil; la marche de la maladie a été si rapide que
les tubercules proprement dits n'ont pas eu le temps de se
former.

Dans ces formes de tuberculose infectieuse, les bacilles sont
1res homogènes, se colorent également dans toutes leurs parties,
et ne présentent pas l'aspect g-ranuleux des bacilles des crachats.
On aspire dans des tubes eflilés un peu de la pulpe d'une rate très
riche en bacilles, et, après avoir fermé ces tubes à la lampe, on les
plonge dans un bain-marie dont la température est bien réglée.
Après chauffage pendant un temps déterminé , on sème la
pulpe dans un bouillon glycérine. La quantité de matière chauf-
fée est ainsi très petite, et comme elle est contenue dans une
etfilure de moins de un demi-millimètre de diamètre, elle prend
rapidement la température du bain-marie et est chauffée égale-
ment dans tous les points.

Voici les résultats que nous avons obtenus : Les flacons en-
té Nos connaissances sur les spores de la tuberculose sont encore fort incom-
plètes. Les spores, dans les bacilles qui ont servi à nos expériences, apparaissaient
non pas comme des granulations plus ou moins irrc'gulières et prenant fortement
la matière colorante, mais bien comme des spores véritables à contours nets, au
nombre de une ou deux par bacille, trois au plus. Ces spores sont particulière-
ment nettes dans les cultures sur gélose glycérinée âgées de quelques semaines, et
aussi dans les cultures d'nn bouillon glycérine albuminé.

64 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

semences avec les bacilles chauffés à 5o° pendant 10 minutes ont
donné une culture après lo jours. Ceux ensemencés avec les
bacilles portés à 60° pendant 10 minutes se sont peuplés après
37 jours. Enfin les bacilles chauffés à 70° pendant 10 minutes
n'ont pas donné de culture.

Les bacilles sporulés qui ont servi à la seconde série d'expé-
riences venaient d'une vieille culture dans bouillon glycérine
légèrement alcalin. Beaucoup d'entre eux présentaient des spores
très nettes; nous les avons chauffés dans un tube effilé, pendant
10 minutes, aux températures de :

55°, 60°, 65", 70°, 75", 80°, 85% 90°, 100°

Au bout de 10 jours, les bacilles chauffés à 55° avaient donné
une culture dans le bouillon glycérine; ceux chauffés à 60" ont
poussé après 22 jours; les bacilles chauffés au-dessus de 70°
n'ont donné aucun développement. Cette expérience, répétée un
grand nombre de fois, nous a toujours fourni les mêmes résultats.

Les bacilles de la tuberculose résistent donc pendant 10 mi-
nutes à une température de 60°, et il est à remarquer que la
résistance des spores à la chaleur ne paraît pas supérieure à celle
des bacilles eux-mêmes.

Ces résultats sont en désaccord avec ceux qui ont déjà été
publiés sur la résistance des bacilles de la tuberculose cà la cha-
leur. Ainsi MiM. Shill et Fischer ont donné, dans un cas, la
tuberculose à deux cobayes avec des crachats restés pendant
15 minutes dans la vapeur d'eau à 100°. Dans d'autres expé-
riences, faites dans les mêmes conditions, les résultats ont été
négatifs. Les crachats, en nature ou additionnés d'eau, portés à
rébullilion,se sont toujours montrés stériles, lorsque l'ébullition
a duré plus de 2 minutes. Dans un travail récent, M. Vœlsh '
dit qu'après un chauffage simple ou répété à 100°, la semence
tuberculeuse est affaiblie, mais non morte. 11 faut remarquer
que les résultats que nousavons obtenus en chauffant des bacilles
de cultures dans des conditions bien déterminées sont très
constants, tandis qu'il n'en est pas de même dnns les expé-
riences où l'on a employé les crachats. Dans ce dernier cas,

•I. Vœlsoli. r.ontrihtitinn à la question de la résistance des bacilles tiiberculenx.
lieilr. z. path. Anat., t. Il, 1887. V. ces Annales, janxiàv 1888, p. HS.

BACILLE DE LA TUBERCULOSE. 65

l'acidité ou l'alcalinité de la matière chauffée a une grande iu-
lliience sur la résistance des bacilles. Il en est de même du mode
de chauffage, il est évident que si l'on chauffe les crachats dans
un tube à essai, ils prendront moins rapidement la température
dubain-marie que s'ils sont chauffés par très petites quantités
dans une effilure très ténue. En tenant compte des expériences
des auteurs que nous venons de citer, il semble que les bacilles
des cultures que nous avons employées soient moins résistants
à la chaleur que ceux que l'on trouve dans les crachats.

Nous avons, sur les conseils de M. Roux, essayé d'appliquer
les données fournies par les essais précédents à l'isolement des
bacilles des crachats tuberculeux. La plupart des org-anismes
microscopiques qui accompagnent le bacille de Koch dans les
crachats sont tués à une température inférieure à 60^; en chauf-
fant à cette température des crachats riches en bacilles, et en les
semant ensuite dans du bouillon g-lycériné, on pouvait espérer
avoir des cultures pures de bacilles. MM. Roux et Nocard et
nous-mêmc nous avons réussi à obtenir des cultures pures de
bacilles tuberculeux par cette méthode. Cependant, nous devons
dire qu'elle n'est pas à conseiller, parce qu'elle ne réussit que
rarement et seulement avec des crachats très riches en bacilles.
De plus la culture, lorsqu'on en obtient une, est si longue à se
produire qu'il est beaucoup plus court d'avoir recours aux mé-
thodes ordinaires pour se procurer des cultures de bacilles.

66 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

SUR LE mcimm m l imwnité

Par m. a. CHAUVE AU.

Il y a longtemps que cette importante question me préoccupe.
Les travaux dont elle a été l'objet de ma part, depuis plus de
huit ans, sont connus '. On sait comment j'ai cherché à y expli-
quer la création de l'immunité acquise, c'est-à-dire la résistance
de l'organisme aux microbes infectieux qui s'y sont développés
une première fois : celte résistance serait le fait de l'imprégnation
des différents milieux organiques parle poison soluble ou toute
autre matière dissoute résiduelle, provenant de la première
évolution microbienne. La démonstration de ce mécanisme
repose, dansmes recherches, sur deuxfaitsprincipaux: 1° l'aggra-
vation ou l'atténuation des effets produits par certains agents
infectieux, suivant qu'on les inocule en grande ou en petite quan-

-1. Consulter: l'' Comptes rendus des séances de VAcadé.nie des sciences. — Des
causes qui peuvent faire varier les résultats de l'inoculation charbonneuse sur
les moutons algériens. — Influence de Ja quantité des agents infectants. — Appli-
cations à la théorie de l'immunité. Tome XC, i28 juin 1880.

Du renforcement de l'immunité des moutons algériens à l'égard du sang de
rate, par les inoculations préventives. — InQuence de l'inoculation de Ja mère
sur la réceptivité du fœtus. Tome XCI, 19 juillet 1880.

Sur la résistance des animaux de l'espèce bovine au sang de rate et sur la pré-
servation de ces animaux par les inoculations préventives. Tome XCI, 18 octobre
•1880.

Élude expérimentale de l'action exercée sur l'agent infectieux par l'organisme des
moutons plus ou moins réfractaires au sang de rate; ce qu'il advient des microbes
spécifiques introduits directement dans le torrent circulatoire par transfusions
massives de sang charbonneux. Tome XCI, 26 octobre 1880.

De l'atténuation des effets des inoculations virulentes par l'emploi de très petites
quantités de virus. Tome XCd, i avril 1881.

Sur le mécanisme de l'immunité. Tome CXVI, 6 février 1888.

2o Revue scientifique. — L'inoculation préventive du choléra. iSiio. Tome II,
page oo8.

3" Revue mensuelle de médecine et de chirurgie. — De la prédisposition et de
l'immunité pathologiques. 1878. Tome III, page 868 et 869.

40 Revue de médecine. — Sur la théorie des inoculations préventives. Mars 1887.
Tome Vil, page 177. Ce dernier travail rappelle la plupart de mes autres tra-
vaux, et donne la formule synthétique de leur signification.

SUR LE MECANISME DE L'IMMUNITE. 67

tilé et qu'ils se présentent ainsi dans des conditions plus ou moins
favorables pour vaincre la résistance de l'organisme ; 2° l'acquisi-
tion constante de rimmuoité par les jeunes sujets nés de mères
inoculées du sang de rate dans les dernières semaines de la
gestation, et appartenant à une espèce qui ne se prête que très
exceptionnellement au passage du bacille du sang de la mère
dans celui du fœtus.

Mes expériences sur l'inlluence du nombre des microbes
infectieux ont porté principalement sur le virus du sang de
rate.

J'ai montré que ce virus, inoculé à l'état de virus fort sur
des moutons doués de l'immunité naturelle, ou rendus plus ou
moins réfraclaires par des inoculations préventives, a bien
plus de chances d'infecter et de tuer ces animaux, quand le virus
est abondant, que s'il est introduit en quantité très minime.
Plus tard, ce fait a été absolument confirmé par le résultat de
mes expériences sur deux autres virus beaucoup plus faciles
à manier : ceux du charbon emphysémateux et de la septicémie

gangreneuse.

J'étais autorisé, par ces expériences, à conclure qu'un microbe
infectieux, s'étant une première fois multiplié dans son milieu
naturel de culture, et l'ayant ainsi rendu rebelle à une culture
ultérieure, exerce cette action, non pas en épuisant le terrain,
en le privant de toutes les substances nécessaires au développe-
ment du microbe, mais bien en y laissant des substances nui-
sibles, ptomaïnes ou autres matières solubles, qui imprègnent ce
milieu de culture et lui font subir certaines modifications incon-
nues d'où résulte sa stérilisation plus ou moins complète.

Aujourd'hui ces expériences ne sont plus contestées. On en
accepte les résultats et la conséquence doctrinale que j'en ai
tirée. Je ne veux doncpas en parler de nouveau, malgré l'intérêt
que présentent un certain nombre de ces expériences qui n'ont
jamais été publiées.

Mais les expériences sur les agneaux qui acquièrent l'immu-
nité dans le ventre de la mère ont besoin d'être rappelées. J'y
ai toujours attaché une grande importance, car elles donnent
une démonstration directe du mécanisme de l'immunité qui se
déduit de mes recherches sur l'influence du nombre des agents
infectants.

68 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

L'idée directrice de ces expériences est bien simple. Dans les
cas courants d'immunité acquise, l'organisme qui est devenu
plus ou moins réfractaire, à la suite d'inoculations préventives, a
été soumis à Faction simultanée des microbes pathogènes et des
produits solubles que ceux-ci engendrent. Je me suis dit que,
s'il était possible de conférer l'immunité, contre le sang- de rate,
à un organisme dans lequel il ne pourrait pénétrer que ces pro-
duits solubles, la démonstration du mécanisme de l'immunité ne
laisserait rien à désirer. Or, d'après les recherches de Brauëll,
chez les brebis pleines atteintes du sang de rate, les bacilles
fourmillant dans le sang de la mère ne passent point dans le
sang du fœtus. Le placenta les intercepte, comme il arrête les
autres éléments figurés. II n'y a que les matières solubles du sang
qui puissent traverser le placenta, envahir les humeurs et im-
prégner les tissus du fœtus. Si donc ces humeurs et ces tissus
devenaient ijiaptes à la prolifération du bacille charbonneux, il
faudrait bien admettre que la résistance qu'ils acquièrent est due
à l'action des matières solubles qui, du sang de la mère, sont
passées dans celui du jeune sujet.

L'expérience m'a enseigné qu'il en est ainsi ; il a été démontré
par mes recherches que les agneaux nés de mères inoculées du
sang de rate, pendant la gestation, deviennent tous plus ou moins
réfractaires à l'action du virus charbonneux. La preuve directe
cherchée a donc été faite.

Il est vrai qu'on en a contesté la valeur. Mais c'est faute
d'avoir tenu compte des conditions toutes spéciales dans lesquelles
mes expériences ont été faites. J'en suis peut-être aussi un peu
coupable. Comme je ne m'étais pas imaginé qu'on pourrait
appliquer à ces expériences les conclusions d'autres expériences
faites dans des conditions toutes différentes, je n'ai pas cru
devoir soutenir mes propres conclusions — qui me semblaient
absolument inattaquables — endonnanldes détails circonstanciés
sur la manière dont mes recherches avaient été conduites et les
précautions dont elles avaient été entourées. Le moment est venu
d'en dire ici quelques mots.

Mes expériences ont été commencées au milieu de l'année
1879 et se sont continuées presque sans interruption jusqu'à la
lin de l'année 188G. L'explication que j'en ai tirée, pour le
mécanisme de l'immunité acquise, a été publiée en 1880 [Comptes

SUR LE MÉCANISME DE L'IMMUNITÉ. 69

rendus, 19 juillet) après mes premières expériences. Toutes mes
expériences ultérieures ayant confirmé celles-ci d'une manière
éclatante, j'ai, dès 1884 [Revue scientifique, tome II, page 358),
maintenu l'exactitude absolue des faits que j'avais fait connaître
plus do quatre ans auparavant, et qui établissaient l'acquisition
de l'immunité par l'action de matières solubles empruntées par
le jeune sujet à la mère pendant la vie fœtale. J'ai réitéré celte
affirmation en 1887 [Revue de médecine, tome YII, page 186). Il
me reste à montrer que j'y suis parfaitement autorisé.

Le faisceau de preuves accumulées, pendant ce laps de sept
années, comprend un nombre considérable d'expériences, dont
quarante au moins ont été consacrées à la démonstration de la
vaccination intra-utérine de l'agneau contre le sang de rate.
Voici dans quelles conditions ces expériences ont été faites. Celles
de 1879, 1880 et 1881, exécutées presque toutes sur des brebis
pleines algériennes, ont été exclusivement consacrées à l'étude
spéciale pour laquelle elles étaient instituées. Les autres, datant
de 1882 à 1886, ont été faites pour ainsi dire accessoirement, au
cours d'expériences instituées dans un tout autre but. Des sujets
indigènes de l'espèce ovine étaient alors entretenus constamment
dans mon laboratoire, pour l'essai de virus charbonneux atténués
par diverses méthodes. Bon nombre de ces animaux se sont
trouvés être des brebis pleines arrivées aux dernières semaines
de la gestation. Elles subissaient, comme les autres sujets, les
inoculations préventives, souvent réitérées et toujours suivies
de l'épreuve avec le virus fort. Quelques-unes mouraient du
sang de rate. On verra plus loin comment elles étaient utilisées.
Le plus grand nombre échappaient etdonnaient bientôt naissance
à des agneaux parfaitement bien portants. On n'a compté en
tout que deux avortements.

Comment se sont comportés, à l'épreuve de l'inoculation avec
du virus fort, les agneaux nés dans ces conditions? Pour s'en
bien rendre compte, il faut savoir ce qui arrive des agneaux pro-
venant de mères non inoculées pendant la gestation. Si les jeunes
sujets appartiennent à nos races indigènes, ils se montrent,
comme on le sait, encore plus impressionnables que les adultes
et meurent presque tous avec une grande rapidité. Ceux qui
proviennent de mères algériennes se comportent à peu près
comme les adultes. Il y en a qui succombent; c'est la petite

70 ANNALES DR L'INSTITUT PASTEUR.

minorilé. D'autres, en beaucoup plus grand nombre, présenlent
des malaises évidents. Enfin quelques-uns ne paraisse?it ^8ls du
tout malades. Mais chez ces derniers, comme dans les autres,
rinfection se manifeste par des signes évidents, plus ou moins
marqués, qui ne manquent jamais : un signe général, l'élévation
de la température ; un signe local, la tuméfaction du ou des
ganglions lymphatiques les plus proches du point d'inoculation.
Comme j'ai toujours fait mes inoculations à l'oreille, par piqûres
sous-épidermiques ou par injection sous-cutanée d'une petite
quantité de virus, ce sont les ganglions parotidien et pré-scapulaire
qui ontprésenté, dans mes expériences, les signes de tuméfaction.

Or voici ce qui est arrivé, quand il s'est agi de l'acquisition
intra-utérine de l'immunité. Toits les agneaux nés de mères algé-
riennes ont complètement échappé à l'infection; aucun n'est
mort; aucun n'a éprouvé de malaises; aucun n'a présenté d'une
manière sensible l'élévation de la température ou la tuméfaction
ganglionnaire. Chose plus remarquable encore, parmi les agneaux
indigènes, plus nombreux que les algériens, il n'y en a pas im
qui ait succombé. La plupart, il est vrai, ont éprouvé des malaises
passagers, plus ou moins forts ; mais, en cela, ils se sont com-
portés comme les adultes inoculés préventivement et soumis
ensuite à l'épreuve du virus fort.

J'ai dit plus haut que le nombre des ag'neaux ainsi éprouvés
est de quarante, au moins. Si je n'en puis donner le chifïre
absolument précis, c'est qu'on avait fini par ne plus recueillir
les observations, tant était éclatante et nette la signification du
nombre considérable de faits enregistrés pendant les cinq pre-
mières années. 11 est étonnant, en efïet, qu'aucun cas de mort
no soit survenu à l'épreuve de l'inoculation avec du virus fort.
On n'est pas toujours aussi heureux quand on éprouve
les adultes vaccinés. Certes, j'aurais eu quelque cas de mort, sur
mes agneaux, que la preuve cherchée dans mes expériences
n'en aurait pas été amoindrie. Mais cet accident prévu ne m'est
pas même arrivé.

Ainsi donc, tous les agneaux nés de mères inoculées du sang-
de rate pendant les dernières semaines de la gestation acquièrent
l'immunité. Par quel mécanisme? Est-ce bien celui dont j'avais
la vérification en vue en instituant mes expériences? L'immunité
résulte-t-elle de l'imprégnation du fœtus par des matières so-

SUR F.E MECANISME DE L'IMMUNITE. 71

lubies puisées dans le sang de la mère ? Incontestablement, s'il
est vrai que les bacilles de celles-ci ne passent jamais ou ne pas-
sent qu'exceptionnellement dans le sang du fœtus. Examinons
ce point, rendu tout particulièrement intéressant et délicat
par les recherches de MM. Straus et Chamberland sur la loi
Brauëll-Davaine.

Quand j'ai commencé mes expériences sur le présent sujet,
je ne doutais pas du tout de l'exactitude de cette loi; elle m'était
garantie par le talent d'observateur de Davaine, si universel-
lement connu et apprécié. Aussi me suis-je borné à vérifier, sans
prendre aucune précaution particulière, le fait constaté par
Brauëll, sur la brebis pleine qui meurt du sang de rate, à savoir
que le sang du fœtus n'est pas inoculable, tandis que celui de la
mère communique toujours la maladie quand on l'inocule. Mais
mes premières expériences étaient à peine publiées que j'étais
amené à me demander, bien avant MM. Straus et Chamberland, si
l'arrêt du bacille charbonneux par le placenta est aussi absolu que
l'avait proclamé Davaine; et cela, sans penser que la constatation
de quelques exceptions put affaiblir la valeur delà démonstration
que javais demandée à mes expériences.

Voici dans quelles circonstances j'ai été entraîné à cette
recherche. Toussaint s'était appuyé sur la vaccination intra-
utérine de l'agneau, prouvant l'existence d'une matière vaccinale
soluble, pour imaginer sa retentissante expérience de vaccination
préventive du mouton contre le sang de rate. En fait, il avait
réussi à vacciner des moutons avec du sang dans lequel il croyait
avoir tué tous les bacilles par le chauffage. Quoique ce mémorable
résultat eût été obtenu par une application de la notion que je
venais d'introduire dans la science, la vaccination intra-utérine
des agneaux par une matière vaccinale soluble, je n'acceptai pas
l'interprétation de Toussaint. Il venait de s'installer pour plu-
sieurs semaines dans mon laboratoire. Nous discutâmes cette
interprétation. Je la rejetai, en raison de la petite quantité de
matière vaccinale que Toussaint avait employée sur ses moutons,
et parce que je ne pouvais admettre a priori que cette matière
fût capable de se reproduire, de se multiplier par elle-même.
Pour moi, c'était un produit de la vie bacillaire, et il aurait fallu,
pour l'introduire en quantité efticace dans l'organisme des mou-
lons à vacciner, injecter de grandes masses de sangcharbonneux

72 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

chauffé. Je soutins à Toussaint que le beau et important résultat
qu'il venait d'obtenir devait être attribué à la persistance d'un
certain degré de vitalité dans les bacilles soumis à l'action des-
tructive delachaleur. Eiï"eclivement,M. Pasteur donnait, quelque
peu de temps après, la preuve érlalante de l'exactitude de celte
interprétition.

Mais celui-ci ne se rendit pas à mes objections. 11 persislaà
essayer de préserver les moutons avec de petites quantités de
matière vaccinale soluble, prise non plus dans le sang- des adultes,
mais bien dans celui des foetus trouvés sur les brebis ayant suc-
combé au charbon. De cette manière il agirait, croyait-il, avec
du sang- privé de tout bacille et pourvu seulement de la matière
vaccinale soluble, tout à fait naturelle, n'ayant pas subi les
atteintes possibles du chauffage. C'est alors que je lui fis une
nouvelle objection, qui a été l'origine des recherches que j'ai
entreprises pour contrôler sérieusement les expériences de
Brauëll et de Davaine. J'arguai de la possibilité de la présence,
dans le sang du fœtus, de quelques bacilles err^^/^'z^es, qui auraient
pu exceptionnellementtraverserle placenta. J'engageai Toussaint
à faire d'abord des recherches dans le but de s'éclairer sur ce
point préalable. Justement les circonstances étaient très favora-
bles à ces recherches. Les animaux de l'espèce ovine qui étaient
alors soumis, dans mon laboratoire, à des essais d'inoculations
charbonneuses capables d'entraîner la mort se trouvaient être, en
assez grand nombre, des brebis pleines arrivées à une période
avancée de la gestation. Toussaint eut bientôt plusieurs occasions
d'essayer sur le cobaye, en employant une notable quantité de
matière^ le sang de fœtus de brebis ayant succombé au sang de
l'ate.

Quels furent les résultats de ces expériences? Il arriva juste-
ment que le sujet de la première expérience mourut du sang de
rate. Mais les sujets des trois expériences subséquentes résistèrent
parfaitement. Aussi Toussaint, qui avait quelques raisons
légitimes de soupçonner que la première expérience n'avait pas
été faite dans des conditions de sécurité absolue, contre les chances
de contamination accidentelle par le sang du placenta maternel,
resta-t-il convaincu qu'il y avait lieu de donner suite à son pro-
jet. Une le poursuivit pourtant pas, parce que, sur les entrefaites,
survint labrillante démonstration de M. Pasteur, sur le rôle, joué,

sua LE M1-:CANISME DE L'IMMUMTlv 73

dans Texpérience fondamentale de Toussaint, parles bacilles du
sang' chaufTé. L'idée de Toussaint n'en restait pas moins légitime
nu fond ; mais elle était en avance sur les faits et sur l'époque.

Je continuai toutefois, seul, les recherches propres à m'éclairer
sur la virulence du sansr des fœtus de brebis mortes du sang- de
rate à une période avancée de la gestation. Sept expériences
furent ajoutées à celles que j'avais fait faire à Toussaint. Cette
fois, ce furent des moutons qui servirent de sujets d'épreuve pour
la virulence du sang- fœtal, la taille des animaux permettant alors
d'injecter sous la peau de plus g-randes quantités de sang : un
centimètre cube. Or, un seul de ces animaux mourut du sang'
de rate. Les autres ne devinrent pas malades.

Ainsi, en additionnant tous les cas d'essai du sang fœtal qui
ont été recueillis dans mon laboratoire, on en compte onze en
tout, et, sur ce nombre, le sang ne s'est montré virulent que dei(x
/o/sauplus. Qu'on rapprochecetteproporlion decelle desag-neaux
qui acquièrent l'immunité dans le ventre de la mère (40 sur 40),
et l'on jugera si l'immunité conférée par la mère au fœtus résulte
de la contamination directe de l'organisme fœtal par le bacillus
anthracis. comme le pensent MM. Straus et Chamberland.

Si l'on s'en rapportait aux chiffres cités ci-dessus, 7, au
plus, de ces 40 sujets qui ont acquis l'immunité pendant la vie
intra-utérine, auraient été exposés à être pénétrés — et encore
en quantité presque inappréciable — par les bacilles du sang do
la mère. Je suis disposé à trouver celte proportion encore trop
forte. Il est probable, sinon absolument certain, que l'immunité
a été créée chez tous ces ag'ueaux sans qu'un seul bacille de la
mère ait pénétré dans le sang- d'aucun d'eux. Et en effet, quand
l'évolution du virus charbonneux, fort ou atténué, sur les brebis
pleines, n'entraîne ni la mort, ni l'avortement, il y a les plus
grandes chances pour que le bacille, si rare, parfois même tout
à fait absent dans le sang- de la mère, ne se trouve, en aucun cas,
dans celui de fœtus. Je w'aÀ jamais réussi à en déceler l'existence
sur les fœtus de brebis inoculées du sang' de rate, dans des con-
ditions assurant la survie, et tuées au moment où l'on jugeait
arrivée la fin de la période aiguë de l'infection.

Je désire faire une dernière observation. Nous connaissons
des maladies infectieuses qui, chez la brebis pleine, se trans-
mettent au fœtus avec la plus grande facilité, avec tous leurs

74 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

caractères anatomo-patliologiques : par exemple, le charbon
symptoniatique. Or, a-t-on jamais observé les lésions du charbon
ordinaire chez les fœtus de brebis mortes de cette maladie? En
ce qui me concerne, je n'en ai point rencontré, pas même sur les
fœtus dont le sang cardiaque a été trouvé virulent. On sait que
la lésion principale réside dans la rate, d'où le nom de sang de
rate {splenic fever des Anglais) par lequel on désigne le plus
communément la maladie. Oi\j'amais, dans les nombreuses obser-
vations que j'ai été à même de faire, je n'ai rencontré la moindre
altération de la rate des fœtus. Cet organe était parfaitement
sain. J'en puis dire autant de tous les autres organes et en par-
ticulier des ganglions lymphatiques. C'est donc une exagération de
prétendre que les jeunes peuvent prendre le sang- de rate dans le
ventre de la mère. Ils ne contractent même pas la maladierudi-
mentaire qui succède aux inoculations préventives avec des virus
atténués, chez les sujets qui vivent de leur vie propre. En sorte
que je me sens entraîné à considérer les rares agents infectieux
qui rendent quelquefois virulent le sang du fœtus comme des
bacilles erratiques, venus tous de la mère, et incapables ou peu
capables de se multiplier dans le jeune sujet. Il ne serait pas
impossible, en effet, que celui-ci fût imprégné par la matière
vaccinale, empruntée à la mère, avant que la multiplication des
bacilles, qui est toujours tardive, fût assez avancée pour créer des
chances de pénétration trans-placentaire.

Dans tout ce que je viens de dire, il n'y a rien qui tende à
infirmer la valeur des expériences faites par MM. Straus et Cham-
berland, sur le même sujet, mais dans des conditions différentes
de celles où j'ai opéré moi-même.

Je n'ai plus qu'à tirer la conclusion de ce travail : mes expé-
riences sur la vaccination intra-utérine des agneaux ont bien la
signification que je leur ai donnée; elles démontrent que l'im-
munité acquise par ces agneaux, dans le ventre de la mère, est
le fait de la matière vaccinale soluble que celle-ci a cédée à son
produit.

Si j'en avais eu le temps, j'aurais ajouté quelques considé-
rations relatives aux expériences que j'ai faites en 1884 avec
M. Arloing sur la maladie du vibrion septique. Ce sera pour une
autre fois.

\ARIATIO\S DE FORME CHEZ LES BACTÉRIES,

Les caractères morphologiques servent de base à toutes les
classifications en histoire naturelle, et, comme les êtres supé-
rieurs, les bactéries sont classées surtout d'après leur forme.
Or pour qu'un caractère puisse servir utilement dans une clas-
sification, il faut que les indications qu'on en peut tirer soient
toujours comparables entre elles. On ne pourra donc faire pré-
dominer les caractères morphologiques que si ces caractères
restent invariables. Le problème de l'invariabilité de la forme,
qui a été soulevé d'une façon générale pour tous les êtres vivants,
s'est surtout posé pour les infiniment petits, dont les dimensions
rendent l'observation difficile, et dont la structure très simple
prête davantage à la confusion. Chez les bactéries, ce problème
a reçu deux solutions très différentes

Pour Ferd. Cohn, qui essaya le premier, en 1872, de donner
une classification systématique des bactéries, la constance de la
forme ne faisait aucun doute. Il y avait lieu d'établir, chez ces
organismes, des espèces morphologiquement distinctes et aussi
nettement délimitées que chez les êtres supérieurs. Ces espèces
furent rang-ées dans quatre groupes différents, caractérisés
chacun par une forme spéciale : microcoque, baclérium, bacille
et spirille.

La classification de Cohn avait à peine paru, que Ray Lan-
kaster observa un microbe coloré, le Clathrocijstis roseopersicùia,
^ui présentait dans les différents stades de son développement
les quatre formes établies par Cohn et regardées par lui comme
absolument distinctes. D'autres observations de Billroth, War-
ming-, Klebs, etc., donnèrent lieu à une théorie toute différente
de celle de Cohn, qui fut soutenue et développée surtout par
Niegeli.

76 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Pour Naegeli, la forme est éminemment variable chez les bac-
téries. Chaque espèce peut, suivant les conditions du milieu,
prendre toutes les formes, depuis celle de microcoque jusqu'à
celle de spirille. L'espèce n'existe donc pas comme l'avait dé-
finie Ferd. Cohn. D'ailleurs, la fonction spécifique n'existe pas
davantage : forme et fonction varient également suivant les
conditions extérieures. Une même bactérie transplantée dans
des milieux différents « peut successivement, dans le cours de
ses généralions, produire ici l'acidité du lait ou la fermentation
butyrique, ou l'altération des vins, ou la putréfaction des matières
albuminoïdes, ou la destruction de l'urée... et là engendrer la
diphtérie, ouïe typhus, ou la fièvre récurrente, ou le choléra'... »

Ces conclusions, inspirées visiblement par les idées darwi-
niennes, ne s'appuyaient malheureusement pas sur une expéri-
mentation rigoureuse. Il ne fut pas difficile aux partisans de
Cohn de montrer que les expériences fondamentales de leurs
adversaires étaient le plus souvent entachées d'erreurs. Aucun
d'eux, en effet, n'opérait ni même ne se souciait d'opérer avec
des cultures pures. Naegeli déclare d'ailleurs « qu'il est impos-
sible de faire sûrement des cultures pures avec les bactéries, tant
à cause de leur petitesse extrême que de leur dissémination
générale dans l'air et dans l'eau » '\ Seul Lankaster avait opéré,
semble-t-il avec pureté ; le choix qu'il avait fait d'une espèce
colorée rendait d'ailleurs le contrôle plus facile ; mais il s'était
adressé à un organisme plus voisin des Nostocacées que des
Bactéries proprement dites, et il avait eu le tort d'appliquer d'une
façon générale à toutes les bactéries un fait qu'il n'avait observé
que sur une seule espèce d'organisme, et que, d'ailleurs, il n'avait
jamais pu reproduire chez une bactérie vulgaire.

Les erreurs d'expérience, dans lesquelles Naegeliet ses parti-
sans étaient le plus souvent tombés, contribuèrent pour beau-
coup à éloigniu' les esprits de la théorie qu'ils voulaient établir.
Toutefois les idées de Cohn sortirent un peu modifiées de ces
attaques. Si la plupart des auteurs admettent aujourd'hui, en
principe, la constance de la forme enseignée par Cohn, ils recon-
naissent cependant qu'une espèce peut parfois, dans des condi-
tions données, acquérir temporairement des formes anormales

1. N.EGELi. Die niederen Pilze, etc. Munich, 1877.
± N.ïGELi. Das Mikroskop, 2^" édiliou, 1877, p. 614.

VAIUATIONS DE FORME CHEZ LES BACTERIES. 77

[Involutions-formen). Ces formes anormales s'écartent d'ailleurs
très peu d'une forme constante et définitive qui Unit toujours
par prédominer et qui sert à caractériser l'espèce. Au lieu des
quatre groupes établis primitivement, on n'en reconnaît plus
que trois : celui des microcoques, des bacilles et des spirilles.
Ces trois groupes sont du reste aussi nettement séparés les uns
des autres que l'étaient les anciens, et M. GatTky déclare textuel-
lement à ce sujet * : « II n'est personne qui puisse dire avoir vu
un spirille ou im spirochèle provenir d'un organisme de forme
bacillaire ni un bacille d'un microcoque. »

Bien que chaque bactérie soit classée d'une façon exclusive
dans l'un des trois groupes qui vienent d'être indiqués, l'exis-
tence des formes d'involution élargit forcément les limites entre
lesquelles l'espèce peut se mouvoir. Ces formes d'involution
apparaissent d'ordinaire dans les cultures âgées ou en présence
des antiseptiques; autrement dit, elles surviennent à la suite de
modifications apportées dans le milieu primitif, soit par la vie
même du microbe, soit par l'adjonction préalable de certaines
substances étrangères. Jusqu'à quel point ces changements de
forme dépendent-ils des modifications du milieu, et dans quelles
limites peuvent-ils se produire ? D'une façon plus générale, quels
sont les changements apportés dans la vie d'un microbe par les
variations du milieu? Pour aborder sérieusement ce problème,
il est de toute nécessité d'expérimenter avec des cultures dont
la pureté soit absolue. Afin d'avoir un contrôle plus facile de
cette pureté, nous avons choisi, pour faire cette étude, les
microbes colorés, qui se distinguent aisément par la coloration
qu'ils donnent à certains milieux. Nous avons d'abord étudié
parmi eux le bacille du pus bleu et nous avons montré récem-
ment " les variations que peut subir la fonction chromogène de
ce bacille sous l'intluence des changements du milieu.

Ces variations ne sont du reste pas spéciales au Bacillus
pyocijaneiis et il est facile de les reproduire avecd'autres microbes
colorés. Considérons en particulier un organisme bien connu, le
Micrococcus prodigiosus , nettement caractérisé tant par sa forme
que par sa coloration. Cohn, Schrotter, Gaflky et la plupart des

1. Milllieilaiiijen ausd. h. Ges. ami., t. f, p. 1 1(>.
•■2. Voir le n» 1 1, tome 1' de ces Annales.

78 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

auteurs le considèrent comme le type des microcoques ', et le
décrivent comme formé de cellules isolées, sphériques, mesurant
0,4 à 0,6a de diamètre. D'après Flugge, ces cellules sont mobiles
et légèrement elliptiques quand on les observe à un très fort
grossissement, ce qui leur donne l'aspect d'un très court bacté-
rium qui du reste n'atteint pas 1[-^ de long".

Cet organisme est surtout remarquable par la belle colora-
tion rouge caractéristique qu'il donne aux milieux solides sur
lesquels on le cultive d'ordinaire, pomme de terre, gélose, etc.
Avec la gélatine, qui est rapidement liquéfiée, cette coloration
n'apparaît qu'assez tardivement. La matière colorante se forme
d'abord dans les couches superficielles exposées à l'action de
l'air, et ne gagne qu'au bout d'un temps plus ou moins long les
parties profondes. Mais cette coloration, si vive et si accusée avec
les milieux solides, disparait complètement quand on cultive
l'organisme dans les liquides neutres ou alcalins qui servent
d'ordinaire à la culture des microbes. Tout au plus voit-on par-
fois un léger cercle rosé se former sur la paroi intérieure du
ballon de culture un peu au-dessus de la surface du liquide. Les
générations successives dans ces mêmes milieux restent indéfi-
niment incolores. Cette absence de coloration s'observe surtout
quand la semence originelle provient d'une culture faite pendant
de nombreuses générations sur un milieu solide.

On peut obtenir toutefois des cultures colorées dans les
liquides; il suffit pour cela de faire une ou plusieurs cultures
dans un liquide très légèrement acide. Il importe peu dans ce
cas que l'on parte d'une semence prise sur un milieu solide ou
dans l'un des liquides restés primitivement incolores. On linit
toujours par obtenir des liquides légèrement colorés en rose, et
la coloration se conserve alors quelle que soit la réaction du
liquide employé pour les cultures ultérieures. Il semble, d'après
ce qui précède, que les cultures successives faites sur les milieux
solides, en présence d'un excès d'oxygène, aient rendu les cel-
lules incapables de produire leur matière colorante dans d'autres
conditions, quand on les transporte par excmiîle dans un milieu
liquide où l'air est en moindre abondance. L'action plus ou
moins prolongée d'un acide, à dose très faible, suffit pour leur
rendre cette propriété colorante. Nous avons observé un fait

1. Voir ScHKOTEit. Knjptogamenflora von Schlesien, III, -2.

VARIATIONS DE FORME CHEZ LES BACTERIES. 79

analogue chez le bacille du pus bleu, dont la couleur est bien
plus accusée quand on le cullive en présence d'un acide. Celle
aclion des acides s'observe encore avec d'aulres microbes colo-
rés, en parliculicr avec le bacille du lait bleu. Je possède de cet
organisme une cullure sur gélose parfaitement colorée et con-
servée sur le même milieu depuis de nombreuses générations.
Ensemencé dans du lait, le bacille de cette culture s'y développe
très bien, mais sans donner la moindre trace delà coloration
bleue qui le caractérise habituellement. Il n'a pas fallu moins de
dix cultures successives dans un liquide acide pour lui rendre
dans le lait sa coloration bleue.

En s'en tenant, ])0ur le Micrococcus prodigiosus^ aux milieux
solides sur lesquels il produit 1res nettement sa matière colorante,
on peut étudier, comme nous l'avons fait pour le Bacillus pyo-
cjianeus , les variations de la fonction chromogène dans ces
milieux. L'emploi des mêmes procédés amène même plus rapi-
dement que pour ce dernier organisme l'abolition durable de
. cette fonction. Il est très facile de suivre pas à pas toutes les
phases du phénomène. Contrairement à ce qui se passe avec le
Bacille du pus bleu, la matière colorante du Micrococcus procli-
giosus ne se répand pas, dans les cultures sur gélose, en dehors
des colonies formées, qui restent seules colorées. On peut donc
toujours déterminer sans peine combien il existe, dans une cul-
lure quelconque du microcoque, de cellules capables de repro-
duire la matière colorante. Il suffit d'ensemencer un certain
nombre de ces cellules à la surface d'un peu de gélose, contenue
par exemple dans un tube à essai, et de compter le nombre des
colonies colorées qui se sont formées. On peut s'assurer ainsi
que, dans une même colonie parfaitement rouge , venue sur
pomme de terre ou sur gélose, toutes les cellules ne sont pas
aptes à reproduire des colonies colorées. Le nombre des colonies
incolores est bien plus grand quand on s'adresse à des cultures
faites dans des liquides, surtout dans des liquides alcalins. En
choisissant de préférence les colonies incolores, et en faisant
alternativement des cultures sur gélose et dans des liquides
alcalins, on arrive à avoir très rapidement des cultures qui ont
perdu d'une façon durable leur fonction chromogène, tant sur
pomme de terre que sur gélose. Comme on le voit, l'emploi des
antiseptiques n'est même pas nécessaire pour arriver à ce résultat

80 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

que nous avons déjà obtenu précédemment avec le Bacillus pijo-
cyaneus. Tout ce que nous venons de dire n'est d'ailleurs que la
confirmation des faits que nous avons rencontrés chez ce der-
nier organisme.

M. Schotlelius est arrivé naguère à obtenir des cultures in-
colores avec le Micrococciis prodigiosus. Il a employé pour cela
des cultures successives longtemps prolongées à 37'^ sur la
pomme de terre. Nous venons de voir qu'on peut les obtenir
beaucoup plus rapidement avec des milieux liquides : on peut
alors rester à des températures inférieures à 37°, qui conviennent
beaucoup mieux à la vie du microbe.

Comme la plupart des Bactéries, le M. prodigiosus possède
des formes d'invokition. Ces formes anormales se produisent
souvent dans les cultures âgées, sur pomme de terre par exemple.
Quelques cellules grossissent beaucoup, se renflent tout en
restant sphériques,^ et atteignent alors de 1 à 2 [Jt. de diamètre,
ou bien s'allongent et prennent soit l'aspect de gros bâtonnets
soit l'aspect de levures, d'après l'expression de M. Schottelius
qui les a décrites'. Mais les cultures récentes, tant sur les milieux
solides que dans les liquides neutres et alcalins, ne présentent
que la forme sphérique ou elliptique qui sert d'ordinaire à carac-
tériser cet organisme.

Mais on peut aisément obtenir d'emblée des formes s'écar-
tant très notablement des formes normales; l'emploi des milieux
antiseptisés conduit rapidement à ce résultat et nous retrou-
verons ici les changements morphologiques que nous avons
déjà signalés avec le bacille du pus bleu ^

1. Dans ses Recherches biologiques sur le M. prodigiosus (Leipzig 1887),
M. Schottelius compare un instant cet organisme aux levures et déclare (p. 8)
que « soa pouvoir de transformer le sucre en alcool et acide carbonique est vrai-
ment considérable ». 11 ne m'a pas été possible de vérifier ce pouvoir ferment
avec l'organisme que j'ai étudié; je n'ai jamais pu constater la moindre trace
d'alcool dans les liquides sucrés où il avait vécu soit en présence du glucose
soit en présence du saccharose. Ce serait, je crois, la première bactérie connue
qui donnât avec le glucose une vraie fermentation alcoolique comparable à celle
de la levure de bière. Du reste le microcoque que j'ai étudié ne donnait pas d'in-
vertine avec le saccharose.

!2. MM. Guignard et Charrin ont signale chez le Bacille du pus bleu {Comptes
rendus, 12 décembre 1887) ces changements de forme se produisant sous l'inlluence
du napbtol, de l'acide borique et du bichromate de potasse, pour des doses déter-
minées de ces substances. Comme nous l'avons déjà fait remarquer dans notre
étude sur le Bacillus pyocyancHS, ces variations de forme peuvent être obtenues non

VARIATIONS DE FORME CHEZ LES BACTERIES. 81

Prenons, par exemple, du bouillon de veau auquel on a
ajouté une quantité d'acide tartrique relativement considérable
pour le M. prodiç/iosus, une dose de 4 à 5 décii^rammes d'acide
par litre. Ensemençons-le avec une trace d'une culture prove-
nant d'une colonie bien colorée sur gélose. Au lieu de se faire
en abondance dans les 24 heures, le développement est alors
retardé de3 à 5 jours, et, quand il s'est produit, l'examen micros-
copique montre un changement très considérable dans la forme
des cellules. Au lieu des microcoques isolés et sphériques, on
ne trouve plus que des bâtonnets de grandeur très diverse. Les
uns sont isolés, épais et ont de 2 à S [a de long; le plus sou-
vent ils sont réunis en un filament qui peut être composé de 2 à
20 articles et davantage, séparés les uns des autres par un
espace clair du à la présence d'une matière gélatineuse qui
entoure abondamment chacun des bacilles ; ailleurs cette matière
gélatineuse disparaît presque complètement, et les bacilles
s'allongent beaucoup de manière à se toucher et même à former
un très long filament continu qui s'enroule plusieurs fois sur
lui-même. Toutes les formes de passage existent entre ce fila-
ment très allongé et le bacille court isolé.

Les bacilles sont presque toujours mobiles, qu'ils soient isolés
ou réunis, et il n'est pas rare de voir un filament de 30 à 40 [x
de long traverser avec de lentes ondulations le champ du mi-
croscope. Quand les filaments sont composés d'articles séparés,
ces mouvements leur donnent souvent l'aspect de spirilles. Ces
différentes formes ne s'observent bien qu'au début du dévelop-
pement, et dès le second ou le troisième jour les longs filaments
disparaissent peu à peu. Les articles bacillaires se raccourcissent
jusqu'à prendre la forme sphérique, et, quand ils restent réunis,
l'on obtient la forme décrite sous le nom de Staphylocoque.
Bientôt les articles se séparent et l'on revient à la forme micro-

seulenient avec les substances que nous venons d'indiquer, mais avec un très grand
nombre d'antiseptiques. D'une façon générale il existe toujours, pour un antisep-
tique donné, une dose inférieure à la dose toxique et capable de produire des varia-
tions morphologiques. Mais comme la dose toxique varie, nous l'avons vu, pour
chaque antiseptique, avec la qualité de la semence employée, il en est de même
de la dose qui amène les changements de forme dont nous parlons. De plus ces
cliangements morphologiques sont tout ù fait transitoires, et, quand on abandonne
la culture à elle-même, la forme primitive ne tarde pas à prédominer de nou-
veau.

82 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

coque proprement dite, qui semble être ainsi la forme définitive
de l'organisme. A ce moment la réaction du liquide varie et,
probablement par suite de la formation de sels ammoniacaux
dus à la vie du microbe, le liquide cesse d'être acide et devient
même légèrement alcalin.

Qn'arriverait-il si le développement se faisait dans un milieu
qui resterait constamment acide? Pour obtenir ce résultat, au
lieu d'abandonner la culture à elle-même , prélevons-en une
semence dès le premier ou le second jour du développement, et
portons-en une quantité très petite dans un second milieu acide
identique au premier. Renouvelons ensuite ces ensemencements
dans les mêmes conditions, pendant un grand nombre de géné-
rations, de manière que le milieu de culture reste continuelle-
ment acide. En prenant ces précautions, on ne tarde pas à voir
que les formes filamenteuses sont de plus en plus nombreuses à
mesure que les cultures se continuent, et que ces formes per-
sistent plus longtemps. 11 arrive enfin un moment où elles ne
disparaissent plus, même quand la culture est abandonnée à elle-
même et que le milieu a perdu sa réaction acide. On n'a plus
alors que des formes nettement bacillaires qui se conservent in-
définiment et ne se transforment plus en microcoques. Voici
donc un moyen de fixer, dans un milieu donné, une forme
dillerenle delà forme considérée comme normale; les microco-
ques ont fait place à des bacilles et à des filaments. En parlant
d'une colonie rouge sur gélose, il m'a fallu quinze générations
successives pour arriver à ce résultat ; il n'est pas douteux qu'en
continuant les cultures -dans les mêmes conditions, je n'arrive à
faire prédominer les long-s filaments enroulés et à faire disparaître
même les bacilles courts.

Au lieu de conserver les milieux acides, revenons aux bouil-
lons alcalins : le retour à la forme primitive est alors beaucoup
plus rapide et beaucoup plus persistant. Cela n'a rien d'étonnant
si on réfléchit que les milieux acides, qui conviennent mal à la
\ie du microbe, ne sont guère employés, et que toutes les cul-
tures sont faites et conservées dans les laboratoires pendant de
très nombreuses générations sur la gélatine ou sur la gélose,
c'est-à-dire sur des milieux alcalins. Le microbe a donc pris
dans ces milieux une forme spéciale, qui s'y conserve indéfini-
ment même quand on modifie le milieu, que l'on change diffici-

VAUIATlOiNS DE FORME CHEZ LES BACTERIES. ,S3

lement d'une façon durable, et qui réapparaît avec la plus grande
facilité, surtout quand on retourne aux milieux alcalins où le
microbe apris l'habilude de vivre. Toutefois, le changement de
forme dans les milieux alcalins n'est pas absolument impossible,
et, après quinze cultures dans un milieu acide, le retour dans
le bouillon alcalin a reproduit d'une façon persistante, sinon la
forme filamenteuse, du moins la forme bacillaire. Je dois dire
cependant que dans ces conditions, les microcoques n'ont pas
encore complètement disparu, et il faudra sans doute prolonger
les cultures dans les milieux acides pour que les bacilles exis-
tent seuls dans les liquides alcalins.

On aura pu remarquer tout à l'heure que les microcoques ne
reparaissent plus dans un milieu d'abord acide, même quand
l'acidité a disparu. Ce fait est en apparence contradictoire avec
ce que nous venons de dire sur le retour h la forme primitive
dans les milieux alcalins. En réalité il n'y a pas contradiction,
car il faut évidemment distini:uer entre un bouillon rendu alcalin
avant la culture et celui qui doit son alcalinité aux bases sécré-
tées par le microbe.

Nous n'envisagerons pas pour le moment les variations mor-
phologiques subies par le microbe sous l'influence d'autres subs-
tances que les a^^ides. Nous avons voulu montrer surtout, dans
cette étude, que ces variations peuvent se produire à la suite
de modifications qui se rencontrent chaque jour dans la nature
et qui se traduisent simplement par la réaction acide ou alcaline
du milieu. Le Mirrococcus prodigiosus se prête merveilleusement
à cette démonstration.

Il est donc permis dépenser que les modilicalions du milieu
font varier d'une façon durable la forme aussi bien que la fonc-
tion d'un microbe. Mais pour que ces conclusions puissent être
un jour généralisées, il faut les établir pour le plus grand
nombre d'organismes possible. J'ai pu obtenir des résultats ana-
logues avec d'autres microbes colorés, tels que le bacille du lait
bleu, le bacille violet, les deux bacilles verts de l'eau, etc. Mais si
les conclusions sont identiques, les procédés varient avec chaque
espèce d'organisme et ils doivent être étudiés à part. C'est ce que
j'espère pouvoir faire prochainement.

REVUES ET ANALYSES

GVRGINOME ET SARCOME-

REVUE CRITIQUE.

Rapin. Recherches sur l'étiologie des lu meurs malignes, Nantes, 1887. —
Ballance et Shattock. Rapport sur des expériences de culture avec les
tumeurs malignes, Brit. med. Journal, n» 1,400, 4887. — Scheurlen.
Sur l'étiologie du carcinome, et Schill, Communication sur le même
sujet, séance du 28 novembre de la Société de médecine de Berlin, et
Deutsche med. Wochens., 1887, p. 1033. — Francke. Sur l'étiologie et
la diagnose du sarcome et du carcinome, Munck. med. Wochens., 1888,
p. 57.

Nous n'avons pas encore parlé des travaux récents sur le cancer par
embarras de savoir qu'en penser et qu'en dire. Nous aurions voulu pouvoir
applaudir des deux mains à la découverte de M. Scheurlen. Il est si
agréable d'acquérir la certitude d'un fait nouveau! Il est si ennuyeux, et
parfois si difficile, d'avoir à se défendre contre le doute !

Or, dans cette question, le doute exigeait impérieusement qu'on lui fît
une place. Est-ce la difficulté du sujet? est-ce une coïncidence fortuite? tous
les travaux mentionnés en tête de cet article traduisent une certaine indé-
cision et quelques-uns une certaine inexpérience chez leurs auteurs. Aucun
n'est un de ces travaux de maître qui, surmontant avec bonheur les difficul-
tés, dédaignant les points secondaires, ne faisant naître une objection que
pour la résoudre, vont droit au but en y entraînant le lecteur. La courte
revue que nous allons en faire montrera, qu'après eux, l'hésitation est encore
plus commandée que permise.

Je passe rapidement sur le travail de M. Rappin, qui, mal servi par sa
méthode expérimentale, trouve des microbes non seulement dans les tissus
carcinomateux, mais encore dans les tissus normaux, et qui, entraîné par
de fausses idées théoriques qui procèdent à la fois de celles de Béchamp et
de NcBgeli, aime mieux croire à la création du microbe par la maladie
qu'à celle de la maladie par le microbe. Voilà longtemps que celte idée
fait son stage; nous ne voyons pas qu'elle l'ait encore terminé.

C'est aussi un peu d'inexpérience qu'on peut relever dans le travail de
MM. Ballance et Shattock, mais d'inexpérience méfiante d'elle-même, et qui
cherche à se contrôler. Ces savants ont ensemencé dans des milieux formés
de gélatine nutritive, de gélose et de sérum de sang coagulé, des fragments
de tissus provenant de 22 cas de carcinome, 1 de sarcome, 3 de lipome et

REVUES ET ANALYSES. 85

ol i do niyxomo, et mis on œiivro aussitôt apros ropi'ratioa chirurgicale.
Avec un premier couteau stérilisé, on enlevait la surface; avec un second
couteau, on faisait une incision; avec un troisième, un (juatrième, etc., quel-
quefois un sixième couteau flambé, on finissait par arracher un fragment
qu'on ensemençait et qu'on portait à l'étuve. C'était beaucoup de petits cou-
teaux, et l'opération devait être assez longue, assez périlleuse par suite, au
point de vue de l'introduction des germes étrangers. Mais ce qu'il y a d'es-
sentiel, c'est qu'au fur et à mesure que MM. Ballance et Shaltock s'y per-
fectionnaient et la rendaient plus courte, ils voyaient augmenter la pro-
portion des ensemencements qui restaient stériles. Ceux qui devenaient
féconds ne présentaient d'ailleurs rien de caractéristique, et semblaient
avoir été peuplés par le hasard. Ce qui prouve que tel était le cas, c'est
qu'en recommençant, comme contrôle, les mêmes expériences avec des
tissus sains, on retrouvait exactement les mêmes résultats. Il fallait donc
ajouter plus d'importance aux ensemencements restés stériles qu'aux autres,
et finalement, MM. Ballance et Shatthock ont pu montrer, à la séance du
17 mai 1887 de la Société pathologique de Londres, S8 fragments de tu-
meurs, dont 39 de carcinome, 8 de lipome, 6 de sarcome et 5 de myxome,
restés stériles après un séjour d'un mois à l'étuve, suivi pour quelques-uns
de plusieurs mois de conservation.

Il est certain que cette expérience est loin d'être favorable .à l'idée d'un
microbe habitant les tissus cancéreux, et pourtant, des faits nombreux
semblent prouver que le cancer est dû à un contage vivant. La science n'a
pas enregistré, il est vrai, de cas bien net d'infection d'un individu par un
autre, mais il existe des cas d'auto-infection assez nombreux. M. Scheurlen
cite un exemple dans lequel la ponction d'un liquide ascitique d'un cancer
du péritoine a amené l'infection carcinomateuse de la plaie opératoire, et
un autre dans lequel un cancer de la lèvre inférieure provoqua, au bout de
quelques jours, l'apparition d'un autre carcinome sur la lèvre supérieure,
en face du premier. Les recherches de Langenbeek (1840), suivies de celles
de Follin, Lebert, 0. Weber et Goujon et autres savants, témoignent d'ail-
leurs que si l'inoculation du tissu cancéreux à un animal ne réussit pas
toujours, elle est quelquefois possible.

On est donc fondé à rechercher l'agent de cette transmission, et c'est
dans cette foi que Scheurlen a commencé ses recherches, qui ont consisté à
la fois en études microscopiques et en tentatives de culture et d'inoculation.
Examinons- les séparément.

Dans une préparation non colorée de suc cancéreux délayé dans de l'eau
ou dans une solution de chlorure de sodium, on voit çà et là « des corpus-
cules à reflet verdàtre, animés de mouvements faibles, mais nettement
perceptibles ». Ces formes sont « tellement caractéristiques qu'elles ne
peuvent pas être confondues avec autre chose ». Cep_endant les gouttelettes
adipeuses peuvent leur ressembler beaucoup. Ces spores sont rarement iso-
lées. Elles sont souvent en amas, comme si elles avaient toutes été con-
tenues dans une cellule qui aurait disparu. Quelquefois cependant, mais
rarement, on les voit encore renfermées à l'intérieur des cellules.

'< J'ai trouvé, continue M. Scheurlen, ces spores au moins dans un tiers

8G ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

de mes observations microscopiques. J'ai peu recherché les bacilles. Cepen-
dant je les ai trouves huit fois sur dix en employant la méthode de colo
ration de Gram. »

K Jusqu'à présent je n'ai pas réussi à constater d'une façon sûre la pré-
sence des bacilles et des spores sur les coupes du tissu durci ; mes recherches
n'ont été faites que sur de la matière étalée sur le couvre-objet. »

Voilà déjà de quoi surprendre et donner carrière à l'esprit de doute, pour
pou qu'il soit éveillé. Des spores en mouvement! Des spores qu'on réussit
aussi bien à distinguer de toutes les granulations environnantes dans des
préparations non colorées! Tant de spores et de bacilles dans le suc, et si
peu sur les coupes! Tout cela est certainement possible. Aucune de ces cir-
constances n'est par elle-même invraisemblable, mais on est surpris de voir
tant de faits exceptionnels sur un si étroit espace, et cela dans un mémoire
évidemment un peu hâtif. Voyons maintenant ce que donnent les expé-
riences d'ensemencement.

Gomme milieu, M. Seheurlen se sert d'une sérosité pleurétique ou asci-
tiquc obtenue par une ponction; on la stérilise pendant 5 jours par le pro-
cédé Tyndall, et on finit par la coaguler par l'action d'une température
convenable, qu'on ne peut pas indiquer à l'avance, car elle varie suivant la
nature du liquide. On désinfecte alors au sublimé le néoplasme encore
entouré de son tissu adipeux; on y fait une première coupe avec un couteau
flambé, une deuxième coupe, perpendiculaire à la première, avec un second
couteau, et sur cette seconde surface, on prélève, à l'aide d'un fil de pla-
tine stérilisé, une gouttelette de suc qu'on porte sur le milieu nourricier. On
garde à l'étuve à 39".

« Dès le troisième jour, on voit la surface du se'rum recouverte d'une
pellicule incolore, qui se plisse peu à peu et prend une teinte jaune bru-
nâtre après quelques jours ou quelques semaines... La multiplication des
colonies se fait uniquement en surface... Avec chaque carcinome et chaque
ganglion cancéreux, j'ai toujours fait au moins 20 inoculations semblables.
Il y en a toujours eu au moins 7 (souvent plus, mais rarement toutes) qui
m'ont donné un résultat. Les autres inoculations restaient stériles. Jamais
je n'ai eu de cultures impures. »

Il faut féliciter M. Seheurlen de ce dernier résultat, qui témoigne de
son habileté opératoire. Mais l'élimination des chances d'erreur ainsi faite,
il n'en devient que plus embarrassant do répondre à deux questions con-
tradictoires qui se posent devant l'esprit à la lecture de ce qui précède.
Pourquoi tant d'insuccès? Pourquoi tant de succès?

Pourquoi tant d'insuccès, lorsqu'on voit si souvent dans le suc cancéreux
les spores, pourtant si difficiles à découvrir, lorsqu'il y a des bacilles au moins
« huit fois sur dix dans ce suc »? Pourquoi tant de succès, se demande-
t-on d'un autre côté, quand on se rappelle les nombreux insuccès de
MM. Ballance et Shattock? Les milieux, peut-on dire, ne sont pas les
mômes. Mais le bacille du cancer semble être très peu difficile pour ses
besoins nutritifs. MM. Ballance et Shattock ont, nous l'avons dit, opéré sur
la gélatine nutritive, sur la gélose et sur le sérum du sang. Le bacille du
cancer se développe péniblement, il est vrai, sur la gélatine qu'il ne liquéfie

REVUES ET ANALYSES. 87

pas, et sur laquelle il produit, dps pxcavatinns en enfonnoir recouvertes
d'une pellicule ridée; mais enfin, il s'y développe. Il peut aussi se déve-
lopper sur la gélose, avec laquelle des inoculations de tissu cancéreux n'ont
réussi à 31. Scheurlen que 6 fois sur 70, mais qui nourrit très bien les
scuiences provenant d'une culture pure. Le bacille du cancer peut aussi
vivre sur la pomme terre, dans le bouillon de viande et uième dans le
bouillon de choux. Un être qui s'accommode de milieux si divers n'est pas
difficile sur son terrain de culture; et nous en revenons à la question
ci-dessus : Pourquoi MiM. Ballance et Shattock l'ont-ils si rarement ren-
contrés? pourquoi M. Srlipurlen ne le rencontre-t-il pas toujours?

Glii'rclions uiaintenant du côté des propriétés biologiqu(>s du bacill(\
Le premier point à y relever est son développement superficiel, en rapport
certain avec son caractère aérobie. Ce caractère, remarquons-le en passant,
ne s'accorde guère, au moins à première vue, avec le cheminement dans
les profondeurs d'une maladie aussi nettement spécifique.

Les autres propriétés sont de celles qu'il faut se contenter d'enregistrer
soigneusement. « En examinant avec un fort grossissement une pellicule
non colorée d'une culture, on y remarque, à côté de bacilles courts et
larges (longueur 1,5 à 2,5 (x, largeur 0,5 \>-), qui frappent peu les yeux de
l'observateur, d'autres formes (les spores) presque aussi longues, mais
ovoïdes, très brillantes et à reflet verdâtre, qui possèdent une mobilité très
nette. Sont-ce là des mouvements spontanés ou moléculaires? C'est une
question que je ne puis résoudre. »

« Les bacilles semblent aussi aniuiés d'un mouvement autour de leur
centre, analogue au mouvement du fléau d'une balance qui oscillerait dans
toutes les directions. Le mouvement des spores est oscillatoire et rota-
toire. »

« Les bacilles se laissent colorer par presque tous les procédés. Par la
méthode de Graui, l'alcool les décolore presque instantanément, et ne
laisse de couleur qu'à leurs extrémités. Les spores se colorent par le pro-
cédé d'Ehrlich, après un séjour d'une demi-heure ou 1 heure dans une
solution d'aniline-fuchsine bouillante ; après quoi il faut décolorer pendant
•l à 3 heures par l'acide nitrique et laver à grande eau. Leur coloration
n'est pas uniforme. Les unes se colorent fortement et sont très brillantes,
d'autres restent moins colorées et sont ternes. Toutes ont les mêmes di-
mensions (1,5 [t sur 0,8 [>.)... Sur la gélose, la pellicule est d'abord formée
uniquement de bacilles. La formation des spores commence après 12 heures,
et, après 24, les spores libres se substituent de plus en plus aux bacilles. »

Couime l'a fait o])server avec raison M. A. Fraenkel dans la discussion
qui a Suivi la présentation de la note de M. Scheurlen à la Socie'té de méde-
cine interne de Berlin, une évolution aussi rapide du bacille et de la spore
jure un peu avec la marche lente et chronique du cancer. Mais toutes ces
objections sont assez caduques et tomberaient d'une pièce devant un succès
authentique de l'inoculation du bacille et une reproduction du cancer à
son aide. M. Scheurlen a fait sur ce sujet quelques expériences. Voyons ce
qu'il en dit.

« J'ai inoculé 6 chiennes, dont 4 vivent encore et 2 ont été tuées pour

88 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

l'examen analomo-pathologique. L'inoculation a été faite en injectant dans
la glande niaiii maire de l'arrière 3 divisions de la seringue de Pravaz,
chargée d'une émulsion de culture pure sur la gélose ou la pomme de terre.
La culture avait 3 ou 4 jours. »

« 44 jours après cette injection, il s'était formé une tumeur de consis-
tance molle, mal limitée, atteignant environ le volume d'une noix, et dimi-
nuant ensuite jusqu'à celui d'une noisette ou d'un haricot. On ne pouvait
savoir si cette tumeur provenait d'un ganglion lymphatique ou du tissu de
la glande elle-même.

« L'examen microscopique montra une abondante prolifération cellu-
laire. Les cellules étaient augmentées de volume et fortement granuleuses.
Par places, elles méritaient certainement le nom de cellules épithélioïdes,
et contenaient des spores brillantes comme celles des tumeurs carcinoma-
teuses. On y a décelé des bacilles au microscope et au moyen des cul-
tures. »

Cette description est un peu vague. Les variations de volume de la tu-
meur ne concordent pas avec ce qu'on sait de la marche progressivement
envahissante des tumeurs cancéreuses. Les caractères présentés au micros-
cope par les cellules de la tumeur n'ont aussi rien de spécifique. Mais ce sont
des questions à juger sur pièces. Il faut attendre que M. Scheurlen publie
son mémoire in extenso, et surtout qu'il ait fait l'examen des tumeurs
provoquées sur les 4 chiennes qu'il a conservées pour les étudier en temps
opportun.

Si je ne me trompe, l'impression générale soulevée par ce travail dans
le monde savant a été celle du doute; mais, comme je le disais en com-
mençant, d'un doute bienveillant, et qui ne demande qu'à s'avouer vaincu.
Les conclusions de M. Scheurlen ont, du reste, rencontré quelques confirma-
tions précieuses. Dans la séance qui a suivi la présentation de la note de
M. Scheurlen, M. Schild a annoncé avoir trouvé depuis longtemps, dans une
tumeur carcinomateuse, des bacilles à deux pôles colorés, une fois et demie
à deux fois plus épais que les bacilles de la tuberculose, et dont la diffé-
rence d'aspect avec celui de M. Scheurlen tient peut-être à des différences
dans les méthodes de coloration. De son côté, M. Cari Francke a trouvé,
dans l'étude de neuf cas de carcinome, des résultats presque identiques à
ceux de M. Scheurlen au sujet du bacille, de ses conditions de culture et
de ses spores. Il a réussi de plus à trouver dans les coupes de tissus cancé-
reux les spores, et même des bacilles en longs fils, à la condition de colorer
par la méthode de Orth des coupes faites sur la limite de la tumeur. Toutes
ces conclusions sont pleines de promesses qu'il faut souhaiter de voir
bientôt transformer en réalité. Mais nous n'en sommes pas encore là.

M. Schill a aussi étudié plusieurs cas de sarcome, et y a trouvé des
bacilles très semblables à ceux des carcinomes, mais beaucoup plus petits.
M. Francke, qui a fait la même constatation, donne des indications plus
précises. Les bacilles du sarcome ont 3 à 4 [j, de long sur 0,4 [x de large.
Les spores du carcinome ont 1,2 [a sur 0,6 [x, celles du sarcome 1,5 (a sur
0,8 (X. En cultures, le bacille du sarcome se comporte comme l'autre et vit
sur les mêmes milieux. Il prospère comme lui sur les milieux acides et y

REVUES ET ANALYSES. 89

forme un pii^nient rouge brun. Ces deux bacilles peuven , lorsifu'ils sont

cultivés sur dos milieux pas trop solides à la température du corps, donner

tous deux, surtout celui du sarcome, des iilaments longs qui ressemblent

si bien à des mycéliums de champignons, que M. Schill, aussi bien que

M. Francke, semblent disposés à en faire une moisissure. Mais aucun d"eux

n'apporte d'argument bien démonstratif im faveur de cette opinion, pas plus

du reste qu'en faveur de la spécificité du microbe. L'inoculation est restée

sans résultat entre les mains de M. Francke, qui, résume son travail

dans cette proposition prudente : « Ce bacille est vraisemblablement la cause

de la maladie. » Mais, en science, le vraisemblable n'est pas toujours vrai,

et le vrai n'est pas toujours vraisemblable.

Dx.

G. Bordoni-Uffrrduzzi. Sur la culture des bacilles de la lèpre. Zeitschr.

f. Hyg., t. III, 1887.

Depuis les travaux de Hansen, on ne conteste plus guère le caractère
spécifique du bacille découvert par ce savant dans les tissus lépreux. Sur
ces questions de maladies microbiennes, les convictions sont aujourd'hui
beaucoup moins rebelles qu'elles ne l'étaient il y a quelques années. Du
reste, pour la lèpre, l'ensemble de preuves nécessaires pour la conviction se
trouve aujourd'hui à peu près établi. Après la découverte de Hansen, on
peut citer en effet les recherches de Melcher et Ortmann *, qui en inoculant
des fragments de nodules lépreux dans la chambre antérieure de l'œil d'un
lapin, ont réussi à amener dans tout le corps de l'animal des néoformations
pathologiques très accentuées. La lèpre et la tuberculose étant souvent mé-
langées sur le même individu, et leurs lésions étant même très difficiles
quelquefois à distinguer les unes des autres, on a dit que ces ncoformations
étaient de nature tuberculeuse, non lépreuse. Mais les préparations de
MM. Melcher et Ortmann ont été étudiées avec soin au laboratoire de
31. Koch, et classées, il semble, définitivement comme lèpre.

En dehors des cas de contagion lépreuse, la science possède, d'ailleurs, un
autre cas d'inoculation involontaire, mais très probant malgré cela 2. Dans
une île intertropicale, oîi la lèpre est à l'état endémique, un médecin avait
vacciné son fils avec le virus venant d'un vaccinifère, nouveau-né d'une
famille de lépreux, et chez lequel la lèpre s'était déclarée après la vaccina-
tion, puis, se servant de son fils comme vaccinifère, il avait vacciné un autre
enfant. Le fils du médecin, examiné à plusieurs reprises pendant son ado-
lescence et jusqu'à la fin de ses études, était incontestablement affecté de
lèpre, mais d'une lèpre bénigne, se traduisant seulement par des décolora-
tions de la peau, des cicatrices et une large plaque anesthésique sur un
membre. L'autre enfant, vacciné avec celui-ci, eut au contraire une lèpre

1. Lèpre expérimentale chez les lapins. Berl. Klin. Wochens, 1886.

2. Df Gairdner. La lèpre est-elle communicable par la vaccination? Brit. med.
journ., juin 1887, p. 1:269.

90 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

mutilante qui le fit périr jeune. A ces notions, sur le caractère inoculable
de la lèpre, M. Bordoni-Ufîreduzzi vient ajouter celle-ci. Le bacille est culti-
vable en dehors de l'organisme. Cela ne complète pas absolument la démons-
tration, car il faudrait pouvoir reproduire et réinoculer la maladie, non pas
avec la lèpre initiale, mais avec le produit des cultures du bacille lépreux.
C'est là un dernier progrès que M. Bordoni-UtTreduzzi n'a pas encore
réalisé. Mais il n'en faut pas moins lui savoir gré d'avoir réussi là où
d'autres avaient échoué, dans la culture artificielle du bacille.

Hansen ' avait vu ses cultures sur un porte-objet, dans une goutte de
sérum gélalinisé, être envahies par des microbes étrangers. Neisser avait
exposé un tubercule lépreux dans un milieu nutritif, à la température de
37 à 38" pendant trois semaines, et n'y avait constaté, au bout de cet inter-
valle, qu'un gonflement avec apparition autour du tubercule, qui était gros
comme un grain de millet, d'une couche mince dans laquelle il était difficile
de démêler ce qui provenait de la croissance des bacilles et ce qui provenait
du gonflement du tissu.

De ces tentatives avortées, on pouvait conclure que le bacille de la lèpre
était difficile à cultiver. M. Bordoni-UfTreduzzi y a pourtant réussi du pre-
mier coup, en ensemençant, dans du sérum additionné de gélatine et dépep-
tone et maintenu à 33-35», de la moelle d'un os de lépreux. Il a essayé ce tissu
parce qu'il y avait trouvé au microscope, en outre des bacilles contenus dans
les cellules lépreuses, une certaine quantité de bacilles libres. Leur culture
est lente. Ils finissent par former sur lo milieu solide des colonies linéaires
à contours irréguliers, d'aspect cireux, colorées faiblement en jaune, se
liquéfiant par le sérum. Sur la gélose glycérinée, si l'ensencement est médio-
cre, on obtient des colonies isolées, très lentement confluentes, apparaissant
au microscope, à un grossissement de 80 à 100 fois, comme des taches rondes,
à bords dentelés, plus épaisses en leur centre. Le développement est beau-
coup plus pénible sur le sérum normal ou la gélose ordinaire. Il est impos-
sible sur la gélatine, la pomme de terre ou le bouillon.

Les bacilles des cultures ont los mêmes caractères que dans la moelle. Co-
lorés avec la fuchsine ou le violet de gentiane et l'eau d'aniline, décolorés
ensuite par l'alcool, ils se présentent sous la forme defilsrectilignes ou courbés
ayant de 1 à 3 ou 6 [j. de longueur, les uns du même diamètre en tous leurs
points, la plupart avec un renflement aux extrémités. Ils sont tous immo-
biles; ils sont aussi tous entourés d'une enveloppe dont les bords restent un
peu colorés lorsqu'on n'a pas laissé agir l'alcool trop longtemps, et qui reste
incolore quand on emploie la méthode de Koch-Ehrlich. Cette enveloppe est
assez singulière, elle enferme quelquefois des bacilles isolés, mais le plus
souvent, elle entoure des amas de bacilles d'un contour assez régulier pour
donner au tout l'aspect d'une cellule lépreuse.

Par quelques-unes de leurs propriétés, ces bacilles se rapprochent des ba
cilles de la tuberculose, mais ils s'en éloignent par d'autres, et, à raison de
l'affinité des deux maladies, M. Bordoni-Uffreduzzi s'est attaché à bien
mettre en évidence leurs caractères différentiels.

i. Virchow's Archio, 1882, t. XC.

REVUES ET ANALYSES. 91

C'est d'abord le iMMifiiMuon. dos e.xtn'inites du bacille lépreux, que l'on
trouve dans les cultures, et aussi, mais un peu moins prononcé, dans les
bacilles des tissus ; ces bacilles renflés sont le plus souvent libres et son'
surtout abondants dans la moelle. Les bacilles de la tuberculose ont au
contraire leurs extrémités arrondies, mais non renflées.

Ce sont ensuite des difTérences à la coloration. La méthode de Baumgar-
ten, qui permet une diflerenciation entre les cellules tuberculeuses et les
cellules lépreuses des tissus, donne des résultats beaucoup moins nets
pour la comparaison des deux bacilles en culture. La meilleure méthode est
celle qui a été proposée par Neisser. En traitant par des solutions aqueuses
et alcalines de bleu de méthylène, les bacilles lépreux restent incolores, tan-
dis que les bacilles de la tuberculose se colorent nettement après 24 heures.

Il est curieux de voir la méthode de Baumgarten réussir dans le cas des
tissus, échouer dans le cas des bacilles. M. Bordoni-Uffreduzzi a raison d'en
conclure la non spécificité d'une méthode déterminée de coloration pour
un microbe déterminé. C'est une idée que nous avons déjà émise dans ces
Annales. Tout phénomène de coloration dépend d'un phénomène de mor-
dançage, qui lui-même est lié aux conditions de composition de milieu.

Il y a un autre point sur lequel nous sommes tout à fait d'accord avec
M. Bordoni-UfTredezzi. C'est au sujet des espaces alternativement clairs et
obscurs qu'un assez fort grossissement permet de relever chez le bacille
lépreux de même que chez d'autres bacilles. Les uns font de ces espaces
clairs de véritables spores, uniquement parce que, comme les spores, ils ne
prennent pas la couleur dans les procédés de coloration. D'autres, un peu
moins affirmatifs, mais se laissant aussi entraîner par les apparences, par
l'aspect brillant que ces espaces clairs doivent à leur encadrement entre
deux espaces noirs, en font des productions mal définies qu'ils appellent
pseudospores. Nous n'y voyons, pour notre part, que des condensations ou
concrétions protoplasmiques analogues à celles qui se produisent dans une
cellule de levure qui vieillit dans son milieu de culture Je laisse de côté
les dislocations protoplasmiques qu'amène quelquefois le procédé de colo-
ration, auquel on attribue alors le mérite de révéler une structure
méconnue, alors qu'il ne révèle que celle qu'il a produite lui-même. Je ne
parle que de ces granulations qu'on observe quelquefois, sur les bacilles dans
leur milieu naturel ou artificiel. Elles traduisent toujours de mauvaises
conditions d'existence, et si M. Bordoni-Utîreduzzi les relève sur les bacilles
de ses cultures, dans les premiers jours du développement, c'est que le milieu
qu'il leur a donné n'est pas à tous égards le plus favorable.

Cette infériorité du milieu de culture se révèle par une autre particula-
rité, l'impossibilité où a été M. Bordoni-UfTreduzzi de donner au moyen de
ces cultures la lèpre à des animaux, lapins, cobayes et souris, quelle qu'ait
été la variété des procédés d'inoculation mis en œuvre, inoculation sous-cu-
tanée, intraveineuse, abdominale ou intraoculaire. Il y avaitune diminution
de virulence qui, jusqu'ici, dans tous les exemples connus, coïncide avec une
infériorité dans les conditions de culture.

D'ailleurs cette infériorité se traduit aussi autrement, par l'impossibilité
défaire une série indéfinie de cultures successives. Au lieu de ce fait général,

92 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

M. Bordoni-Uffrediizzi a rencontré un fait particulier fort curieux, s'il n'y a
pas eu de cause d'erreur, c'est un changement dans les propriétés biologiques
du bacille lépreux, qui lui permet de se développer plus rapidement et plus
abondamment dans les milieux solides, et à des températures inférieures à
celles qu'il exigeait à l'origine.

Tandis qu'à sa sortie des tissus, il ne pousse pas à 22 ou 24", M. Bordoni
UnVeduz/.i l'a vu se développer à la température de 20 à 2Yt'^, dans de la
gélatine glycérinée, et même dans la gélose ou le sérum ordinaires, dont il
ne se contentait pas au début.

Pour expliquer ces faits, sur lesquels d'ailleurs il n'insiste guère, M.Bor-
doni-Uffreduzzi fait intervenir des notions très répandues, paraît-il, en Alle-
magne, et très bien résumées, tout récemment, dans une conférence de
M. llueppe • sur laquelle nous reviendrons. C'est l'établissement d'une dif-
férence entre la vie saprophytique d'une espèce pathogène, et sa vie à l'in-
térieur des tissus. L'habitude que nous avons en France des cultures en
milieux liquides, la comparaison que ce mode de culture a si souvent permise
dans nos laboratoires entre les propriétés du bacille charbonneux, du
vibrion septique, du microbe du choléra des poules cultivés à l'intérieur et
à l'extérieur des tissus, qui sait? peut-être aussi un goût un peu moins vif
qu'en Allemagne pour les dicholomisations et les distinctions d'ordre surtout
pédagogique, toutes ces raisons nous empêchent d'accorder beaucoup d'im-
portance à ces notions. Nous croyons qu'on ne gagne rien à séparer la bio-
logie saprogène d'un microbe de sa biologie pathogène, et c'est dans la bio-
logie générale des infiniment petits qu'il faudra ouvrir un nouveau chapitre,
si les changements de propriétés relevés dans celui du bacille de la lèpre
se retrouvent chez lui et chez ses congénères.

Dx

G. Zagari. Expériences sur la transmission de la rage de la mère au fœtus à
travers le placenta et par le moyen du lait. Giorn. Int. d. Scienze mediche,
iO« année, 1888 ^

Nous avons publié (t. \, p. 177) un ensemble d'expériences sur la trans-
mission de la rage de la mère au fœtus à travers le placenta et par le lait,
dues à MM. Perroncito et Carita, à M. Bardach, à M. Roux, à M. Nocard, et

\. Sur les relations de la fermeûtation avec les maladies infectieuses. Berlin, 18S9.

2. Nous profitons de l'intéressant travail de RI. Zagari pour donner, confor-
mément à une habitude que nous prendons, la bibliographie de tout ce qui a paru
sur la transmission fœtale de diverses maladies.

Bp.auell ~ Nouvelles communications sur le charbon elle sang charbonneux,
Virchows Archiv, t. XIV, 1838.

Davaine. — Acad. de médecine, 9 déc. 1867.

BoLLiNGER. — Sur l'importaDce des bactéries du charbon. Zeilschr. /". Thier.
Palh., t. II, p. 3il, -1876.

Chauveau. — Du renforcement de l'immunité des moutons algériens ; influence de
l'inoculatioQ de la mère sur la réceptivité des fœtus. Comptes rendus, t. XCI, 1880.

Arloing, Cornevin et Thomas. — Gaz. Hebd. de méd. et chir., 1881.

REVUES ET ANALYSES. 93

donl les résultats étaient contradictoires. A les envisager en bloc, et en leur
accordant la même créance, on était conduit à conclure que la transmission
de la rage par ces deux voies est un fait possible, mais rare. On est amené
à accentuer encore cette conclusion, si on tient compte des résultats cons-
tamment négatifs du travail d(> M. Zagari.

Ce savant a inoculé 12 fiMuelIes pleines, à savoir 5 lapins, 6 cobayes et
une chienne, avec du virus de passage ou du virus de la rage des rues. Dix
de ces animaux ont été inoculés par trépanation, deux lapines par la voie

Sangalli, — GoLGi, — GiuKFiNi. — Dlscussioa et documents relatifs au cliarbon.
nendiconli d. fi. Instiluto Lombardo, 1882.

Stbaus et Chamberland. — Mémoires de la Société de biologie, 1882 ; et Comptes
rendus, iSS-2.

NosoTTi. — Sur le génie et la nature du charbon, Italia agricola, Milan, 1883.

Carita. — Expériences sur le mode de transmission du charbon de la mère au
fœtus, fi. Ace. di medic. Turin, 1883.

MAttCHiAFAVA ET Gelu. — Une épizootie de choléra des poules, Rome, 1883.

MiROPOLSKY. — Du passage dans le sang du fœtus de matières solides contenues
dans le sang de la mère. Archiv. de physiol, 1883.

Tafam. — La circulation dans le placenta de quelques mammifères, Lo speri-
mentale, août 188o.

KouBAssoFF. — Passage des microbes pathogènes de la mère au fœtus, Comptes
rendus, t. XCIX, p. ioï et o08, 1883.

TizzoNi et Cattani. — Sur la transmissibilitédc l'infection cholérique de la mère
au fœtus, Gazzetta degli Ospel., 1833.

W'oLF. — Sur la transmission héréditaire des microbes pathogènes. Virchow's
Archiv, t. CV, 1886.

MoRiSANi. — Sur un cas de pustule maligne non transmise de la mère au fœtus,
Movgngni, 1886.

C\DÉAcet Mallet. — Transmission de la morve de la mère au fœtus. Comptes
rci, dus, janvier 1886.

Santi-Sirena. — Sur la transmissibilité de la tuberculose et sa prophylaxie.
Giorn. Inlernaz. d. Se. mediche, 1886.

Jam. — Sur la présence de bacilles tuberculeux dans l'appareil génital sain
dais la phtisie, avec des remarques sur l'état du fœtus dans la tuberculose géné-
ralise'e de la mère. Virchow's Archiv. 1886.

Landol'zy et OuEYRAT. -• Note sur la tuberculose infantile. Gaz. Hebd., 1886.

Maffccci et Bacquis. — De l'action du virus charbonneux sur l'embryon de
poules. Rivista Inlernaz., 1886.

Oreste et AuMANNi. — Etudes et recherches sur le barbone des buffles. Alli d.
Instit. d'incorragg. 1886, analysée dans ces Annales, t. I, p. 400.

Kroner. — Sur l'état actuel de la question du passage des microbes pathogènes
de la mère à l'enfant. Breslauer aertzl. Zeitsclir., 1886.

Wyssokow'itscu. — Sur le sort des microorganismes injectés dans le s >ng des
animaux à sang chaud. V. ces Annales, t. I, p. 4o.

Marchand. — Sur un cas remarquable de charbon chez une femme enceinte,
avec infection mortelle de l'enfant. Virchow's Archiv, t. CIV, 1887.

Lannelongue. — De la tuberculose congénitale et précoce. Eludes publiées par
M. Vernoiil. Paris, 1886.

Blaine. — Tuberculose bovine, sa communication par ingestion, respiration et
transmission héréditaire. Medic, Record, 1887, t. I.

94 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

d'un nerf péripliériqup. De ces animaux, on a obtenu 32 fœtus provenant
du travail abortif, ou retirés de l'utérus de la more morte. De ces fœtus, on
a inoculé les centres nerveux par trépanation. On a aussi inoculé une fois
le liquide amniotique et deux fois le foie. Deux fois aussi on a inoculé le lait
de la mère, recueilli avec pureté dans la glande mammaire. Trois fois on a
fait teter à de jeunes cobayes des femelles à l'état d'incubation rabique. Tous
les animaux qu'on avait ainsi essayé de rendre enragés sont, restés en
bonne santé, ou s'ils sont morts, c'est d'autres maladies que la rage.

L'auteur est tout prêt, on le sent, à faire de ces faits un argument en
faveur de la circulation purement nerveuse du virus rabique, et il y a même
dans le récit de ces expériences un fait intéressant à ce point de vue, et qu'on
peut utilement rapprocher de quelques-uns de ceux qui ont été insérés dans
le dernier numéro de ces Annales. Une lapine inoculée dans le nerf sciatique,
au moyen de virus fixe, présenta le 7'= jour un peu de rigidité dans le
membre inoculé, du côté duquel l'animal tombait facilement. Le soir du
même jour, la paralysie avait envahi l'autre jambe, et l'animal pouvait
encore entraîner son train postérieur avec les jambes de devant. La paralysie
était complète deux jours après, et le 10" jour l'animal fut trouvé mort.
Mais bien que ce fait soit d'accord avec la relation générale signalée par
MM.di Vestea et Zagari (V. ces Annales., t. I, p. 492) entre le siège de la mor-
sure et la forme clinique de la rage obtenue, il ne cadre guère avec d'autres
observations, et on a encore le droit de réserver son opinion à ce sujet.

E. HôGYÈs. Nouvelle méthode pour prévenir la rage avant l'infection.
Académie des sciences de Buda-Pest, 17 octobre 1887.

« Quand on inocule à des chiens, dit M. Hôgyes, des dilutions aqueuses
faites à des degrés de concentration divers, d'un virus rabique fixe obtenu
par de nombeux passages successifs à travers des lapins, et qu'on commence
les inoculations par les dilutions les plus faibles pour finir par les plus
fortes, les chiens ainsi traités peuvent être rendus réfractaires k une
infection rabique ultérieure de quelque façon qu'elle soit faite. Ils sont ainsi
préservés non seulement contre la morsure d'un chien enragé, mais contre
une infection artificielle faite soit sous la peau, soit sous la dure-mère,
que l'on prenne le virus du chien à rage des rues ou un virus plus éner-
gique, à savoir le virus fixe. »

Landouzy et Martin. — Sur quelques faits expérimentaux relatifs à l'histoire
de l'Hérédo-tuberculose. Mémoires publiés par M. Verneuil, Paris, 1887.

FinKET. — Etudes sur les conditions anatomiques de l'hérédité de la tuberculose.
Bévue de médecine, 1887.

Maffucci. — Contribution expérimentale à la pathologie de l'infection dans la
vie enbryonnaire. Rivisla Inter)iaz.,i' année, 1887.

Perroncito et Carita. — Bardach. — Roux. — Nocard. — Annales de l'Instiiitt
Pasteur, t. I, p. 177.

(j. Foa et Bordom-Uffreouzzi. - Sur l'action abortive du nieningococcus et
son passage de la mère au fœtus. Riformâ medica, 1887, n^ 39.

REVUES ET ANALYSES. 95

Dans cette nouvelle méthode, plus de préparation de virus atténués: le
virus vaccinal de M. Hogyes est précisément le virus rabique de passage,
c est-à-dire le plus virulent; plus d'inoculations successives de virus gra-
dués: le même virus fort sert à toutes les inoculations, il est simplement
dilué dans plus ou moins d'eau. C'est donc là une méthode plus simple que
celle de M. Pasteur, elle supprime et la dessication des moelles et leur
conservation à une l(Mnpérature constante.

Voici, d'ailleurs, un exemple de la façon dont opère M. Hogyes :

« Le 24 mars, un chien reçoit, sous la peau, de deux heures en
deux heures, et à chaque fois, un centimètre cube d'une émulsion de la
moelle fraîche d'un lapin ayant succombé à l'inoculation de la rage faite
sept jours et demi auparavant. Cette moelle était broyée dans de l'eau
contenant 7 pour iOOO de sel de cuisine. Le chien reçut six inoculations
faites chacune avec une dilution de force croissante dans l'ordre suivant :
lo I/.jOOO: 2'^ 1/2000; 3'^ l/oOO; 4o 1/2.50; 5'^ 1/100; 6-^ 1/10. Le 26 et le
27 mars, on recommença ce traitement de la même façon; on le répéta
encore le 4, le o et le 6 avril avec des solutions analogues de virus fixe.
Enfin, l'animal subit une nouvelle série d'inoculations, le 18, le 19 et le
20 avril. Ces traitements ne lui causèrent aucun malaise. Quarante et
un jours après le premier traitement (le 4 mai) et quatorze jour> après la
dernière inoculation, ce chien fut inoculé sous la dure-mère avec une
moelle d'un lapin, inoculé lui-même de la rage neuf jours et demi aupa-
ravant. Il resta vivant, tandis qu'un chien témoin inoculé de la même
façon mourut a,près quatorze jours et demi. »

Les 26, 27, 28 mai, trois chiens furent inoculés préventivement sous la
peau comuie le premier avec des dilutions de virus fixe. Le 16 juillet, ils
furent mordus par un chien enragé; aucun ne prit la rage. Le 1" septembre,
quatre mois après la première vaccination, ces trois chiens furent inoculés
par trépanation avec le virus de passage. Il restèrent bien portants ; un
chien et un lapin témoins, trépanés en même temps qu'eux, moururent
de rage le 24 et le 26 septembre.

Les quatre chiens traités, dont nous venons de rapporter l'histoire,
étaient encore vivants le. 17 octobre au moment de la communication de
M. Hogyes.

Telles sont les quatre expériences sur lesquelles s'appuie « la nouvelle
méthode pour prévenir la rage ». Il faut, d'abord, remarquer, comme
l'indique le titre même de la note que nous analysons, qu'il s'agit de la
prévention de la rage avant Vinfeclion; M. Hogyes ne nous apporte pas
encore de méthode de prévention de la rage après morsure.

Les quatre chiens inoculés préventivement, comme nous venons de le
dire, se sont montrés absolument réfractaires à la rage; mais quatre chiens!
n'est-ce pas un bien petit nombre d'animaux pour établir une méthode de
prévention de la rage même avant l'infection?

Bien que M. Hogyes n'indique pas quelle est la quantité de moelle
rabique qu'il emploie, on peut dire que sa méthode revient à inoculer
d'emblée du virus virulent et à assez fortes doses sous la peau des animaux

96 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

qu'il veut rendre réfractaires à la rage '. Ces inoculations répétées, faites
en 12 heures, rappellent les inoi-ulations rapides préconisées par M. Pasteur
pour les morsures graves, dans la forme de traitement dite traitement
intensifs. Puisque M. Hogyes n'emploie pas de virus atténués et gradués, il
semble, au premier abord, assez indifférent que l'animal ait reçu le matin
et dans l'après-midi des dilutions au 1/3000 et au i/oOO, etc., s'il reçoit le
soir le même virus virulent au 1/10. On se demande ce qui arriverait si le
chien avait reçu en une seule fois la même quantité de virus qu'on lui
inocule dilué et en plusieurs fois? On regrette de ne pas trouver cette
expérience à côté de celles que M. Hogyes a faites. En effet, les chiens qui
reçoivent sous la peau du virus rabique, même du virus fixe, ne suc-
combent pas toujours à la rage, et souvent ils sont réfractaires après une
seule inoculation. Dans la lettre sur la rage qu'il a écrite dans le premier
numéro de ces Annales, M. Pasteur cite des exemples de ce genre'.
Je ne rappellerai ici que le cas de ces sept chiens inoculés d'emblée le
13 juillet 1886, sous la peau, avec deux centimètres cubes d'émulsion du
bulbe d'un lapin rabique de 118" passage. Six de ces chiens n'ont aucu-
nement souffert de l'inoculation, et quatre d'entre eux ont résisté à l'ino-
culation par trépanation du virus de la rage des rues. De même, deux
chiens qui reçurent d'emblée, sous la peau, dix centimètres cubes de
l'émulsion faite avec une moelle rabique de 122* passage, n'éprouvèrent
aucun malaise, et supportèrent sans périr l'inoculation intra-crânienne du
virus de la rage des rues. Dans ces deux expériences, les animaux témoins
succombèrent à la rage après l'inoculation sous la dure-mère.

On pourrait citer bien d'autres exemples où l'immunité a été conférée à
des chiens par une ou plusieurs inoculations de virus de passage sous la
peau. On est donc conduit à se demander si M. Hogyes aurait obtenu
des résultats différents, en inoculant la même dose de virus fixe sans
dilutions graduées? De plus, ce n'est pas avec quatre expériences que
M. Hogyes a pu s'assurer que les inoculations de doses relalivement
assez considérables de virus rabique virulent, dans une seule journée,
ne causent jamais la rage, même lorsqu'on commence par des dilutions
faibles.

C'est dans la dilution du virus que se trouve la nouveauté delà méthode,
il faut donc établir par de nombreux essais que cette dilution est nécessaire,
et qu'elle donne une sécurité que l'on n'a pas quand on inocule d'emblée des
virus virulents.

Pour M. Hogyes, l'immunité s'acquiert par l'accoutumance de l'organisme
à un virus donné; il compare cette accoutumance à ccUr qui s'établit par
l'usage de substances chimiques toxiques. Cette idée nous explique
comment M. Hogyes a été conduit à injecter des dilutions de plus en plus

I. M. Hogyes constate que les dilutions au l/oOO donnent la rage aux lapins
quand on les injecte sous la dure-mère.

'■1. Voir Lettre de M. Pasteur, premier unméro de ces Annales, et Comptes rendus
Académie des sciences, novembre 18S6.

o. Voir ces Annales, numéro 1.

REVUES ET ANALYSES. 97

fortes de virus labiques. Il ne faut pas oublier que le virus rabique vivant
contenu dans la niooUo ne se dilue pas comme un simple composé chi-
mique soluble. A une parcelle de matière nerveuse peut rester attachée une
grande quantité de virus, et tel centimètre cube d'une dilution au l/lOOe
peut être plus riche en éléments virulents qu'un centimètre cube d'une
dilution au ^/iO^

M. Hôgyes procède comme l'a fait M. Pasteur; il établit, d'abord, la
possibilité de rendre, par sa méthode, les chiens réfractaires à la rage
avant l'infection; lui aussi nous conduira sans doute à la vaccination delà
rage après morsure, c'est pourquoi la communication qu'il a faite à l'Aca-
démie de Buda-Pest devait être présentée à nos lecteurs avec les remarques
que comportent les résultats intéressants qu'elle contient. On la comparera

très utilement au travail qui suit.

E. Houx.

D' Ferran. Sur la vaccination antirabique de l'homme. Gaceta medica

Catulana, t. XI, n« 4, 1888.

M. le D'' Ferran a été récemment nommé directeur de l'Institut micro-
biologique de la municipalité de Barcelone; il a profité des facilités que lui
donnait ce poste éminent pour étudier la question de la vaccination anti-
rabique, et se poser, à ce propos, les questions suivantes :

« De ce qu'on obtient de bons résultats, à l'InstitutPasteur, avec la méthode
primitive et avec la méthode intensive, faut-il conclure en bonne logique qu'il
soit nécessaire d'inoculer les degrés d'atténuation si nombreux et si variés
qui constituent le traitement paslorien?

« Puis, a-t-on démontré que le virus rabique, tel qu'il est acclimaté dans
les lapins, et sans atténuation préliminaire, est mortel pour l'homme?

« N'est-il pas possible que les effets prophylactiques puissent s'obtenir
avec une seule vaccination rabique, et que toutes les autres soient inutiles
sinon superflues? »

« La légitimité de ces doutes est indiscutable, » continue M. le D"" Ferran.
Nous en convenons volontiers. Nous sommes sûrs d'avance de n'être pas en
contradiction avec ce savant médecin en ajoutant que ces doutes ne peuvent
être levés que par l'expérience, et qu'aucune considération théorique n'a
sur ce sujet de valeur probante, pas même les vues ingénieuses émises par
M. Ferran sur la théorie de la vaccination, et que nous n'entendons ni
appuyer ni contester, parce qu'elles sont théoriques.

C'est à l'expérience à décider, et avant de changer la méthode de vacci-
nation suivie à l'Institut Pasteur, M. Ferran a dû, sans aucun doute, faire
sur des animaux, sur des chiens par exemple, des tentatives lui donnant
toute confiance sur l'efficacité et l'innocuité de son procédé. On aimerait a
trouver dans son Mémoire le récit ou le résumé de ses expériences et des
raisons qui l'ont conduit à abandonner une méthode qui a fait ses preuves
et lui en substituer une autre.

Sa méthode de vaccination supra-intensive, qui débute par l'inoculation

7

98 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

de la moelle du jour, a été' fréquemment essayée à Paris sur les chiens. Elle
donne, il est vrai, une immunité complète aux chiens qui résistent, mais
elle n'est pas dépourvue de tout danger, car quand on opère sur un nombre
d'animaux un peu considérable, on voit que quelques-uns succombent à l'i-
noculation préventive *. C'est à raison de ces faits qu'on a adopte à l'Institut
Pasteur la méthode qu'on y suit.

M. Ferran pourra nous dire, et c'est en effet la seule justification que
contienne son Mémoire, que la valeur de sa méthode se démontre par les
succès de son application. Il est certain que la statistique que nous publions
plus bas est très encourageante. Mais elle n'est pas encore très longue.
Tout ce qu'on peut souhaiter, c'est qu'elle continue à rester aussi heureuse.

En ce moment, dans la pratique de M. Ferran, on peut distinguer deux
périodes. Pendant la première, qui comprend 22 cas, on inoculait la matière
cérébrale d'un lapin de passage, mort le 8'^ jour après trépanation. M. Ferran
trouve plus commode l'ablation du cerveau que celle de la moelle. Il le
coupe en fragments qu'il garde 24 heures, à 37", en présence de la potasse
caustique. C'est une température plus élevée que celle qu'on utilise à Paris;
aussi l'atténuation est des plus rapides, et après 24 heures cette pulpe
encéphalique, inoculée par trépanation à des lapins, ne provoque l'explosion
de la rage qu'après une incubation de 15 jours. On broie, pour l'usage, le
tiers environ d'un cerveau de lapin avec du sable pour obtenir une désagré-
gation complète. On ajoute 24 centimètres cubes d'eau stérilisée, on laisse
le sable se déposer quelques minutes, et on fait à chaque mordu deux injec-
tions de 1 centimètre cube de cette émulsion le matin, et deux le soir pen-
dant 10 jours -.

La deuxième période comprend le reste des cas delà statistique, soit 68,
et voici la description du procédé opératoire qu'on y suit.

« Aussitôt la vie éteinte chez les lapins trépanés, on enlève le cerveau, et
au moyen de sable, on en fait une émulsion dans l'eau stérilisée suivant le
mode indiqué : 10 grammes de pulpe encéphalique donnent 30 centimètres
cubes d'émulsion inoculable... Chaque individu mordu reçoit durant le trai
tement 40 centimètres cubes de cette émulsion ^ ; cela revient à inoculer tout
le principe actif et tous les germes de la rage contenus dans un cerveau
de lapin et quelquefois davantage.

« Nous pensons pourtant, continue M. Ferran, que cette quantité pourrait
être réduite notablement sans préjudice pour le résultat. »

« Voici les données statistiques qui établissent l'innocuité et la valeur
préventive des méthodes imaginées et mises en œuvre dans mon laboratoire
bactériologique du 10 mai au 10 décembre 1887. »

Elles se résument en ceci. Sur 83 individus traités, il n'y a aucun mort;
25 appartiennent pourtant à la série A, 15 à la série B, et 37 à la série C
de nos statistiques mensuelles. Pour 43, la fin du traitement date de plus

1. Pasteur, lettre sur la rage. Annales de Vlmtitut Pasteur, t. I, p. 1.

2. L'émulsioa est sans doute renouvelée tous les jours, mais ce point n'est pas
indiqué dans le Mémoire.

3. Probablement à raison de 4 inoculalioiis par jour, pendant 10 jours, avec
l'émulsiou renouvelée tous les jours. Le Méuioiro ne le dit pas.

REVUES ET ANALYSES. 9â

de 3 mois, et de plus de 40 jours pour 63. En outre de ces 85 traités, 63 per-
sonnes se sont présentées au traitement, mais n'y ont pas été admises, parce
qu'on n'en a tiré aumine raison de croire suspects les animaux qui les
avaient mordues. Dx,

V. Galtier. Persistance de la virulence rabique dans les cadavres enfouis.
Comptes rendus Àcad. des Se, 30 janvier 1888, p. 364.

M. Galtier fut appelé, le 25 novembre 1887, à examiner le cadavre d'un
chien mort seize jours auparavant et qui était resté enfoui durant quinze
jours. Quelques-uns des symptômes observés pendant la vie de l'animal
faisaient supposer qu'il avait succombé à la rage. Bien que les organes
abdominaux fussent déjà très altérés, M. Galtier a pu, en inoculant par
trépanation à un chien neuf un peu de la matière du bulbe, donner à ce
dernier une rage caractéristique qui s'est déclarée le 12*^ jour après l'inocu-
lation.

Le fait de la conservation de la virulence rabique dans le cerveau, pen-
dant un temps très long après la mort, a été constaté pour la première
fois par MM. Pasteur, Chamberland, Roux et Thuillier. On lit en efTet dans
les Comptes rendus de l'Académie des sciences (t. XCV, p. 1187, 1882) le
passage suivant : « Tant que les matières de l'encéphale ou de la moelle
ne sont pas envahies par la putréfaction, la virulence y persiste. Nous avons
pu conserver un cerveau rabique avec toute sa virulence trois semaines
durant, à une température voisine de 12 degrés. »

Nous sommes donc pleinement d'accord avec M. Galtier pour appeler
l'attention des médecins et des vétérinaires sur ce fait. Ils devront avoir
recours à la méthode d'inoculation à la surface du cervequ, lorsqu'ils auront
des doutes sur la maladie d'un animal soumis à leur examen. Si le cadavre
a déjà été enfoui, « il est indiqué de demander l'exhumation pour pratiquer
l'inoculation du bulbe. » On a souvent eu l'occasion, à l'Institut Pasteur, de
faire exhumer des chiens rabiques pour inoculer leur bulbe, et les résultats
obtenus s'accordent avec celui que rapporte M. Galtier.

Roux.

B. Fischer. Sur un nouveau bacille lumineux. Centralbl. f. Bakt., t. III, 1888.

Dans une revue critique sur les microbes phosphorescents (V. t. I, p. 489).
nous avons déjà parlé d'un bacille rapporté par M. Fischer d'un voyage aux
Indes, et qui donne en 24 heures une phosphorescence bleuâtre aux poissons
morts sur lesquels on l'ensemence. Avec les cultures pures de ce microbe,
on a pu produire artificiellement et montrer aux curieux, à l'aquarium de
Berlin, cette phosphorescence en masse de l'eau de mer qui donne ce que
les marins appellent la mer de lait, phosphorescence continue très difîérente
de cette phosphorescence passagère qu'on remarque dans l'eau de mer, quand
elle entoure d'une frange lumineuse les obtacles contre lesquels elle se briso.

^00 ANiNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

A coté de ce bacille et du baderium phoshorescens dont nous avons parlé
aussi, M. Fischer place aujourd'hui un nouveau bacille lumineux rencontré
en telle abondance dans la Baltique que l'eau du port de Kiel en contient
de 4 à 20 germes par centiniètre cube, A raison de ce fait, il l'appelle bacille
indigène.

Ce bacille est un peu plus court, mais aussi épais que le bacille indien,
et lui ressemble beaucoup. C'est un bâtonnet court à extrémités arrondies,
■ animé de mouvejiients rapides. Il se colore bien par les couleurs d'aniline,
mais on n'y observe pas cette coloration bornée aux extrémités que présen-
tent si souvent le bacille indien et aussi celui de la septicémie du lapin.

Il pousse très bien sur la gélatine nutritive ordinaire, mais mieux encore
quand on y ajoute 3 0/0 de sel marin, et qu'on y remplace la viande de
veau par la clmir de hareng vert. Il ne pousse pas sur la pomme de terre,
le lait, le bouillon et le sérum de sang. Ce dernier fait le différencie du bacille
indien qui pousse bien sur le sérum. Il se distingue aussi du baderium phos-
phorescens en ce qu'il envahit plus rapidement la surface d'un poisson sur
lequel on l'ensemence. Déposé sur un point, il a recouvert en quelques jours
l'animal d'une couche continue et phosphorescente, tandis qu'il faut mul-
tiplier les stries d'ensemencejuent avec la bactérie pour arriver au même
résultat.

Le bacille indigène et le bacille indien ont tous deux la propriété de
liquéfier la gélatine et de provoquer une abondante évaporation du liquide
qu'ils forment ainsi, si bien qu'autour de chaque colonie se forme une petite
cupule, plus ou moins profonde suivant Tàge, dont les bords ont l'air d'être
découpés à l'emporte-pièce, et dont le fond est occupé par la colonie toute
seule sans trace de liquide. Cette curieuse apparence se retrouve dans les
cultures par piqûre, dans lesquelles on voit quelquefois, au bout de quelques
mois, des trous de 3 à 4 mm. de diamètre, de 2 à 5 cent, de profondeur, et
dans les cultures en stries, où un sillon se forme sur le trajet du fil de
platine. M. Fischer n'en cherche pas l'explication. Peut-être pourrait-on la
trouver dans la chaleur produite parla combustion produite par ces microbes,
et dont la lueur qu'ils répandent est une traduction.

Le bacille indigène peut croître à des températures de o à 10", et se
différencie sous ce point de vue du bacille indien, qui, habitant les tropiques,
exige des températures supérieures à Io°. Par contre, il se rapproche du
bacille que nous avons cité dans notre revue comme provenant du D'' Forster,
et lui ressemble tellement par ailleurs qu'il serait bien intéressant de savoir
si ce n'est pas le même être.

Tout ce que nous disons dans notre revue du bacille deForsIer se retrouve
en effet dans le Mémoire que M. Fischer consacre à son nouveau bacille,
nécessité de l'oxygène, couleur de la lumière, étendue du spectre, éclat assez
grand pour qu'on ait pu photographier les bactéries avec leur propre
lumière. M. Fischer a même réussi, avec des plaques assez sensibles et une
durée d'exposition assez longue, à avoir les images de deux bocaux renfer-
mant deux harengs phosphorescents, et même celle dune montre placée
entre les deux.

Dx.

RE^ UES ET ANALYSES. 101

0. Pbove. Le micrococcus ochroleucus, une nouvelle bactérie chromogène.
{Beitrage zurBiol. der Pflanun de F. Cohn, IV, 3, p. 401). )

Il n'existe pas moins de 16 espèces connues de microbes colorés en jaune ;
M. Prove nous en fait connaître une espère nouvelle qu'il a trouvée dans de
l'urine humaine, et qu'il nomme Micrococcus ochroleucus. Cette espèce se dis-
tingue par la forme de ses colonies sur la gélatine, par leur couleur d'un
jaune de soufre, par la forme de ses cellules qui sont des microcoques
isolés ou réunis en chapelet au nombre de 2 à 12, et dont le diamètre varie
entre 0,2 et 0,X pi. L'auteur s'est proposé, en étudiant cette espèce, de résou-
dre plusieurs problèmes qui sont d'un très grand intérêt théorique. Il s'est
demandé : 1° si la forme microcoque persistait dans toutes les conditions, et
si on ne pouvait pas la faire varier en même temps ([ue le milieu de cul-
ture ; 2° si la fonction chromogène se conservait avec tous ses caractères
dans les divers milieux oh. l'organisme est appelé à se cultiver. Autrement
dit, c'était soulever la question de la variabilité de la forme et de la fonction
sous l'influence des changements du milieu. Si M. Prove n'a pas résolu d'une
façon définitive ce double problème, du moins est-ce un mérite. que de
l'avoir soulevé, et son travail se ressent de l'idée qui a dominé ses recher-
ches. Il renferme un certain nombre de faits intéressants dont quelques-uns
sont nouveaux.

Le M. ochroleucîis est composé, nous l'avons dit, de cellules sphériques
isolées ou réunies en diplocoques ou en streptocoques. De plus, ces cellules sont
mobiles, et, cultivées à 36° dans un milieu liquide sucré, elles se renflent de
façon à atteindre 1,78 ^ de diamètre et à donner des spores endogènes.
Ces spores se forment aussi sur de l'albumine coagulée par la chaleur. Les
colonies formées ainsi sur l'albumine peuvent résister parfois à une ébullition
d'une demi-heure à 100". Mais M. Prove n'indique pas s'il a employé la
chaleur humide ou la chaleur sèche. Tous ces caractères, la mobilité des
cellules, l'existence des spores endogènes, leur résistance à la chaleur, ne
se rapportent guère à ce que l'on connaît sur les espèces que l'on décrit
d'ordinaire sous le nom de microcoques. On serait porté à croire que l'on
a plutnt afTaire à un bacille. Ce n'est pas la conclusion que donne M. Prove
qui déclare, au contraire, que la forme microcoque s'est conservée dans
toutes les conditions et dans tous les milieux qu'il a essayés.

Ces milieux sont assez nombreux : en dehors des milieux solides ordi-
naires, l'auteur a employé des solutions sucrées, du lait, de l'amidon, de
l'urine, et un milieu minéral contenant du phosphate de potasse, des sul-
fates de potasse et de magnésie, du carbonate de chaux et de l'acétate
d'ammoniaque avec ou sans urée. L'organisme préfère les milieux solides et
les milieux alcalins ou neutres. Cependant, chose curieuse, dans la solution
minérale et dans les solutions sucrées, la réaction finale du liquide resta
acide; en présence de l'urée et dans tous les autres milieux, la réaction fut
alcaline même quand le milieu primitif était nettement acide.

La fonction chromogène ne se conserve pas comme la forme dans toutes
les conditions. La couleur se développe, d'ailleurs, tardivement même dans

102 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

les circonstances les plus favorables, sur la gélatine par exemple, qui se
liquéfie lentement avant que la coloration n'ait nettement apparu. Cette
coloration se produit toujours en présence d'un excès de matières albumi-
noïdes; en présence des substances hydrocarbonées, comme les sucres, la
couleur ne se forme pas. M. Prove a eu l'occasion d'observer les mêmes faits
pour le Micrococcus prodigiosus, et il est porté à croire que, d'une manière
générale, la formation des pigments colorés chez le^ microbes est due à la
présence des albuminoïdes en excès. Avec le M. prodigiosm, assure-t-il, la
couleur ne fait jamais défaut dans les milieux où les matières albuminoïdes
existent en abondance. On sait cependant que l'on peut obtenir des cultures
du M. prodigiosus qui restent incolores sur tous les milieux. Ce qu'il dit
sur l'action des sucres pour empêcher la production de la couleur chez
l'organisme qu'il a étudié vient confirmer ce que nous en avons dit ailleurs
à propos des microbes colorés. Il est un fait entièrement nouveau que
M. Prove signale en passant, et sur lequel il nous promet une élude pîus
complète. Je veux parler de l'action de la lumière sur son microbe.

La lumière ne change ni la forme ni la marche de développement de
l'organisme; mais elle a une action marquée sur la fonction chromogène.
La lumière solaire ainsi que la lumière diffuse activent beaucoup la produc-
tion de la couleur jaune ; l'obscurité ralentit cette coloration quand elle a
commencé à se former, et l'empêche tout à fait dans les cultures conservées
complètement à l'abri de la lumière. On obtient ainsi des cultures qui restent
incolores tant qu'on ne les expose pas de nouveau au soleil. C'est le premier
exemple connu, chez les microbes colorés, de cette action de la lumière. Il
resterait à voir si l'action prolongée de l'obscurité pendant un certain nombre
de cultures successives arrive à abolir d'une façon durable la fonction chro-
mogène, soit quand on reporte les cultures à la lumière, soit quand on les
ensemence sur de nouveaux milieux. C'est un point très intéressant qui reste
à étudier et que M. Prove tiendra sans doute à éclaircir dans le travail
qu'il prépare sur l'action de la lumière chez le microbe coloré qu'il a décrit

le premier.

E. W.

D' Globig. Sur le développement des Bactéries entre 50 et 70» {Zeitschrift

fur Hygiène, UI, 2, 1887, p. 294.)

La plupart des microbes ne peuvent guère se développer facilement au
delà de 45'', et les températures de 50 et 60" sont considérées, pour le plus
grand nombre d'entre eux, comme les limites extrêmes où peut se faire leur
développement. Cependant on a trouvé quelques microbes dans l'eau, en
particulier dans les eaux thermales, pouvant croître encore à 64" et 74°
(Miquel, Van Tieghem, Certes etGarrigou).

M. Globig s'est proposé d'étudier d'une façon systématique les microbes
qu'il a vus souvent se développer au delà de 50°, sur du sérum du sang
soumis à la stérilisation fractionnée d'après la méthode de Koch. Ces micro-
bes se trouvent facilement dans de la terre de jardin, et il suffit d'en met-

REVUES ET ANALYSES. 103

tre des traces sur du sérum uiainleiiu à 58" pour donner naissance à de
nombreuses colonies.

Pour séparer les diffe'rentes espèces qui se développent facilement dans
ces conditions, M. Globig s'est servi de la pomme de terre, afin de conserver
à des températures élevées l'avantage que donne l'emploi des milieux soli-
des La pomme de terre lavée longuement au sublimé, puis brossi'e et sté-
rilisée une première fois à 100^*, d'après la méthode de Koch, est ensuite cou-
pée avec un couteau flambé, en morceaux de grandeur convenable, puis
introduite dans des tubes à essai, que l'on soumet une seconde fois et à
trois reprises différentes à la stérilisation fractionnée à 100". La longueur de
ce procédé de stérilisation, d'ailleurs connu, mais minutieusement décrit
par M. Globig, lui a fait essayer un procédé plus commode analogue à celui
qu'a décrit M. Roux dans le dernier numéro de ces Annales; il introduit la
pomme de terre crue dans les tubes à essai et fait ensuite d'un seul coup
la cuisson et la stérilisation. M. Globig a malheureusement opéré en tubes
clos et dans une atmosphère imparfaitement humide, ce qui rend la surface
de la pomme de terre sèche et ridée, impropre à la culture des microbes,
et, ce qui est un inconvénient plus grave, donne souvent une stérilisation
incomplète à 100°, température à laquelle M. Globig fait ses stérilisations.
11 eût suffi d'introduire un peu d'eau dans le tube à essai et de porter pen-
dant 10 do minutes à 115" pour amener sûrement le double résultat qu'on
se propose.

Quoi qu'il en soit, M. Globig a pu isoler dans la terre de jardin 30 espèces
différentes de microbes pouvant se développer entre 50 et 70", donnant faci-
lement des spores, et ayant tous la forme bacillaire. La forme coccus n"a pas
été rencontrée dans ces conditions. Aucune des espèces isolées ne s'est mon-
trée pathogène pour le cobaye ni la souris, ce qui ne doit pas surprendre,
puisque d'ordinaire les températures élevées auxquelles ont été faites toutes
ces cultures amènent l'atténuation rapide de la virulence chez la plupart des
bactéries pathogènes connues.

Nous disions que la forme coccus n'a pas été observée : M. Globig signale
cependant deux espèces de microorganismes formées de corpuscules ronds,
très petits, parmi lesquels on distingue parfois quelques rares filaments
courts et très grêles, qu'il est porté à prendre pour des filaments de mucé-
dinées dont les corpuscules seraient les conidies ou les spores. Il est très
probable que cette hypothèse est exacte. L'on rencontre en effet un assez
grand nombre de mucédinées pouvant vivre au delà de 50". J'ai eu l'occa-
sion d'en observer plusieurs et j'en ai signalé* qui sont remarquables par
leur propriété de sécréter tardivement do l'invertine au moment de leur
fructification. Il en existe beaucoup qui peuvent se rapporter à la descrip-
tion assez incomplète qu'en donne M. Globig. On obtient facilement des
formes analogues, à 50" et au delà, sur du pain humecté d'un liquide légère-
ment acidulé, et souvent sur du simple papier buvard en présence de l'eau.
Les spores rondes, très petites, douées d'un vif mouvement brownien, don-
nent en germant un filament très grêle, qui se ramifie parfois, mais qui

1. Voir le n» XI, 1887 de ces Annales.

i04 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

reste souvent très court, de façon à produire l'illusion d'un bacille portant à
l'une de ses extréuiités un spore renflée.

Si M. Globig n'a observé qu'un très petit nombre de mucédinées, une ou
deux espèces tout au plus, dans les conditions où il a. opéré, cela tient sans
doute à ce qu'il a fait constamment ses cultures dans des milieux neutres,
ou même alcalins, comme le lait ou les bouillons dont il s'est servi à une ou
deux reprises.

En cherchant à déterminer les limites supérieures de température qui
permettent la vie des microbes, M. Globig a expérimenté, tant sur ceux qu'il
avait isolés que sur les microbes les plus vulgaires. Il assure que, parmi ces
derniers, il n'en a trouvé aucun qui puisse se développer à 46 et à 50°; cela
tient sans doute aux conditions particulières dans lesquelles M. Globig s'est
placé, car on pourrait citer un grand nombre de bactéries parmi les plus
vulgaires, à ne prendre que le Bacillus subtilis, que l'on voit pousser facile-
men t à 55 et même à 60 dans les milieux légèrement alcalins.

Parmi les trente espèces étudiées, il en est très peu qui puissent se cul-
tiver jusqu'à TO». La température moyenne de culture a été de 58", et, pour
un grand nombre de ces espèces, l'optimum de température se trouve dans
les environs de 55°. Mais ce qu'il y a d'intéressant à tirer de ces observations,
c'est que plusieurs espèces ne peuvent descendre au-dessous de 50° dans les
cultures sur pomme de terre. Ce minimum existe-t-il d'une façon absolue?
C'est ce qui n'a pas été établi, M. Globig ayant négligé de déterminer les
limites de température en employant les milieux liquides pour ses cultures.
Ce n'est que dans la terre de jardin que M. Globig a pu trouver ces bac-
téries particulières. Les déjections intestinales et les excréments de divers
animaux, pas plus que des eaux d'origine très diverse ne lui en ont fourni.
Cette absence des bactéries dans les eaux est faite pour surprendre. J'ai eu
souvent l'occasion d'en observer qui provenaient des eaux ordinaires, et qui
se cultivaient facilement à 55 et 60° dans les liquides neutres ou alcalins.
Une des causes d'insuccès de M. Globig provient, sans doute, de ce qu'il a
surtout expérimenté avec de l'eau de marais oii avaient séjourné pendant
longtemps des corps en putréfaction, contenant, par conséquent, des bacté-
ries vulgaires en grand nombre, dont le développement exagéré avait
amené la destruction des espèces incapables de vivre dans les mêmes con-
ditions de basse température.

Pour ne nous en tenir qu'aux résultats de M. Globig, nous noterons avec
lui la présence de ces bactéries particulières dans les terres les plus diverses,
qu'il a eu l'occasion d'examiner, et dont quelques-unes provenaient des îles
Hébrides, de la Nouvelle-Guinée ou de régions plus froides, comme les îles
de la mer Baltique. On les trouve, tant à la surface que dans les couches
profondes du sol, jusqu'à 2 et 4 mètres de profondeur.

Un détail intéressant, signalé par M. Globig, sans autre explication, est
le fait de l'absence de tout germe vivant, à la profondeur de 80 centimètres,
dans le sol avoisinant la partie nord de l'Institut de M. Koch, tandis que les
couches plus superficielles ou plus profondes en contiennent un grand
nombre, se développant à toute température, depuis 15° jusqu'à 65". En
consultant ses tableaux, on peut remarquer que la couche située entre 60

REVUES ET ANALYSES. 105

et 80 centimètres se compose d'un sable fin très argileux, par conséquent
peu perméable à l'eau, et surmonté d'une couche épaisse de -40 centimètres
d'un sable plus grossier. Le tout constitue, on le voit, un filtre parfait, qui
ne laisse pas arriver à la profondeur de 80 centimètres les eaux de la surface
et, par suite, les germes que ces eaux entraînent avec elles. Au-dessous, on
a, au contraire, un sable grossier et caillouteux, contenant des germes en
quantité. D'une façon générale, le nombre des microbes diminue avec la
profondeur, et cela est particulièrement vrai pour les bactéries qui nous
occupent. Dans le sol sableux de la montagne de Gatow, à sable très fin,
elles disparaissent au-dessous de 20 centimètres.

S'il est vrai que certains microbes ne peuvent pas se développer au-des-
sous de oO", on comprend difficilement l'existence de leurs germes à la sur-
face des sols les plus divers, d'où les eaux d'infiltration les répartissent en
plus ou moins grand nombre dans les couches sous-jacentes.

Sans doute, le soleil de juillet et d'août est capable d'échauffer parfois la
surface du sol jusqu'à des températures qui dépassent iîî et 50". xMais cela
suffit-il pour expliquer la présence constante de ces germes dans toutes les
terres? Il est permis de croire que ces germes sont capables de se développer
à des températures inférieures, autres que celles où l'auteur s'est exclusive-
ment placé. Signalons toutefois ce fait intéressant, que ces germes existent
en nombre relativement plus considérables dans les sols des pays très
chauds, comme la Nouvelle-Guinée.

E. Wasserzug.

NoEGGEKATH. Sur une nouvelle méthode de culture des bactéries sur mi-
lieux colorés dans un intérêt de diagnostic. Fortsckritte der Medicin, t. YI,
1888, p. i.

Une méthode qui permettrait d'établir, entre les diverses espèces de
coccus, des différences bien caractéristiques, rendrait évidemment de grands
services. Il n'y a guère à croire qu'il existe une méthode pareille, ayant des
applications tout à fait générales. Les produits de l'activité vitale d'un
microbe, qui pourraient servir à le caractériser, ne varient pas seulement
avec 'e genre et l'espèce du microbe, ils varient aussi avec les conditions et
le milieu de culture, et par suite telle méthode qui, dans un cas, donnera
telle réaction caractéristique d'un microbe pourra fort bien ne rien donner
dans un autre cas avec le même microbe.

Mais il n'en faut pas moins savoir bon gré aux savants qui nous font
connaître un nouveau moyen d'étude et de diagnostic. M. Noeggerath en a
d'abord cherché un d^ns une méthode de coloration des microbes morts
avec un mélange de couleurs. Mais il a bientôt trouvé qu'il valait mieux
cultiver le microbe vivant sur un milieu nutritif coloré avec ce mé-
lange.

Sa méthode est la suivante. On mélange ensemble et dans l'ordre sui-

106 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

vant les quantités voulues de solutions concentrées de diverses couleurs
d'aniline, savoir :

Bleu de mctylène 2'"''.

Violet de gentiane •i'"''.

V^ert de méthyli- l''''

Chrysoïdine 4''''.

Fuchsine 5'"'".

Le tout est étendu à 200"'". On o])tient ainsi un liquide qui colore le
papier à filtre en gris foncé ou noir bleuâtre. H est bon de le conserver 10
ou 15 jours avant de s'en servir. Il se fait alors des modifications de cou-
leur qu'il vaut mieux laisser s'accomplir. Au bout de cet intervalle, on cor-
rige sa teinte. Si elle est trop rouge, on y ajoute un pende vert et de violet;
si elle est trop verte, on ajoute du rouge et un peu de violet; si c'est la
nuance bleue ou violette qui domine, on ajoute un peu de chrysoïdine. On
tâche d'obtenir une teinte neutre.

C'est ce liquide qui sert à colorer le milieu nutritif. A lO""'" de gélatine
poptonisée on ajoute de 7 à 10 gouttes de teinture, de façon à ce que le
mélange commence à n'être plus transparent. On chauffe et on étend sur
une plaque de porcelaine. Sur la gélatine refroidie on fait alors des cultures
en boutonnière du microbe à étudier. On observe alors des changements de
couleur très marqués. La portion de gélatine envahie par la culture forme
une bande colorée, entourée de deux bandes plus claires, le tout très dis-
tinct comme teinte, sinon comme contours, de la couleur neutre du milieu
gélatinisé. Il serait intéressant de savoir quelles sont les actions chimiques
qui amènent ces changements de couleur, et c'est peut-être pour des
recherches dans cette voie que cette méthode si sensible des colorations
sera le plus utile. Il suffit pour s'en convaincre de songer aux services que
rendent journellement dans les laboratoires, le papier de tournesol ou les
réactifs colorés. C'est là un sujet sur lequel M. Noeggerath promet de nou-
velles recherches,

Dx.

3

Behring. Sur le sublimé corrosif dans les liquides albumineux. Centrabl. f.
Bakter. M. und Parasit., 1888, t. I, p. 27 et 64.

Nous avons publié, p. 553 du t. le- de ces Annales, \e résumé d'un travail
du D'' Laplace, prouvant que la valeur du sublimé corrosif comme anti-
septique était notablement augmentée par l'addition d'un peu d'acide tar-
trique. M. le D"" Behring, après vérification, se rallie à cette conclusion,
mais il lui enlève et lui ajoute quelque chose.

Ce qu'il lui enlève, c'est un peu de son caractère absolu. Il est certain
qu'il ne peut y avoir de formule absolue dans les questions d'antiseptiques.
Ainsi la solution de Laplace semble à M. Behring moins active pour la
désinfection du pus que pour celle du sérum de sang. Il lui paraît aussi
que la solution non acidulée de bichlorure de mercure est de un quart plus

RKVUES ET ANALYSES. 107

active que la solution additionnée d'acide tartrique, quand on remploie
contre les spores charbonneuses. En revanche, en injections sous-cutanées,
la solution acide, qui ne donne pas de précipité avec les liquides organiques,
est absorbée plus vite que l'autre, et les animaux qui l'ont reçue meurent
non seulnment plus vite, mais encorf pour des doses plus faibles que si on
se sert de solution non acidulée.

Nous retrouvons donc, même pour cet antiseptique si actif, la contingence
ordinaire dans cet ordre de phénomènes. Cette contingence tient à des
causes qu'il serait on ne peut plus utile de mettre en lumiôre pour chaque
cas. Ici nous connaissons deux de ces causes. En premier lieu, M. Wasserzug,
dans un travail que nous avons publié, a montré que l'acidité de la liqueur
pouvait, si faible qu'elle fut, avoir à elle seule de l'influence sur certaine
microbes, par exemple sur la bactérie du pus bleu. Puis, voici M. Behring
qui en éclairant un peu le mécanisme de l'action de l'acide, nous permet
de comprendre qu'il puisse quelquefois ne pas fonctionner.

On pouvait interpréter les résultats de Laplace en disant que l'acide,
empêchant le sublimé de se précipiter à l'état d'albuminate de mercure, le
maintenait par là, actif, dans la liqueur. D'après M, Behring, cet albuminate
de mercure n'existe pas, ou plutôt n'a aucune ressemblance avec les coagu-
lums albumineux insolubles provoqués par l'action des acides ou de la
chaleur. L'albuminate de mercure se redissout facilement dans les acides,
le cyanure de mercure, l'iodure de potassium, bref dans tous les corps qui
ont la propriété de redissoudre les précipités mercuriques obtenus en solution
aqueuse. D'un autre côt^ on peut obtenir, du sérum de sang dans lequel on
tient du sublimé dissous au moyen d'un acide, les mêmes réactions que
celles que donne le sublimé simplement dissous dans l'eau. Ainsi la potasse et
la soude y donnent un précipité jaune, l'ammoniaque un précipité blanc,
les carbonates alcalins un précipité brun, etc.

On retrouve les mêmes faits pour le chlorure d'argent et le calomel.
Tous les réactifs capables, par exemple, de dissoudre le chlorure d'argent,
comme l'ammoniaque, le cyanure de potassium, l'hyposulfite de soude sont
aussi capables d'empêcher le chlorure d'argent de précipiter les solutions de
sérum, et d'y dissoudre le précipité quand il s'en est formé.

Tout cela prouve que ce sont les sels présents dans le sérum du sang qui
ont le rôle essentiel dans la formation des propriétés métalliques, et que
l'albumine n'est entraînée dans le précipité que par « voie mécanique », dit
M. Behring. J'aimerais mieux dire par voie d'adhésion moléculaire, car ce
mot implique, comme je l'ai montré dans plusieurs cas, une certaine
constance de composition, inférieure à celle que l'on rencontre dans les
composés chimiques, mais supérieure à celle qu'on peut attendre d'un phé-
nomène d'entraînement mécanique.

Quoi qu'il en soit, M. Behring termine son travail en retrouvant le fait,
déjà connu pour d'autres matières albuminoïdes, que du sérum de sang,
privé de sel par la dialyse, ne donne avec le bichlorure aucun précipité, et
s'empare avec raison de cet argument en faveur de sa thèse.

Dx.

108 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

F.GaiMM. Le Iribroiuophénolcorameantiseptique. Deztfsc/iemed. Wochenschr.,

4882, p. H2I.

Comme nous l'avons fait observer à diverses reprises, l'étude des anti-
septiques a quelque peine à sortir de la voie dans laquelle l'ont lancée les
premiers qui s'en sont occupés. Elle passe presque toujours par les mêmes
phases. Un antiseptique étudié et vanté par un savant est en général déprécié
par un autre savant qui l'essaye dans d'autres conditions ou sur d'autres
microbes. Pendant qu'on discute à son sujet, un praticien s'en empare et
lui trouve divers emplois. Là aussi, souvent des contradictions se produisent,
des contre-indications se révèlent. Les tissas qu'il s'agit de désinfecter ne
sont pas, en effet, matière de chimiste, et on no peut conclure de l'expérience
m vitro à l'essai sur un être vivant. Puis, quand l'antiseptique a réussi a
entrer dans la pratique, il y a dans son histoire une période brillante après
laquelle il décline et semble devenir incapable de produire les effets qu'on
pouvait lui demander à peu près sûrement jadis.

Cette décadence est un fait trop commun pour qu'on puisse l'attribuer
au hasard. Elle est le résultat d'un ensemble de causes complexes. Peut-
être y a-t-il un fait d'accoutumance, d'acclimatation, mais il y a sûrement
autre chose, la négligence dans l'emploi d'un corps devenu usuel, et surtout
les falsifications que l'industrie se hâte de faire subir à tout produit dont
la vente courante augmente.

Tous ces inconvénients, même le dernier, auquel il semble qu'il n'y ait
pas de remède, tiennent en grande partie, remarquons-le, à ce que d'un
bout à l'autre, l'étude de l'antiseptique est restée l'œuvre de l'empirisme
et non celle de l'expérience. Un antiseptique introduit dans une solution
organique, ensemencée ou non à l'avance, l'empêche de fermenter lorsqu'il
y atteint une certaine dose. Voilà à la fois le point de départ et la conclusion
de beaucoup de travaux sur la matière. Réduite à ces éléments, cette notion
est pourtant tout à fait insuffisante, parce qu'elle n'est que la traduction d'un
fait contingent, et ne vise aucune loi. Si encore on connaissait et on indiquait
toutes les conditions de contingence du fait qu'on mentionne! Mais pointl il
en est d'inconnues et de méconnues. Aussi n'est-il presque jamais arrivé '
que deux expérimentateurs, après avoir travaillé à se mettre dans les mômes
conditions, aient observé le même résultat. Aussi est-il quelquefois arrivé
que le même savant, recommençant ses essais à huit jours de distance,
aurait été amené à se contredire lui-même, si un instinct secret ne l'avait
arrêté dans cette voie périlleuse.

Ce n'est pourtant pas une raison pour dédaigner toute recherche sur ces
questions. M. Grimm nous apporte au sujet du tribromophénol des rensei-
gnements qui, tout incomplets qu'ils sont, sont les bienvenus. Ce corps est
le résultat de l'action du brome sur l'acide phonique. 11 est cristallisé en
aiguilles blanches, fusibles à 95°, et donnant en se refroidissant une masse
cristalline facile à pulvériser. Très soluble dans l'alcool, l'éther, le chloroforme,
il est peu soluble dans la glycérine, l'alcool étendu et l'eau. Les solutions de
gélatine nutritive en dissolvent des quantités variables avec leur degré d'al-

REVUES ET ANALYSES. 109

calinité, et qui oscillent à la température ordinaire, entre 2 gr. 5 et 3gr. 5
par litre.

Nous passerons rapid(Muent sur les résultats des expériences de stéri-
lisation de solutions organiques au moyen du Irilromophénol. Comme nous
le faisions remarquer plus haut, les chiffres individuels de ces diverses expé-
riences n'ont pas grande signification, et on peut résumer l'ensemble des
résultats de M. Grimm en disant :

Que le tribromophénol, dissous en proportion de 3 grammes par litre
dans de la gélatine nutritive, y empêche le développement des bactéries de
la putréfaction ;

Qu'avec les liquides animaux, dans lesquels ce corps est presque inso-
luble, il retarde la putréfaction sans s'y opposer d'une façon absolue;

Qu'il est plus actif avec l'urine qu'il peut stériliser à la proportion de
gr. l par litre ;

Qu'après un séjour de 30 minutes dans une solution ammoniacale de
tribromophénol à 1 0;0, ou après un séjour d'une heure dans une solution à
0,5 0/0, les bactéries de la fermentation putride sont devenues incapables
de se développer dans un nouveau milieu. Rien de moins précis que ces
mots de fermentation putride, mais il faut bien nous en contenter.

Ce qui est plus intéressant que ces conclusions, c'est l'étude de la façon
dont se comporte le tribromophénol sur les êtres vivants. Son odeur est
faible mais désagréable, et son contact irrite les narines. Sa saveur est mor-
dante, désagréable et persistante, mais il n'a aucun effet caustique sur les
muqueuses et sur la peau. Appliqué sur des blessures fraîches, il les cauté-
rise et les nécrose superficiellement. Il amène souvent de petites hémorragies
sur celles qui sont en voie de granulation, mais ne détruit pas plus profon-
dément les bourgeons, dont l'aspect s'améliore au contraire notablement.

Dans les procès purulents et gangreneux, le tribromophénol agit comme
un désinfectant énergique ; il active la démarcation et la séparation du tissu
nécrosé, et le développement de nombreux bourgeons. En général, les patients
le supportent bien. Comme il est sans action sur la peau, il peut servir à
imprégner de la gaze ou les linges de pansement.

M. Grimm a pu en absorber jusqu'à 1 gramme par jour, pris en plusieurs
doses, sans rien éprouver autre chose qu'un peu de malaise. Comine ce
corps ne se dissout pas dans les liquides de l'estomac, et qu'il peut au
contraire se dissoudre dans les liquides alcalins de l'intestin, il pourra
peut-être servira désinfecter le canal digestif dans certains cas de maladies
infectieuses ou de blessures, l.es expériences do Baumann et Herter [Zeitschr.
f. phys. Chemie, t. 1) prouvent qu'après dissolution dans le suc intestinal, il
est éliminé à l'état d'acide Iribromo-sulfophénique.

Dx.

A. LuBBERT. L'acide oxynaphtoïque. fortschr. d. Med., f. VI, p. 4, 1888.

Le corps essayé par M. Lubbert comme antiseptique résulte de l'union
d'une molécule d'acicïe carbonique à l'a Naphtol étudié par M. Bouchard,
et présente par suite vis-à-vis de cet agent les mêmes relations que l'acide

110 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

salicylique vis-à-vis de l'acide phénique. C'est un corps cristallisé, non com-
bustible, fusible à 186o avec un conimencenient de décomposition. 11 ne
se dissout dans l'eau que dans la proportion de 1 : 30,000, cette solubilité
diminue environ de moitié dans l'eau acide, mais augmente dans les solu-
tions alcalines, et aussi en présence des sels à réaction alcaline, tels que
le borax ou le phosphate de soude, avec lequel on peut avoir des solutions

à 4 Vo.

Ces qualités chimiques pourraient rendre très précieux, dans certains
cas, l'acide oxynaphtoïque, s'il est vraiment un antiseptique actif. C'est ce
que M. A. Lubbert s'est proposé de rechercher. Son ambition a même été
plus liaut, car voici son programme.

L'acide a oxynaphtoïque peut-il empêcher le développement des microbes
dans les milieux appropriés, et dans quelles conditions? Quelle influence
exercent sur ses propriétés aseptiques éventuelles la composition chimique
du milieu nutritif, la température, l'action de la lumière, et quelle est la
durée de l'action?

On ne saurait qu'applaudir à ce programme. Il embrasse quelques-uns des
points que nous n'avons cessé de signaler dans ces Annales, comme devant
entrer nécessairement dans une étude scientifique des antiseptiques. Mais
ce n'est pas tout que de faire un programme, il faut l'exécuter, et force
nous est de dire que M. Lubbert n'a pas touché au sien.

Quels moyens y avait-il de résoudre l'intéressante question qu'il s'était
posée? Celui-ci par exemple. Etudier dans un milieu donnné la valeur anti-
septique de solutions d'acide oxynaphtoïque de concentrations décroissantes,
s'arrêter à la solution la plus forte de celles qui permettent encore le déve-
loppement de l'espèce de microbe ensemencée, ou à la plus faible de celles
qui l'empêchent, et voir si en changeant les conditions 9e milieu, de tem-
pérature, d'insolation, etc., on est conduit à augmenter ou à diminuer, dans
une ou plusieurs expériences nouvelles ordonnées en série, la richesse en
antiseptique de ces deux liqueurs d'épreuve, qui représentent en quelque
sorte le papier rouge et le papier bleu qui servent à éprouver la neutralité
d'une liqueur.

Au lieu de suivre cette méthode ou toute autre équivalente, M. Lubbert
prend, dans celles de ces expériences qui ont pour objet la solution du
problème posé plus haut, une proportion d'antiseptique assez grande pour
qu'aucun développement de microbes ne se produise dans ses liqueurs,
qu'elles soient à l'étuve à 37» ou dans la chambre à 16°, à l'obscurité ou à
la lumière, protégées ou non par des écrans formés de solutions d'oxyde
de cuivre, ammoniacal, ou de chromate de potasse. Il n'est pas éloigné do
tirer la conclusion que toutes ces circonstances sont indifférentes. Il est
clair qu'il n'y a rien à conclure de ces expériences : le réactif manquait de
sensibilité.

Il n'y a même pas à en tirer la notion de la dose active de l'antiseptique,
car elle n'est pas indiquée. On voit bien dans le Mémoire qu'en présence
de 2 Vo de phosphate de soude, il faut 1 Vo d'acide oxynaphtoïque pour
antiseptiser l'urine, la solution d'extrait Liebig et le bouillon albumineux.
Mais M. Lubbert juge que la présence du phosphate de soude diminue la

REVUES ET ANALYSES. Hl

propriété antiseptique de l'acide. 11 en faut dune moins de 1 Vo dans les cas
ordinaires.

La seconde partie du travail de M. Lubbert est consacrée à l'étude de
celte question : peut-on, avec l'acide oxynaphtoïque détruire des cellules
adultes de microbes, humides ou sèches? ici, les conclusions sont plus
nettes. En introduisant dans un liquide en pleine putréfaction 0,75 Vo d'a-
cide, et en agitant, on trouve qu'au bout d'une heure le mélange ne peut
plus servir à ensemencer un nouveau milieu. En humectant avec une cul-
ture de Stapliylococcus pyogenes aureiis des cristaux d'acide oxynaphtoïque,
de façon à former avec ce mélange des granules qu'on ensemence, après
des temps variables, dans un bouillon alcalin ou sous la peau d'un lapin, on
trouve qu'après un à deux jours de contact, le coccus est devenu incapable
de se développer.

Les solutions à 1 : 30,000 d'acide dans l'eau se montrent à peu près
incapables de tuer des cellules en pleine évolution. Avec les solutions à
4 Vo qu'on réussit à obtenir en se servant comme adjuvant du phosphate
de soude, deux ou trois heures de contact suffisent à détruire le Staphylo-
coccus ou des bacilles charbonneux sans spores.

Les spores résistent davantage : ce n'est qu'après 6 jours de contact qu'on
les a trouvées mortes dans cette solution. Tous les autres modes d'emploi
de l'acide se sont montrés inactifs, même la solution alcoolique saturée.

Resterait à étudier l'action physiologique, qui se trouve à peine abordée
dans le Mémoire actuel. L'auteur promet sur ce sujet un nouveau travail
dont nous rendrons compte.

Dx.

INSTITUT PASTEUR

RENSEIGNEMENTS STATISTIQUES SUR LES PERSONNES TRAITÉES
PENDANT LE MOIS DE JANVIER 1888.

Personnes traitées mortes de rage.

Mazoyer (Joanny), 4 ans, de Saint-Albain (Saône-et-Loire),
mordu le 6 décembre 1887 à la face. Trois morsures sur le côté
droit du nez, une morsure à l'angle interne du sourcil droit, une
morsure sur le côlé gauche du menton, deux morsures à la lèvre
inférieure. En tout sept morsures à la figure. Toutes ont saigné.
Cautérisées au crayon Moscr trois heures après. Le chien mordeur
était inconnu au pays ; il a parcouru la commune après avoir
mordu plus de vingt chiens.

Il a disparu sans qu'on ait pu l'abattre.

Mazoyer a été traité du 12 décembre au 7 janvier 1888, il a été
pris de rage dans la nuit du 21 au 22 janvier. Renseignements
donnés par le docteur Padzinski, de Viré (Saône-et-Loire).

112

ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

INSTITUT PASTEUR

STATISTIQUE ' DU TRAITEMENT PRÉVENTIF DE LA RAGE. — JANVIER 4888

Morsures à la tète

et à la figure

simples . . .

multiples..

Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

u, . ( simples

Morsures aux mamsj Jip,es....

Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pau de cautérisation

Morsures aux mem-j simples

bres et au tronc j multiples.. . .
Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

Habits déchirés

Morsures h nu

Morsures multiples en divers points

du corps

Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

Habits déclarés

Morsures à nu

lO

Totaux. ! Français et Algériens..
i Etrangers

1^

3

o
18

22

17/,

30

/
A

Total général

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2

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3

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O

19|

lO

t. Pour rinterprélation des termes et la signification des diverses colonnes du
tableau, se reporter aux statistiques précédentes, p. 95, 143 et 207, t. 1.

Les animaux mordeurs ont été :

Chiens, M3 fois; chats, 4 fois ; vaches, 2 fois.

Le Gérant : G. Masson.

Sceaux. —Imprimerie Charaire et fils.

rV l '

2me ANNEE. MARS 1888. N° 3

ANNALES

DE

L'INSTITUT PASTEUR

LETTRE DE M. PASTEUR A M. DUCLAUX

Mon cher Duclaux,

Le D'' Gamaleïa, directeur de la clinique de la rage au Labo-
ratoire microbiologique de M. Metchnikoff, à Odessa, et le
Dr Bujwid, directeur du laboratoire antirabique de Varsovie, me
font part de résultats très dignes d'être publiés. Je laisse d'abord
la parole au docteur Gamaleïa :

... Pendant l'année 1887 nous avons vacciné 389 personnes, dont 38
avaient été mordues par des loups enragés, 348 autres par des chiens, des
chats, chevaux, ânes, porcs ; 3 n'avaient pas été mordues, mais travail-
lant au laboratoire, elles ont tenu à se garantir contre la possibilité d'une
infection rabique. Vous vous rappellerez qu'en 1886, 14 personnes, non
mordues, occupées au laboratoire, s'étaient également fait vacciner.

Des 38 personnes mordues par des loups enragés, 30 seulement ont pu
terminer leur traitement. De ces 30, une seule est morte de rage quelques
jours après la fin de ses inoculations. Les 8 autres, arrivées tardivement au
laboratoire et présentant des plaies extraordinairement graves, sont mortes
avant la fm de leur traitement — Pas moins de 15 personnes n'ont pu arri-
ver que 18 jours après l'accident. De celles-ci, 3 sont encore mortes pen-
dant leur vaccination. Restent 345 personnes dont la vaccination a été com-
plète et sur ce nombre nous n'avons eu qu'un seul cas de mort. C'était une
fille du nom de Korobtcherko, pour laquelle la méthode intensive n'a pas
été employée vu les froids de l'hiver. (Voir mon article des Annales de
M. Duclaux : Sur les vaccinations, p. 230, notel''".)

La méthode intensive n'a donc pas eu d'insuccès sur plus de 300 cas, si

8

H8 ANNALES DE L'INSTITUT PaSTEUR.

on ne coniple pas les plaies trop graves (jui ne laissent pas aux vaccinations
le temps nécessaire pour donner l'immunité.
■ Celte méthode a été la seule employée ici depuis le mois de février 1887 '.

Yoici maintenant la lettre du docteur Bujwid :

... J'ai obtenu du traitement intensif quelques succès que je désire
vous communiquer.

Ainsi que vous le savez, j'ai voulu d'abord constater si le traitement
simple est suffisant et dans quels cas. Chez plus de 200 personnes mordues
aux membres, j'ai obtenu des résultats qui me semblent très bons. Cependant
j'ai eu deux morts.

Dès le commencement du mois de février jusqu'au mois de juin 1887, j'ai
reçu 6 personnes grièvement mordues aux membres et au visage. Je leur ai
appliqué également le traitement simple en bornant les inoculations à la
moelle de 6 jours. Toutes, malgré le traitement, sont mortes de rage.

Le 21 juillet on m'a adressé deux paysans mordus très grièvement au
visage et à la tête par un loup enragé. J'ai poussé les inoculations jusqu'à
la moelle de 3 et 2 jours et je les ai répétées deux fois.

Un mois après on m'a envoyé deux autres personnes mordues par un
loup enragé, dans le même district : morsures également profondes, nom-
breuses à la tête et au visage. Le traitement a été aussi intensif que dans
les deux cas précédents.

La rage des deux loups a été confirmée chaque fois par trépanation de
leur cerveau à des lapins qui ont pris la rage en 15 ou 16 jours.

Jusqu'ici, c'est-à-dire depuis 8 à 9 mois déjà depuis leurs morsures,
ces quatre personnes sont en bonne santé.

Maintenant, chez nous, à Varsovie, la méthode Pasteur est de plus en
plus considérée comme la seule et unique méthode capable de sauver la
vie des personnes, mordues par des animaux enragés, même dans les cas
Les plus désespérés...

Jusqu'ici j'ai traité 400 personnes, avec 8 morts. Par l'application du
traitement intensif, j'ai traité 140 personnes, dont 7 mordues au visage et
à la tête et 4 par des loups enragés, sans aucun accident...

\. Je dois ajouter un détail intéressant de la lettre du D'' Gamaleïa, relatif au
charbon. (Fièvre charbonneuse.)

« J'ai préparé, dit-il, les vaccins charbonneux dans l'été de 1887, et j'en ai fait
l'épreuve en grand sur cent moutons. Ces cent moutons ont reçu le premier vaccin
le 9 décembre et le deuxième vaccin le 25 décembre. Pas un seul n'est mort. Tous
vont bien. Le 3 janvier, quatorze jours après le deuxième vaccin, dix de ces
moutons vaccinés ont été inoculés par le virus charbonneux virulent. Pas un des
dix n'est mort, n'a pas eu même la plus légère élévation de la température, qui a
été prise deux fois par jour. Le même virus virulent a été inoculé à trois moulons
non vaccinés: deux sont morts du charbon, les S^^ et 4.'- jour après l'infection ; le
troisième mouton a été gravement malade pendant 8 jours, avec une température,
reclale qui a atteint -il^jO; mais ce mouton a fini par se rétablir. »

LETTRE DE M. PASTEUR A M. DUCLAUX. 419

Je voudrais, mon cherDuclaux, ajouter quelques remarques
au sujet des virus et de leurs vaccins.

L'an dernier, dans la lettre que je vous ai adressée de Bor-
dighera sur la rage, et qui a paru dans le premier numéro de ces
Annales, le 2o janvier 1887, je constatais que la durée d'incuba-
tion de la rage chez nos lapins de passage, durée dont le terme
est fixé pour nous au début des premiers symptômes de para-
lysie, était encore de sept jours comme au temps du petit Meister
(le premier inoculé), mais avec tendance à descendre à six jours.
Nous étions alors au 433e passage; présentement nous avons at-
teint le 178^ et l'incubation habituelle, depuis une année environ,
est de six jours, mêlée encore à celle de 7 jours, une fois sur trois
environ. On peut considérer que le virus de passage par lapins
est arrivé à sa fixité. Pour en arriver là, quelle longueur de temps
écoulé! 11 n'a pas fallu moins de 4 à 5 années sans interruption
dans les passages successifs. Le virus des chiens des rues se
propageant par morsures de chien à chien depuis des milliers
d'années, doit être considéré également comme fixé. Entre ces
deux virus, celui du lapin et celui du chien, la différence est
certainement très grande, tant pour la durée d'incubation que
par les symptômes eux-mêmes de la maladie. La différence peut
rappeler celle que l'on observe entre le cow-pox et la variole.
Aussi je ne crois pas qu'on ait de motifs sérieux de considérer
ces deux dernières maladies comme distinctes l'une de l'autre.
Pour être éclairé sur la commune origine de ces affections, ce
n'est pas un ou deux passages du virus varioleux humain à la
vache, comme Ta fait en 1865, la commission de Lyon, qui
pourrait suffire à accuser une possibilité de transformation de la
variole en cow-pox. Il faudrait peut-être des centaines de passages
par la vache, pour obtenir un cow-pox propre à se conserver
ensuite de bras à bras avec des caractères spécifiques, si tant est
que la chose soit possible par ce moyen.

Je dois faire observer, d'autre part, que l'état initial d'un
virus qu'on fait passer à plusieurs reprises par une autre espèce
que celle d'où il provient, peut conserver pendant de nombreux
passages successifs les particularités de sa nature propre. Je
m'explique : Dans les inoculations préventives de l'homme, nous
nous servons encore de la série des lapins de passage employés
jadis pour Meister. Dans la crainte que par un motif quelconque,

120 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

cette série fût perdue, ou dût être abandonnée, j'ai l'ait mettre en

train depuis bien longtemps une autre série de passages de lapin à

lapin. Or, il n'y a pas eu parallélisme entre cette nouvelle série

et celle de Meister, quoiqu'on constate sur elle également le fait

général de l'augmentation de la virulence par les passages,

virulence mesurée par la diminution progressive de la durée de

l'incubation de la rage chez les lapins.

Dans une autre circonstance, dans une série de passages de

lapin à lapin, dont le virus de début provenait d'un singe, virus

qui, lui-même, provenait d'un chien des rues, l'accroissement de

la virulence par l'augmentation du nombre des passages a été

des plus lents, si bien qu'il fallut renoncer à conduire ce virus

à sa fixité, par la crainte d'avoir à y employer un trop grand

nombre d'années '.

L. Pasteur.

Paris, le 8 mars 1888.

1. .le reçois au dernier moment le compte rendu suivant des vaccinations faites
au Laboratoire liisto-bactériologique de la Havane, dirigé par M. le D'' Tamayo.
J'extrais ce qui sait de la lettre adressée à M. le Prof. Granciier :

« Le total des vaccinés, à la fin de décembre, était de 83. Il ne s'est produit
chez eux aucun cas de rage, bien que beaucoup d'entre eux eussent été mordus par
des animaux certainement enragés, comme on l'a démontré par des inoculations à
des lapins. C'est une preuve de plus en faveur du traitement de M. Pasteur.

« Notre journal, la Cronica medico-quirurgica, a publié, au mois d'août de l'an
dernier, et au mois de janvier 1888, nos statistiques avec des notes explicatives. «

SUR L\ TRALSM1^SI0\ IMRAPLACENTAIRE DES MICROORGAMSMES,

Par E. MALVOZ,

ex -préparateur à l'Université de Liège '.

Nous avons entrepris une série d'expériences pour recher-
cher par quel mécanisme s'effectue le passage des bactéries de
la mère au fœtus. Ces recherches nous conduisent à émettre
l'opinion que les microorganismes ne franchissent la barrière
placentaire, pour atteindre l'embryon, que dans les cas oii le
placenta présente des altérations histologiques des ^dllosités
choriales, lésions généralement dues à l'action pathogène des
éléments parasitaires eux-mêmes.

Nous renvoyons à un mémoire que nous avons déjà publié
sur ce sujet -, et que le présent travail est destiné à compléter,
pour l'exposé de l'historique de la question, tant au point do
vue clinique et anatomique que sous le rapport expérimental.
Rappelons seulement que, de toutes les maladies infectieuses et
vraisemblablement microbiennes, dont on a décrit des manifesta-
lions anatomiqueschez le fœtus, la variole occupe, certainement,
après la syphilis, la première place. Vient ensuite la tubercu-
lose congénitale, dont Johxe a rapporté le plus beau spécimen,
avec constatation des bacilles de Koch dans le foie d'un jeune
veau, exemple à côté duquel se placent les cas de Lydïi\,
ScHWANEFELD, otc, chez les animaux, et de Merkel et Charrin
dans Tespèce humaine ^

i. Travail du laboratoire du professeur Firket, à Liège, et de MM. Cornil et
ChaiNtemesse, à Paris.

2. Ces recherches ont été publiées par les soins du .Ministère de l'instruction
publique de Belgique : Sur le mécanisme du passage des bactéries de la mère au
^œ/MS,par le docteur E. Malvoz. Mémoire présenté au concours pour la collation des
bourses de voyage et agréé par le jurj/. Bruxelles, iSS".

3. L.\NDouzY et QuEYRAT out aussi tuberculisé des animaux par l'inoculation de
fragments d'organes provenant de fœtus de mères tuberculeuses.

122 ANNALES DE LINSTIÏUT PASTEUR.

La rougeole, la scarlatine, la morve (Loeffi.er, Cadéac et
Mallet), la pneumonie croupale (Thorner), la fièvre récurrente
(Alrrecht, Spitz), l'érysipèle, etc., constitueraient autant d'af-
fections susceptibles de passer parfois de la mère à l'enfant. Spitz
aurait même retrouvé les spirilles de la fièvre récurrente et
Lebedeff les cocci de l'érysipèle dans les lésions présentées par
l'embryon, Sangalli et Marchand ont aussi décrit le passage du
bacillus anthracis chez des fœtus humains dontles mères avaient
succombé à l'infection charbonneuse. Citons enfin, pour être
complet, la constatation du bacille de Gaffkij dans la rate d'un
embryon dont la mère était atteinte de typhus abdominal (Neu-
HAUSs), et la présence du bacille-virgule de Kocn chez un fœtus
humain, signalée par Tizzoni et Cattani.

Ces nombreux faits cliniques et anatomiques, relevés par
tant d'auteurs différents, ont soulevé depuis longtemps le pro-
blème du mode de passage des microorganismes à travers le
placenta, et bien des recherches expérimentales ont été déjà en-
treprises dans cette direction. Tandis que, pour le charbon, on
admit longtemps, sur la foi de Bralell, Davaine, Bollinger, que
le placenta se comportait comme un filtre parfait, protégeant le
fœtus contre l'invasion bacillaire, les travaux de Straus etCuAM-
BERLAND, de PERRONcno, démoutreut au contraire le passage pos-
sible du bacille à l'embryon. Dans ces derniers temps, Wolf,
ayant repris ces recherches, n'obtint que des résultats négatifs
chez le lapin, tandis que Koubassof, chez le cobaye, arrivait au
contraire à retrouver les bacilles charbonneux chez l'embryon
par le seul examen microscopique, alors que les autres obser-
vateurs n'avaient jamais constaté le passage que par les cul-
tures.

On observa aussi expérimentalement la transmission au fœ-
tus du microbe du charbon symptomatique (Arloing, Gornevin et
Thomas), du choléra des poules inoculé au lapin (Chambrelent),
de la septicémie des lapins (Kroner), du streptococcus de la
pyémie(SiMONE), du rouget et même du bacille tuberculeux ^{Kqm-

BASSOF

j-
C'est en présence des résultats mal concordants obtenus par

1. L'expérience sur laquelle se base Koubassof pour affirmer le passage du ba-
cille lubarculeux^ à l'embryon nous semble trop mal iuslituée pour qu'on puisse en
tirer une conclusion définitive (Y, Complet rendus, 1883),

TRANSMISSION PLAGENTAIHE DES MICROBES. d23

les divers expérimentateurs qui ont étudié le passage du char-
bon au fœtus que nous avons repris ces recherches. Nous nous
sommes entouré des conditions d'expérimentation les plus rigou-
reuses. Nous avons eu recours non seulement h. l'examen micros-
copique, mais encore à la méthode plus siire des cultures et des
inoculations à d'autres animaux. Toujours, nous avons fait des
cultures comparatives des organes maternels et fœtaux. Les fœ-
tus étaient lavés soigneusement au sublimé, puis à l'alcool ab-
solu et à l'eau stérilisée, avant leur ouverture. C'est le foie fœtal
qui a surtout servi à nos ensemencements : en effet, le sang- de
la veine ombilicale se rend directement à l'organe hépatique.
Nous avons aussi cultivé le sang- du cœur droit, car on sait
qu'une partie du sang- de la veine ombilicale se rend à la veine
cave inférieure et au cœur droit par le conduit veineux d'Aran-
tius. C'est d'ailleurs dans le foie qu'on a constaté de préférence
les altérations congénitales, rares il est vrai, de la tuberculose
et de la syphilis.

Nous avons inoculé le charbon à plusieurs lapines pleines :
toutes ont succombé. Sur les cent soixante-trois tubes ou pla-
ques * de cultures, ensemencés avec des fragments d'organes ^
provenant de trente-deux fœtus, quatre tubes seulement ont
montré la poussée caractéristique du bacillus anthracis. Dans
les nombreuses coupes des org-anes fœtaux que nous avons
faites, nous n'avons pu, par la méthode de Qram, retrouver des
bacilles charbonneux. Nous avons aussi réussi à faire mourir un
lapin en lui injectant un centimètre cube d'eau salée stérilisée,
dans laquelle nous avions broyé un foie fœtal tout entier. Mais,
dans les mêmes conditions^ 3 autres lapins n'ont pas succombé.

Ces résultats démontrent que si le bacille charbonneux, chez
le lapin, peut passer au fœtus, ce n'est qu'en très faible quantité
et dans la minorité des cas.

Tels étaient les résultats auxquels nous arrivions, résultats
assez semblables à ceux de Straus et Chamberland, quoique

1. Nous ne nous sommes pas contenté d'ensemencer des tubes de gélatine
nutritive, nous avons fait également un très grand nombre de cultures sur
plaques, parce que nous voulions éventuellement comparer le nombre des colo-
nies données par les organes maternels et fœtaux.

2. Nous avons ensemencé de petits fragments d'organes, du foie surtout, et
non le sang obtenu par a«!piration, parce que Kocbassof dit avoir observe' les ba-
cilles hors des vaisseaux.

124 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

moins positifs, mais entièrement ditférents de ceux qu'avait
observés Koubassof, qui considère le passage du charbon au
fœtus comme un fait à peu près constant, normal.

Nous avons aussi inoculé le choléra des poules au lapin,
comme l'avait déjà fait Chambrelem. Ainsi que ce dernier, nous
avons obtenu des résultats entièrement positifs, c'est-à-dire que
les cultures des foies fœtaux ont toutes donné un développement
des organismes de celte affection : nous avons remarqué cepen-
dant que la poussée des colonies sur gélatine était bien moins
riche dans les cultures provenant des embryons que dans les
tubes ensemencés avec les organes maternels.

'O'

Il s'agissait d'interpréter les résultats contradictoires obtenus
par les divers auteurs à propos du charbon. Le travail très im-
portant de Wyssokowitsch attira vivement notre attention. Ses
recherches, qui ont été résumées dans ces Annales^ démontrent
qu'à l'état normal les membranes dites filtrantes (reins, mu-
queuse intestinale, etc.), ne sont pas perméables pour les bac-
téries ; que ce n'est qu'exceptionnellement que le sang se débar-
rasse au dehors des éléments étrangers qui ont pu l'envahir, et
seulement clans les cas où il existe des lésions (hémorragies, in-
farctus, petits abcès, etc.) des organes excréteurs. Ces résultats
sur le sort des microorganismes en circulation dans le sang
avaient d'ailleurs été observés autrefois par Ponfick, Hofmann
et Langerhans, etc., dans des expériences d'inoculations de parti-
cules inertes insolubles (cinabre, indigo, etc.).

Wyssokowitsch constate que si Ton introduit dans la circu-
lation les bactéries les plus diverses, pathogènes ou non, tou-
jours le sang s'en débarrasse rapidement, et les microbes, tout
comme les particules inorganiques, vont se localiser dans cer-
tains organes de prédilection, qui sont le /oz>, la rate, la moelle
osseuse. Les microorganismes sont-ils pathogènes pour l'animal
en expérience ? Dans ce cas, il se produira au point où ils se
sont primitivement fixés, dans un des organes susnommés, une
multiplication sur place des parasites, et ceux-ci se déverseront
delà dans l'organisme. Dans le cas contraire, ils seront véritable-
ment digérés, après absorption par les cellules endothéliales,
et peu à peu, ils disparaîtront, c'est-à-dire que les ensemence-
ments de ces organes seront dès lors stériles.

TRANSMISSION l^LACENTAIRE DES MICROBES. 125

Mais Wyssokowitscii n'avait pas étudié comment se com-
porte, à ce point de vue, l'organe placentaire. Celui-ci est très
vascularisé, la circulation y est lente. Ne peut-il pas, lui aussi,
constituer un terrain de prédilection pour la fixation des élé-
ments étrangers entraînés parle sang, au même titre que le foie,
par exemple ? S'il en est ainsi, il est clair que cette propriété
constituera une circonstance favorable à l'atteinte du fœtus par
les bactéries; dans le cas contraire, l'embryon jouira déjà d'une
sorte do protection, faible peut-être, mais réelle, contre l'en-
vahissement parasitaire.

D'autre part, le placenta ne pouvait-il pas être assimilé aux
organes rénaux, au point de vue de la filtralion des microor-
ganismes, et, de la même façon que les bacilles du charbon ne
se retrouvent dans l'urine qu'à la suite d'hémorragies ou d'au-
tres lésions rénales, ainsi ils n'atteindraient le fœtus qu'après
avoir altéré les villosités placentaires?

Tels sont les deux points que nous avons essayé de mettre en
lumière.

En inoculant le charbon à des lapines pleines, et en ense-
mençant des plaques de gélatine avec des fragments sensible-
ment de même volume du foie maternel et des placentas, nous
avons toujours constaté que le nombre des colonies était bien
plus abondant sur les plaques fournies par le foie. Tandis qu'on
ne pouvait pour ainsi dire pas compter les colonies dans ce der-
nier cas, on en trouvait en moyenne de 13 à 20 par centimètre
carré quand il s'agissait des cultures placentaires. De même, la
liquéfaction est plus rapide dans les tubes ensemencés avec le
foie que dans les tubes du placenta.

Si nous introduisions dans le système veineux de lapines en
g-estation des microbes non pathogènes, comme le micrococcus
prodigiosus, le micrococcus tetragcnus^ et qu'après quinze à vingt
heures nous pratiquions l'autopsie de l'animal sacrifié, tandis que
les cultures du foie, delà, rate nous montraient des colonies très
nombreuses, les placentas, ou bien n'en fournissaient pas, ou
ne nous donnaient qu'un développement bien moins abondant.

Enfin, en injectant à cinq lapines pleines, dans la veine del'o-
reille, ài^V encre de Chine broyée dans l'eau, nous avons retrouvé,
le plus nettement possible, les particules noires microscopiques
localisées dans le foie, la rate, la moelle des os, tandis que nous

126 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

ne retrouvions que difliciletnent quelques graniilalions perdues
dans les sinus placentaires.

Nous avons cru pouvoir conclure, en présence de ces résul-
tats, que le placenta ne constitue pas un organe de prédilection
pour la fixation des éléments étrangers en circulation dans le sang.

Ce fait acquis, par quel mécanisme les bactéries passent-elles
éventuellement au fœtus? Ne s'agit-il là que d'une simple /?/^r«-
tion ?

Dans nos inoculations de particules inertes d'encre de
Chine, nous n'avons jamais pu les retrouver ni dans la veine
ombilicale ni dans les organes fœtaux, résultats qui concordent
d'ailleurs avec les expériences de Jassinsky, Hoffbianx, Ahlfeld,
FehlixCt, etc.

Les microbes non pathogènes [microc. prodigiosus: micr.
tetragenus) se comportent de la même façon; les cultures des
organes fœtaux, dans nos expériences, sont restées stériles '.

Les éléments indifférents, particules inorganiques ou micro-
bes inertes, ne passent donc pas au fœtus. Il semble dès lors
qu'on soit autorisé à admettre que si des microorganismes pa-
thogènes [ôacilhis a7itkracis, etc.), pénètrent, dans certains cas,
presque dans le sang fœtal, ce n'est pas le fait d'une fdtration à
travers le placenta intact, mais seulement à la faveur des
altérations produites dans cet organe.

Et en effet, un examen attentif des placentas provenant de
nos inoculations de choléra des poules au lapin nous montra des
hémorragies^ reconnaissables même tnacroscopicjuement , et sié-
geant notamment dans la partie du placenta la plus rapprochée
de l'amnios. D'ailleurs, le choléra des poules inoculé au lapin
constitue précisément une des septicémies où les lésions hémor-
ragiques sont les plus communes (ecchymoses trachéennes, etc.).

Les placentas de nos lapines charbonneuses ne présentaient
pas de lésions du même genre : or, on se souviendra que nos
ensemencements fœtaux étaient le plus souvent stériles.

La loi générale de Wyssokowitsch semblait donc se vérifier
aussi pour le placenta, au même titre que pour les organes
rénaux : le passage des microorganismes au fœtus semblait
devoir être lié à des lésions anatomiques.

-l. Krukeraberg {Arch. fur Gynek.) a obtenu les mêmes résultats négatifs avec
l^i M. prodigiosus, chez les lapines pleines.

TRANSMISSION PLACENTAIllE DES MICROBES. 127

C'est alors que nous nous sommes demandé si ce mécanisme
du passage des bactéries à l'embryon, tel que nous le concevions,
nepouvaitpasexpliquer précisément pourquoi STRAUsetCuAMBER-
LAND avaient obtenu des résultats en général plus positifs que les
nôtres, bien qu'ils ne fussent pas toujours constants. Nous avions
pris des lapins pour pratiquer nos inoculations charbonneuses ;
Straus et Chamberland avaient expérimenté sur des cobayes.
Rien n'empêchait d'admettre que la constitution différente du
placenta d'un animal à l'autre, la fragilité plus grande des villo-
sités, la prédispo-sition plus prononcée des tissus du cobaye aux
altérations des éléments, ou toute autre cause analogue, pou-
vaient peut-être rendre compte de la différence des résultats.

Nous avons fait quelques expériences sur le cobaye : nos
résultats confirment bien ceux de Straus et Chamberland.

Le bacille charbonneux, inoculé au cobaye, passe bien plus
régulièrement au fœtus que chez le lapin; la moitii' de nos ense-
mencements, environ, ont montré la poussée de cobnies du char-
bon. Les résultats les plus positifs nous ont été donnés, encore
une fois, par les cultures de fragments de foies fœtaux. Mais il
est à remarquer que la liquéfaction de la gélatine était obtenue
bien plus tardivement dans ces tubes que dans les cultures cor-
respondantes des organes maternels; de plus, les colonies étaient
beaucoup plus clairsemées le long de la ligne de piqûre : ce qui
démontre que si les bacilles passent au fœtus, ce n'est qu'en très
petite quantité. Et, en effet, les coupes des foies fœtaux, traitées
par la nouvelle méthode de coloration de Weigert *, ne nous ont
montré que quelques rares bacilles, et seulement dans quelques
coupes ; la plupart n'en présentaient pas.

Ces résultats bien positifs que nous donnaient nos cultures,
devaient coïncider, si notre conception était exacte, avec des
lésions placentaires ; c'e^i ce que l'examen des placentas a pleine-
ment conhrmé.

Ces placentas mesuraient environ 4 centimètres dans leur plus
long- diamètre et 12 mm. d'épaisseur; nous en avons pratiqué de
grandes coupes comprenant toute la section de l'organe.

A l'œil nu, mais mieux encore à la loupe, on distingue nette-
ment dans le placenta du cobaye des cloisonnements assez épais

■1. Coloration au me'thyl-violet, puis iod>i, et différenciation par l'/tiu/c d'aniline,
au lieu d'alcool absolu.

128 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

qui parlent de la caduque utérine, et vont directement, à peu
près en ligne droite, jusqu'au voisinage du chorion, traversant
ainsi le placenta de part en part : ce sont les septa placentaires
divisant l'organe en cinq ou six cotylédons, mesurant chacun à
peu près 7 à 8 mm. d'épaisseur.

A un faible grossissement, on trouve dans ces septa la coupe
de nombreuses veines, dépendant des veines utérines et par
conséquent en rapport avec la circulation maternelle.

Au centre de chaque cotylédon, dans l'axe de celui-ci, le
plus loin possible des veines précédentes, on aperçoit la coupe
de deux ou trois vaisseaux assez larg-es, constituant des dépen-
dances de la veine ombilicale, qui, on le sait, fournit une bran-
che à chaque cotylédon. De ces vaisseaux centraux partent un
grand nombre de ramifications, se divisant el se subdivisant à
l'infini, comme les villosités choriales elles-mêmes, et se termi
nant en fins capillaires, dont on aperçoit la coupe dans les der-
nières expansions du chorion.

De la même façon, les grands septa intercotylédonaires en-
voientdes cloisons qui vont s'insinuer entreles ramifications de i
villosités, pour constituer un enchevêtrement très serré, telle-
ment qu'il est bien difficile, dans le tissu qui constitue la masse
principale du cotylédon, de distinguer nettement ce qui dépend
de la circulation fœtale de ce qui appartient au réseau maternel.
Il n'y a guère qu'au centre du cotylédon qu'on voit très bien la
coupe de deux ou trois vaisseaux dépendant certainement de la
veine ombilicale : on peut être sûr que le sang qu'ils contiennent
appartient au fœtus.

A l'œil nu, mais mieux à la loupe, on peut distinguer, parti-
culièrement au voisinage du point de pénétration des septa
intercotylédonaires, de petits points hémorragiques très nom-
breux, assez serrés les uns contrôles autres; mais ils apparais-
sent surtout quand on examine les coupes avec un faible grossis-
sement. Nous n'avions pas trouvé, dans les placentas de nos
lapines en gestation, des foyers du même genre.

Dans les mêmes coupes, traitées par la méthode de Weigert
pour faire apparaître les microorganismes, on trouve une dis-
position très curieuse et très intéressante des bacilles charbon-
neux, disposition qui mérite d'être signalée parce que nous
n'avons lu nulle part cette description.

TRANSMISSION PLACENTAIIIE DES MICROBES. 129

Dans la lumière des veines situées à Tintérieurdes septacoly-
lédonairos, par conséquent dans des vaisseaux dépendant de la
circulation nialernelle , les bacilles existent presque toujours en
grand nombre, pressés les uns contre les autres. A partir de ces
&epta, des traînées bacillaires rayonnent en suivant la direction
des cloisons secondaires qui en partent, et en se dirigeant vers
la veine centrale du cotylédon, qu'on sait être une division de la
veine ombilicale. Mais^ tandis que les tramées de bacilles sont
fort serrées au voisinage des cloisons intercotylédonaires, les
bactéridies deviennent de plus en plus clairsemées au fur et à
mesure qu'on se rapproche de l'axe central du cotylédon, et, si
dans les deux ou trois grands vaisseaux qui existent en ce point
on peut distinguer quelques bacilles, ils sont bien moins nom-
breux que dans la lumière des veines maternelles : le contraste
est très net, très frappant et visible dans presque toutes nos
coupes. C'est bien là la preuve que les bacilles passent dans le
sang fœtal, mais seulement en très petite quantité.

Dans les petits foyers hémorragiques très nombreux déjà
signalés, on voit souvent des bacilles, dont la disposition en chaî-
nettes semble indiquer que ces éléments parasitaires se sont
multipliés au sein même de la lésion.

Tout le monde admet aujourd'hui qu'il n'y a pas de commu-
nications directes entre le sang maternel et le sang fœtal. Ces
hémorragies rendent très bien compte de la façon dont le
passage d.es bacilles au fœtus s'effectue : il sufht qu'en quelques
points il se développe de petits foyers destructifs pour mettre en
rapport immédiat et le sinus placentaire charriant le sang
maternel et le capillaire d'une villosité choriale. De la sorte, les
bacilles pénètrent, par une véritable effraction, peut-on dire, et
non par lillration, jusque dans le sang fœtal.

jNous pensons que ces recherches démontrent, le mieux pos-
sible, que le passage des microorganismes au fœtus est lié à des
lésions anatomiques; dès lors, on ne peut admettre, avec
KouBAssoF, que cette transmission soit un fait constant : elle
sera aussi variable et aussi inconstante que les propriétés des
éléments parasitaires eux-mêmes. Certes, il est toujours difficile

130 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

de critiquer des reciierches qu'on n'a pas suivies, et dont on ne
possède qu'un exposé sommaire. Cependant, le fait que Koiibassof
ait pu, seul jusqu'à maintenant, observer aussi fréquemment le
passage des bactéries au fœtus, et par le seul examen microsco-
pique, la façon dont il a expérimenté avec le bacille tuberculeux
pour démontrer la transmission de celui-ci à l'embryon, ces rai-
sons nous autorisent à faire nos réserves sur les résultats qu'il
a publiés. Ajoutons que nos considérations sur le mécanisme du
passage intra-utérin des microorganismes sont précisément le
contrepied d'une des conclusions de Koubassof; celui-ci, en effet,
se basant sur une seule ex-pénence.^ mal instituée, conclut que les
altérations placentaires empêchent au contraire le passage.

Si notre opinion est la vraie, on comprend de suite qu'il
faudra toujours tenir compte, dans l'appréciation de la possibilité
de l'atteinte du fœtus par un parasite déterminé, de diverses
circonstances : degré de virulence, atténuation plus ou moins
grande, action plus ou moins destructive sur les cellules et les
tissus, temps écoulé entre le moment de l'inoculation et la mort,
texture différente du placenta d'un animal à l'autre, et notamment
épaisseur très variable, suivant les espèces, de l'épithélium des
villosités, etc., etc.

Les altérations placentaires, inconstantes dans le charbon et
variables d'une espèce animale à l'autre (et ainsi s'expliquent les
résultats en apparence contradictoires obtenus par les divers
expérimentateurs), seraient au contraire la règle dans des mala-
dies comme le charbon sympt077iatique et surtout le choléra des
poules, affections où la transmission du microbe au fœtus a été
bien plus régulièrement constatée. Si on applique ces données
à des maladies comme la variole, le tuberculose, la pyémie, etc.,
on comprendra que le fœtus sera menacé chaque fois qu'il se .
sera produit une altération susceptible de rompre les barrières
cellulaires du placenta : point hémorragique dans la variole,
ramollissement d'une nodosité dans la tuberculose, foyer d'ab-
cession dans la pyémie. Et précisément, on a remarqué de tout
temps que la variole, chez la femme enceinte, se présentait sou-
vent sous la forme hémorragique, circonstance qui explique
très bien les lésions placentaires et les cas, déjà nombreux, de
transmission de variole au fœtus *.

1. Nous avons supposé, dans tout cet exposé, le fœtus menacé par des bactéries

TRANSMISSION PLACENTAIRE DES MICRORES. 131

A. côté de son intérêt pratique, la question du passage des
bactéries au fœtus touche encore à différents problèmes d'une
haute imporlauce scientifique. Pendant longtemps on admit,
comme une vérité classique, qne le placenta se comportait
comme un filtre parfait à l'égard des bactéries; ce fut même un
argument puissant dont se servirent ceux qui soutenaient alors,
comme on l'admet généralement aujourd'hui, que l'infection est
directement liée à la présence des parasites, puisque les inocu-
lations de sang- fœtal, libre de microorganismes, ne donnaient
pas le charbon. Il y a quelques jours à peine que Chauveau, à
l'Académie des sciences, vient d'invoquer de nouveau l'opinion
ancienne pour démontrer que l'immunité dans les maladies
infectieuses doit être attribuée à la présence d'une substance
soluble laissée dans le corps par le passage du microbe pathogène.
Chauveau a observé que chez les brebis pleines qui meurent du
charbon, les bacilles fourmillent dans le sang- de la mère et ne
passent point dans le sang du fœtus ; or, les agneaux nés de
mère inoculée du sang de rate pendant la gestation deviennent
tous réfractaires à l'action du virus charbonneux. C'est du moins
ce que Chauveau a noté depuis longtemps. Donc la vaccination
congénitale ne peut être due qu'au passag:e d'une substance
soluble à l'embryon.

Chauveau démontre le non passage du microbe par l'examen
microscopique et par l'inoculation du sang du cœur à d'autres
animaux.

Or, l'examen microscopique, nous l'avons montré, après
Straus et Chamberland, est insuffisant. Quant aux ensemence-
ments du sang du cœur, ils restent bien souvent stériles, alors
que ceux du foie fœtal donnent un développement de colonies;
c'est en effet au foie que la plus grande masse des bactéries est
apportée par la veine ombilicale.

Enfin, il est difficile, nous semble-t-il, d'affirmer, sur la foi

en circulation dans le sang maternel. Le fait constaté que des affections comme
la rage, Vcrj/sipcle, dont le microbe ne semble pas envahir le sang, seraient parfois
susceptibles de se transmettre à l'embryon, conduit à penser qu'il s'établit peut-
être dans certains cas des l'elations entre le fœtus et la mère par d'autres voies
que la voie sanguine. Lebedeff a même cru pouvoir expliquer le passage du coccus
de Fehleisen à l'embryon par les lymphatiques du cordon. C'est là tout un nou-
veau côté de la question, que nous ne faisons qu'indiquer en passant.

132 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

de quelques expériences négatives, que, dans tous les cas d'in-
fection maternelle, le fœtus est resté indemne, parce que rien
n'est plus variable et plus inconstant que les altérations histo-
logiques provoquées par les microorganismes, notamment dans
le placenta, et auxquelles il faut rapporter, nous croyons du
moins l'avoir démontré, la cause du passage à l'embryon. Le
problème serait évidemment bien plus facile à résoudre s'il ne
s'agissait pas d'une simple filtration; dans ce cas, il suffirait de
quelques expériences pour se rendre compte si, oui ou non, les
bactéries franchissent le placenta.

Enfin, il est à remarquer que l'infection charbonneuse chez
la brebis dispose précisément à des lésions hémorragiques, sou-
vent très prononcées. Nous pensons donc qu'il y aurait lieu de
soumettre à quelques expériences nouvelles la question du pas-
sag-e du charbon au fœtus chez la brebis, avant de pouvoir décla-
rer définitives les conclusions du savant professeur du Muséum.

LE VIRIS RABIQl'E DES CHIENS DES RUES DMS SES PASSAGES

DE LAPIN A LAPIN,

Par m. ANDRÉ HOGYES,

Professeur à l'Université de Budapest.

Je résume dans ce travail les observations, que j'ai faites
depuis deux ans, à propos de mes recherches sur le traitement
antirabique pastorien. Je m'y étais proposé, d'abord d'obtenir un
virus fixe d'une pureté parfaite, puis d'étudier les changements
que subissent les propriétés du virus rabique des chiens de rue
lorsqu'on le fait passer successivement de lapin à lapin.

Ces observations s'accordent en général avec celles de
M. Pasteur, et peut-être suffirait-il de n'en donner qu'un court
résumé. Si je les développe davantage, c'est d'abord que, à ma
connaissance, celte partie des expériences de M. Pasteur n'a pas
encore été répétée sur une aussi large échelle, et n'a pas été
encore publiée avec les détails nécessaires, puis parce je crois
pouvoir ajouter quelques détails nouveaux, qui nous permettent
de nous orienter plus aisément dans l'appréciation de l'état de
\irulence du virus rabique ; et enfin parce que ces expériences
forment la base d'un prochain Mémoire sur la pathologie et la
thérapeutique expérimentales du traitement antirabique pasto-
rien.

Dans la série d'expériences dont je vais parler, c'est la moelle
d'un chien enragé, provenu de l'École vétérinaire de Budapest,
qui m'a servi de point de départ. J'ai fait les inoculations suc-
cessives sous la dure-mère, ce qui, je m'en suis convaincu par
des expériences préliminaires, est le plus sur moyen de provoquer
la rage. Cette méthode est plus sûre que même l'inoculation
directe sur le plancher du quatrième ventricule.

9

iU ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Au lieu du bouillon stérilisé, j'ai délayé la moelle dans une
solution stérilisée de sel marin à raison de sept pour mille. Au
lieu du trépan ordinaire, je me sers du dental enghie de White
avec lequel on peut scier ou forer, vite et facilement, une petite
ouverture dans le crâne du lapin ou du chien.

Nos races de lapins diffèrent un peu des races françaises.
Nos animaux sont en général plus petits. Lorsqu'ils ont atteint
toute leur croissance, leur poids varie de 1,000 à 2, 500 grammes;
mais on peut les employer même dans leur jeunesse, lorsque leur
poids est de 700 à 1,000 grammes.

J'ai fait une certaine sélection entre les lapins pour mes ino-
culations successives. Dans les premiers passages,je n'ai employé
que déjeunes lapins, espérant par là arriver plus vite à un virus
stable. Je m'appuyais sur l'expérience de M. Pasteur que
l'incubation de la rage chez les jeunes animaux est plus courte
que chez les vieux. De plus, comme à chaque passage j'inocu-
lais toujours plusieurs lapins, j'ai toujours pris le virus, pour le
transporter au passage suivant, sur l'animal qui mourait le pre-
mier. L'expérience a répondu à mon attente, et je suis ainsi
arrivé assez vite à fixer la virulence, ainsi que je le prouverai plus
loin.

Le nombre des inoculations faites dans les 77 passages que
j'ai atteints jusqu'ici a déjà dépassé mille. Le nombre des inocu-
lations faites seulement pour la conservation du virus est à peu
près de 476, ce qui est suffisant pour juger des changements de
nature de la rage des chiens de rue pendant les inoculations
Successives.

Comme nous ne connaissons pas encore les microbes de la
fage, ni les changements chimiques que subit le système nerveux
devenu virulent, nous ne pouvons juger de ces changements de
nature du virus rabique que par les effets physiologiques qu'il
amène sur les fonctions des animaux infectés.

On sait que ces effets consistent dans l'apparition de certains
symptômes nerveux après une période plus ou moins longue
d'incubation. Ces symptômes nerveux sont en général très va-
riables. Ils se traduisent soit par un état de surexcitation (rage
furieuse) qui passe avant la mort à un état d'épuisement, soit
par l'apparition d'emblée de phénomènes de paralysie des
extrémités postérieures ou antérieures, qui s'étendent successif

LE VIRUS RABFQUE DES GlflENS DES RUES, ETC. 138

vemoiit sur le corps tout entier et ne finissent que par la mort
(rage paralytique). iMais il y a encore des cas mixtes où les symp-
tômes de l'irritation et de la paralysie apparaissent à peu près
simultanément. Les animaux ne peuvent par exemple pas remuer
leurs extrémités postérieures et malgré cela leur tête et leurs
extrémités antérieures sont dans un état de surexcitation. Il
arrive aussi, quoique rarement, que l'animal inoculé périt sans
aucun symptôme nerveux, dans les délais normaux, et que l'ino-
culation seule de sa moelle prouve qu'il est mort de rage.

Si on veut faire une statistique sur les inoculations succes-
sives, il faut, je crois, établir pour ces cas une troisième caté-
gorie, la catégorie des cas mixtes.

Les phénomènes nerveux finissent par la mort, qui vient le
2% 3^ ou4® jour après leur première apparition: cette période estla
durée de la rage^ et la comparaison des dates de l'inoculation
sous la dure-mère, de la première apparition des symptômes
nerveux, et de celle de la mort, offre unebase suffisante pour juger
des changements du virus pendant la longue série des inocula-
tions successives de lapin à lapin.

Voici la statistique de mes résultats. J'ai fait 77 passages suc-
cessifs, dans lesquels j'ai inoculé 476 animaux ; 167 ont été
atteints de rage furieuse, 165 de rage paralytique, et 144 de la
rage à symptômes mixtes.

Quant à l'histoire résumée de chacun des passages, on la
trouvera dans le tableau ci-après, dans lequel les gros chiffres de
la colonne horizontale P représentent les numéros des passages
1 à 77. à dater du 27 février 1886 jusqu'à la fin février 1888. Les
petits chiffres de la colonne N sont les nombres des lapins ino-
culés dans chaque passage. Au-dessous du chiffre de chaque
passage sont notés en m la durée en jours de la survie après
l'inoculation, en i la durée de l'incubation, comptée du jour de
l'inoculation jusqu'à la première apparition des symptômes ner-
veux. La différence entre ces deux chiffres donne la durée de la
période de rage déclarée. Ils servent tous à apprécier la virulence
du virus employé.

Leur signification apparaît mieux si on les représente dans
un graphique dont les ordonnées, correspondant à chacun des
passages, présentent, en trait fin, la période d'incubation, et en
trait plus gros la période de rage déclarée pour cha^jue passage»

i3é

ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Tableau statistique du résultat des 77 inoculations successives
de lapin à lapin du virus rabique des chiens des rues.

p

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

N

2

•2

8

9

8

6

8

7

5

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21,0

17,5

14,7

14,4

12,5

10,8

14,1

12.5

12,5

11,8

i

18,0

14,0

12,5

12,5

10.0

9,3

11,0

9,8

10,4

8,1

P

11

12

13

14

15

16

17

18

19

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N

16

10

20

11

4

5

6

6

5

6

m

10,6

10,3

9,9

9,3

9,3

8,8

10,1

.9,1

9,4

9,0

i

8,8

8,4

8,3

7,5

7,9

6,4

8,3

8,1

8,2

7,7

P

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

N

7

7

6

8

8

6

10

8

7

15

m

7,o

7,5

8,3

8.3

8,8

8,6

8,2

7,8

8,8

8,2

i

6,1

6,3

6,1

7,0

0,9

7,5

7,2

6,6

7,3

6,6

P

31

32

33

34

35

36

37

38

39

40

N

7

6

7

8

9

8

3

4

7

.3

m

8,1

8,4

8,0

8,2

8,5

8,8

10,0

9,6

9,0

9,5

i

6,7

7,1

6,0

6,7

6,9

7,0

7,3

8,0

6,7

7,4

P

41

42

43

44

45

46

47

48

49

50

N

5

9

8

6

6

6

8

5

5

4

m

8,8

8,8

8,8

9,0

9,5

9,1

9.3

9,1

9,1

8,2

i

6,4

7,3

7,7

7,6

7,3

7,3

7,5

6,8

7,0

7,0

P

51

52

53

54

55

56

57

58

59

60

N

3

6

6

6

5

7

7

7

4

ni

9,6

9,2

8,2

8,6

8,6

8,6

8,8

9,0

9,0

8,5

i

8,0

7,0

6,0

6,6

6,8

6,6

6,0

6,3

6,7

6,5

P

61

62

63

64

65

66

67

68

69

70

N

7

6

4

1

2

4

3

5

5

m

9.0

8,3

8,5

8,0

8,3

9,1

9.1

8,8

9,0

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i

6,8

6,8

6,7

6,0

6,0

6,5

7;6

7,2

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7,6

P

71

72

73

74

75

76

77

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5

4

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1

5

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8,5

8,0

7,6

9,0

9,0

i

7,0

7,8

6,7

6,0

6,6

7,5

7,3

Les chiffres du tableau et du graphique de la page 137 sont
des nombres moyens, calculés en partant des chiffres individuels
de chacun des lapins inoculés à chaque passage.

Le nombre de ces lapins n'est pas toujours le même, mais
cette circonstance n'influe pas trop sur les valeurs moyennes
et n'empêche pas de se faire une idée générale des résultats.

LE VIRUS RABIOT'E DES CHIENS DES RUES, ETC. 137

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1

1 1

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138 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Si nous envisageons d'abord la durée de l'incubation, nous
voyons qu'elle a d'abord été de 19 jours, en moyenne, dans la
première inoculation du virus rabique d'un chien des rues à
deux lapins. Je suis tombé à peu près sur le même chiffre moyen
dans d'autres cas, oii j'ai inoculé le virus rabique d'un chien des
rues ou celui d'un homme enragé.

On voit ensuite que dans cette série, où je n'ai employé,
comme je l'ai dit, pour les inoculations successives, que de
jeunes lapins d'un poids de 800 à 1,000 grammes, la durée
moyenne de l'incubation décroît rapidement dès les premiers
passages. Elle est déjà tombée à 7 jours dès le 16^ passage, cinq
mois environ après le commencement des inoculations succes-
sives, et se maintient à ce niveau, oscillant entre 7 et 8 jours et
demi à travers tous les passages ultérieurs, pendant une année
et demie environ.

On trouve les mêmes résultats quand on considère la durée
moyenne de la survie. Elle descend aussi rapidement dès les
premiers passages, tout à fait parallèlement avec la diminution
de la durée moyenne de l'incubation, et reste, à quelques petites
fluctuations près, fixée de 8 et demi à 10 jours pendant la lon-
gue série des inoculations.

La durée moyenne de la rage déclarée ne change guère non
plus dans la série des inoculations successives. Après avoir été
quelquefois de 3 à 4 jours, à l'origine, elle n'est plus à la fin que
de 1 à 3 jours et reste à ce niveau. On ne relève pas non plus
de grandes différences dans la nature des symptômes nerveux
dans la série des passages.

Toutefois, quand on examine une à une, à chaque passage,
les durées de l'incubation et de la survie des animaux inoculés,
on trouve une certaine fluctuation d'un à plusieurs jours, plus
grande dans les premiers passages que pendant les passages ul-
térieurs. Cette fluctuation provient des différences dans le
poids et l'âge des animaux employés. Les jeunes animaux d'un
poids inférieur sont atteints de la rage plus vite, et après une
incubation moins longue, que les animaux vieux et plus pesants.

Commeje viens de le dire plus haut, dans les 21 premiers pas-
sages de cette série, jen'ai employépour les inoculations succes-
sives que de jeunes lapins d'un poids de 800 à 1,000 grammes.
Je crois que c'est à cela qu'est due la diminution rapide de la

LE VIRUS HAlUOn-] DES CHIENS DES RUES, ETC. 139

durée de rincubalion et de la survie, diminution qui m'a mis
enmesure d'obtenir la fixité du virus rahique en six mois envi-
ron, période proportionnellement très courte, comparée à celle
qui résulte des expériences de M. Pasteur. Dans une autre série
que j'avais entamée parallèlement, mais où j'avais employédes
lapins d'âges et de poids supérieurs, je n'ai pas réussi à réduire
si vite la durée de la survie, qui au bout du 15« passage n'était
pas encore tombée au-dessous de 15 jours.

Peut-on maintenant considérer comme fixé le virus rabique
de mes expériences? Je crois que oui, si le mot « virus fixe » est
pris dans son sens habituel. Il n'y a pas une différence considé-
rable dans ses etTets pendant les derniers 56 passages, qui com-
prennent une période d'une année et demie.

De plus, son degré de fixité est à peu près égal à celui du
virus rabique du laboratoire de M. Pasteur, ce que nous allons
démontrer par la comparaison suivante.

Il

J'ai fait deux fois cette comparaison. Une première fois, aux
mois d'octobre et de décembre 1886, j'ai comparé les 10 passages
21 à 30 de ma série, avec 10 passages du virus fixe de Paris
conservé par M. Babes dans son laboratoire par des inoculations
successives de lapin à lapin. Une seconde fois, après un an, de
la fin d'août 1887 à la fin de février 1888, j'ai comparé les 21 pas-
sages 57 à 77 de ma série avec 21 passages de ce même virus
fixe de Paris, mais conservé dans mon laboratoire par des
inoculations successives.

On peut voir dans le tableau graphique de la page 1 37 les résul-
tats de cette comparaison. Les passages 21-30 et 57-17 de ma série
surmontés de deux petits cadres où sont indiqués les résultats sont
des inoculations successives avec le virus fixe de Paris. Le pre-
mier petit cadre n° II donne la durée moyenne de la survie des
lapins des 10 premiers passages ; le second n° III donne la durée
moyenne de l'incubation et de la survie dans la seconde com-
paraison.

En comparant avec les passages correspondants du grand
tableau graphique n° I, on peut voir que dans le premier cas, la
durée moyenne de la survie a été de 7,5 à 8,3 jours avec mon

140 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUIl.

virus, et de 7,2 à 8,3 jours avec le virus de Paris. Dans le
second, les durées d'incubation ont été de 6 à 7,6 jours avec mon
virus, de 5,5 à 8 jours pour ceini de Paris. Les durées de survie
ont été de 8 à 9,4 jours avec mon virus, de 8,3 à 11 jours avec
le virus de Paris.

Il est évident, d'après cela, que la virulence du virus rabique
de Budapest dans les passages 21 -30 était déjà presque aussi grande
que celle du virus de Paris, qui pouvait déjà être à ce moment
à son 130^ passage, et cette parité ne semble pas s'être modifiée
après un an. Tous deu.x: avaient donc à peu près la même sta-
bilité.

Il

Nous avons encore à étudier deux autres elîets du virus
rabique : l'élévation de la température et la diminution du poids
du corps; tous les deux sont assez intéressants pour qu'on sur-
veille leur apparition au courant de l'infection et pendant les
inoculations successives.

Tous les deux devancent dans la plupart des cas l'apparition
des symptômes nerveux, et sont pour ainsi dire les premiers
symptômes de la rage. Ce sont eux qui indiquent la fin de l'in-
cubation et le commencement de la maladie. Le D' Lote, mon
assistant et mon collaborateur, a étudié avec grande assiduité dans
mon laboratoire les circonstances de leur apparition, et les résul-
tats de son étude ont été communiqués par moi à l'Académie
hongroise des sciences dans sa séance du 15 novembre 1886 '.
Il a relevé avec grand soin, et jour par jour, depuis celui de l'ino-
culation jusqu'à celui de la mort, le poids de 60 de nos lapins
inoculés dans les passages 5 à 15. Le commencement de la
diminution de poids coïncide en général avec l'apparition des
symptômes nerveux, la précède rarement, et ne la suit que dans
la minorité des cas. La perte, une fois commencée, va continuant
jusqu'à la mort, et peut s'élever jusqu'au 1/4 du poids originel.
Elle dépasse rarement cette limite ; elle se montre presque sans
exception dans tous les cas de rag'e, que l'incubation soit courte
ou longue, et même dans les cas mixtes dont nous avons parlé
plus haut.

1. Lote, Orvosihetilap. 1887.

LE VIIIUS HAmniU' DKS (JKIENS DES RUES, ETC. 141

Il n'est pas moins intéressant de suivre les observations
que M. Lote a faites à l'égard de la Ihermométrie de cette mala-
die, avec toutes les précautions que j'ai reconnues nécessaires
pour la thermométrie chez les lapins '.

Les conclusions principales à tirer de ces études sur la tem-
pérature de nos lapins sont qu'on peut distinguer chez €ux, à
partir du jour de rinocukition jusqu'à la mort, trois grandes
périodes. La première période est l'état afébrile, troublé
quelquefois seulement par une petite élévation de la tempéra-
ture passagère qui survient le lendemain de la trépanation,
et qu'on peut prévenir par une soigneuse désinfection. La
seconde phase est la période fébrile, suivie de la troisième
phase, la période de l'abaissement rapide de la température,
qui aboutit à la mort. |0n peut se faire une idée de la durée
de ces difterentes phases par les chiffres suivants calculés
pour la première ligne avec 12 cas et pour la seconde ligne
avec 7 cas examinés :

' Dufée totale
tlo la vie.

I. 8—9 jours.
II. 7 -S —

1" période.

4 jours 7 heures,
:j — 20 —

5' période.

2 jours 10 heures.
2 — t i —

.T période.

1 jour G heures.
l — —

La période fébrile commence généralement du quatrième
au sixième jour, après l'inoculation du virus de passage. L'élé-
vation de la température au-dessus de la température moyenne
de la période afébrile varie entre 1 et 2°. Elle est en moyenne
de 1",6. La durée de l'incubation n'a pas d'influence sur la
durée de la période fébrile.

De l'acmé de la fièvre, la température élevée descend géné-
ralement en 12 heures environ, quelquefois tout d'un coup, d'au-
tres fois plus ou moins lentement, à la température normale, puis,
de là sans interruption jusqu'à la mort, oii elle tombe presque
au niveau de la température ambiante.

Voilà ce qu'on observe presque sans exception chez les

1. HoGYEs. Remarques sur la méthode de mesure de la température rectale
chez les auiniaux. Orvosi lietilip. 1880, et Arch. far exp. Pathologie et Phnr/nakologie,
Bd. XIII.

142 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

lapins infectés avec le virus fixe, inoculé par trépanation. En
l'inoculant sous la peau, ou en inoculant sous la dure-mère un
virus atténué, on retrouve ces mêmes caractères de la marche
de la température. Il n'y a que la période afébrile qui soit
plus longue, correspondant à une plus longue durée de l'incu-
bation.

On ne trouve pourtant pas toujours cette régularité dans la
marche de la température après l'inoculation intracrânienne du
virus rabique des chiens des rues. Chez o lapins ainsi inoculés
avec la moelle d'une femme morte de la rag^e, et qui succom-
bèrent 15 à 21 jours après l'inoculation, il n'y a eu que dans un
seul cas une période fébrile, tandis que les autres symptômes ont
évolué régulièrement. Sur l.o lapins inoculés sous la dure-mère
avec la moelle rabique de chiens des rues, 5 n'ont pas eu la
période fébrile qui caractérise Teffet du virus fixe, tandis que
les autres symptômes ont apparu comme à l'ordinaire.

Dans les cas de rage avec longue incubation, on peut trouver
quelquefois, pendant la période afébrile, dans la marche de la
température, une petite élévation d'une durée de 12 à 24 heures,
qui, dans S de nos lapins, sur 12 inoculés avec le virus de chien
de rues, a été de 0,3 à 1 degré. Dans les cas de longue incubation
après inoculation du virus atténué, nous n'avons même pas
trouvé ces petites oscillations. Je ne crois pas devoir attri-
buer une importance quelconque à ces petites élévations de tem-
pérature, bien que M. Babès * y voie un symptôme prémonitoire
de la rage, d'abord parce qu'elles ne sont pas constantes, puis,
parce qu'on en observe souvent de pareilles avec des lapins en
pleine santé, comme on peut le voir dans les tableaux de M. Lôte
publiés dans son Mémoire susdit.

Quant à l'ordre chronologique des phénomènes principaux
de la rage expérimentale après l'inoculation du virus, voici ce
qui résulte de l'examen soigneux de 23 cas de rage. L'élévation
de température a toujours été le premier symptôme et a toujours
devancé l'apparition des symptômes nerveux; même, dans 6 cas,
la diminution de la température avait commencé avant que la
rag-e eût éclaté. Cette diminution de la température a coïncidé
13 fois avec l'apparition des symptômes nerveux et n'est sur-
venue après eux que dans six cas seulement.

i, Virchow's Archiv. 4887, p. 362.

LK VIRUS UAMIOUK DKS CHIENS DES HUES, ETC. 143

La diminulion du poids du corps a devancé dans 13 de ces
23 cas l'apparition de la rage, l'a accompagnée dans 10 cas, et
ne lui a succédé que deux fois. Dans 15 de ces 2o cas, elle a aussi
précédé la diminulion de température, et l'a accompagnée dans
9 cas; enfiu, dans 7 cas, on a vu apparaîlre simultanément les
symptômes de la rage, l'abaissement de température et la dimi-
nution de poids.

11 y a encore un symptôme à mentionner dans le cours de
la rage, que M. Lote a étudié avec soin chez 7 lapins infec-
tés. C'est la polyurie qui s'est montrée dans chacun des cas
examinés après l'apparition de la lièvre. Les animaux qui jus-
que-là n'urinaient, comme à l'ordinaire, qu'une fois tous les
deux ou trois jours, urinent plusieurs fois par jour jusqu'à la
mort. Cette polyurie a devancé, 5 fois sur les 7 cas examinés, le
commencement de la diminution définitive du poids, et la quan-
tité de Turine excrétée équivalait à peu près à la perte du poids
du corps. Il faut, par conséquent, attribuer en partie à la
polyurie la perte rapide du poids du corps pendant le cours de
la rage déjà déclarée.

Si nous cherchons maintenant à résumer les faits que nous
avons trouvés relativement au cours des phénomènes principaux
de la rage expérimentale, nous arrivons à formuler les conclu-
sions suivantes :

Les phénomènes produits par l'inoculation intracrânienne
du virus fixe se déroulent, chez le lapin, dans un ordre très régu-
lier du jour de l'infection jusqu'à la mort. îl n'y a d'abord
aucun changement dans l'étal des animaux. Ils mangent et boi-
vent comme à l'ordinaire, leur poids même peut s'accroître. C'est
la période de l'incubation. Puis, après 4-6 jours, apparaît la
période fébrile : la température monte subitement. Les animaux
ne semblent pas encore atteints, mais bientôt ils perdent l'appétit,
ils ne mangent ni ne boivent plus, et la diminulion de poids
s'accuse. Cet état fébrile fait place plus tard à la période do la
rage proprement dite, dans laquelle les symptômes de surexci-
tation ou de paralysie coïncident avec le commencement de
l'abaissement définitif de la température, et qui dure jusqu'à
la mort.

144 ANNAI.ES DE L'INSTITUT PASTEUR.

IV - •

De la nalure et de Tordre d'apparition des divers symptômes
de la rage, ou peut déduire quelque idée de leurs corrélations
patho-physiologiques. L'agent infectieux de la rage, quel qu'il
soit, microbe ou produits microbiens, porte d'abord son action
sur les parties du système nerveux central (moelle allongée),
qui dirigent la régularisation de la température; et celte action
peut être comparée à celle de certains alcaloïdes toxiques. Elle
amène d'abord de la surexcitation (fièvre) puis un épuisement,
(abaissement de température), etc. On peut regarder aussi la
polyurie comme un signe de l'affection de la moelle allongée,
vraisemblablement comme un trouble des centres du système
yasomoteur.

Les troubles des autres centres nerveux de la moelle et du
cerveau ne viennent que plus lard, après un certain progrès des
altérations matérielles dans les tissus nerveux. Ces troubles se
manifestent aussi d'abord par de la surexcitation, puis par de la
paralysie. Les deux phases se montrent dans la plupart des cas
de rage. Dans d'autres cas, la période de surexcitation est à peine
perceptible. Ce sont les paralysies qui prévalent dès le début
comme dans les effets de certains alcaloïdes, où une dose faible
produit d'abord une exaltation puis une paralysie des fonctions
des centres nerveux affectés, tandis qu'une forte dose amène
d'emblée la paralysie. Toute la scène de la surexcitation et de la
paralysie se déroule uniquement dans les centres nerveux. La
preuve, c'est que les nerfs périphériques conservent encore quel-
que temps leur irritabilité même après l'extinction de la circu-
lation et de la respiration; en excitant électriquement le nerf
scialique par exemple, ses extrémités postérieures tombent en
convulsion, bien qu'il ait déjà paru totalement paralytique du
vivant de l'animal.

V

En possession des données expérimentales susdites, il me
semble intéressant de les faire entrer dans ma comparaison entre
le virus fixe de Paris et celui de Budapest.

J'ai fait deux fois cette comparaison, une première fois vers

LE VIRUS RARIQUE DES CHIENS DES RUES, ETC. 145

la mi-décembre 188G,puis, une année après, au courant du mois
de décembre 1887.

Pour la première comparaison, j'ai pris 12 lapins ; dont 6 ont
reçu par trépanation du virus fixe de Paris provenant d'un lapin
mort en 7 jours 18 heures, et les 6 autres, du virus rabique du
29'"' passage provenant d'un lapin mort en 8 jours. Voici les obser-
vations pour un lapin de chaque série de ces inoculations paral-
lèles :

LAl'IN N° Oi3. VmUS DU LAliORATOIUE DIC M. PASTEUR

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1230

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27 »

VIIl

14°

17

1070

—

ne peut lever la tête.
Trouvé mort le matin. Perte totale, i'50 gr.

On voit que l'évolution du virus a été dans les deux cas à peu
près la même et a suivi la marche signalée plus haut. Pour mieux
faire ressortir ces ressemblances, j'ai résumé dans le tableau
suivant les résultats des expériences sur mes deux séries de
6 lapins : .

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ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

A. VIRUS FIXÉ DE PARIS (i30« passage).

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F, coniinenceinent de la fièvre, f, fin de la fièvre et commencement
de la perte de température, p, commencement de la perte de poids. R, com-
mencement des symptômes nerveux de la rage, m, moment delà mort.

En regardant ces tableaux synoptiques, ou voit que dans les
12 cas c'est la fièvre qui apparaît la première et dans le même
temps à peu près. On peut y voir aussi que l'ordre d'apparition
des symptômes principaux est le même dans tous les 12 cas :
fièvre, diminution de poids, apparition des premiers symptômes
nerveux, abaissement de température et etiuîi la mort.

LE VIRUS RABlnUbl DES CHIENS DES UUES, ETC. 147

Voici la marche de la température chez les 12 lapins à partir
de riiifection jusqu'à la mort.

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Les chiffres en caractère gras sont ceux de la période de fièvre.

148

ANNALES DE L'iNSTiTUT MSTÈUR.

Les données détaillées de la variation du poids du corps à
parlir de rinoculation jusqu'à la mort sont les suivantes :

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Les chiffres en caractère gras sont ceux d('
déclarée.

la période de rage

LE VmUS HABIQUE DES CHIENS DES RUES, E7C. 149

La ressemblance des variations de la température et dujDoids
du corps dans les infections avec ces deux sortes de virus est
inscrite pour un cas de chaque série dans les graphiques sui-
vants :

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b. Virus de Budapest.

L'astérique indi({ue la première apparition des symptômes rabiques, la
croix le moment de la mort ; la courbe supérieure est celle des températures,
la courbe inférieure est celle des poids.

En comparant toutes ces données expérimentales, on peut
voir qu'il y a identité dans les efTets de ces deux sortes de virus
rabique, tant pour leur degré de virulence que pour la nature et
le mode d'apparition des symptômes qu'ils produisent.

La seconde comparaison, après une année environ, m'a donné
des résultats analogues et je la passerai sous silence. Je crois donc
pouvoir conclure de cette double série d'expériences que les deux
sortes de virus sont restés identiques même après une année, à
l'égard de leur virulence et de leurs autres effets, dans les limites
des fluctuations individuelles.

10

150 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

VI

Quelle interprétation peut-on donner de ce grand fait de l'aug-
mentation successive du virus rabique pendant les inoculations
de lapin à lapin? Comment peut-on expliquer ce phénomène que
ladurée de l'incubation devient sucessivement plus courte quand
on avance de passage à passage, tandis que la quantité de moelle
inoculée reste toujours à peu près la même ?

Plusieurs pensées s'offrent à l'esprit pour rendre compte de
ce phénomène particulier.

On peut imaginer que l'agent infectieux de la rage (un
microbe encore inconnu) subit pendant le cours des inoculations
successives un certain changement dans sa qualité. Il devient
individuellement de plus en plus fort à mesure qu'il s'adapte
successivement à son nouveau milieu. En conséquence de cette
énergie plus exaltée, le changement qu'il peut produire d'une ma-
nière ou d'une autre dans la moelle devient plus intensif, et les
altérations du système nerveux, premiers symptômes de la rage,
peuvent apparaître après une durée plus courte d'incubation. Ce
seraitdonc parla qualité, la vigueurindividuellement augmentée,
que la môme quantité de virus agit plus énergiquement dans les
passages plus avancés.

-D'fiutre côté, on peut imaginer que c'est la quantité ôfi l'agent
infectieux de la rage qui subit un changement pendant les ino-
culations successives. Sa puissance de reproduction augmente,
et dès lors la même quantité d'une moelle rabique des passages
avancés contient plus d'agents infectieux que celle d'une moelle
rabique des premiers passages. Ce serait la quantité, la reproduc-
tivité exagérée qui agirait pour l'augmentation de la virulence,
sans aucun changement individuel de l'agent infectieux.

On peut enfin supposer que l'agent infectieux de la rage subit
à la fois ces deux modifications, et dès lors, dans les passages
de haut rang, la moelle inoculée contient plus d'agents infectieux
fortifiés à la fois quantitativement et qualitativement.

L'expérience suivante nous porte à croire à l'existence d'un
changement quantitatif. Si on porte sous la dure-mère le virus
rabique dérivé de n'importe quel passage, en état plus dilué qu'a
l'ordinaire, le lapin meurt après une incubation prolongée;

LE VIRUS RABTOUE DES CHIENS DES RUES, ETC. 131

on peut même alleiiidre un tel degré de dilution que le virus
fixé lui-même n'a plus d'effet sur l'animal; de sorte qu'on
est forcé de croire que c'est par \e nombre que l'agent infectieux
de la rage doit produire ses effets. En faveur de cette explica-
tion, on peut aussi citer l'expérience que j'ai faite, c'est qu'on peut
rendre aisément les chiens réfractaires à la rage, en leur inocu-
lant sous la peau le virus fixe de la rage à des degrés différents
de dilution, en commençant par la plus faible et continuant
successivement jusqu'à la plus forte'.

D'autre côté, il faut regarder comme une preuve pour l'exis-
tence d'un changement qualitatif une observation de M. Pasteur
que j'ai aussi faite dans mes expériences. Un lapin inoculé par
trépanation avec du virus fixe succombe, comme nous le savons,
après une incubation de 7 ou 8 jours. La même moelle inoculée
sous la dure-mère après 7 ou 8 jours de dessiccation ne tue le la-
pin qu'après une plus longue incubation, de 13 ou 20 jours par
exemple. Mais si on fait servir ce lapin à une inoculation nou-
velle sous la dure-mère, on voit reparaître l'incubation courte du
virus qui a servi de point de départ. Le retard du cas intermédiaire
est l'effet de l'appauvrissement quantitatif du virus rabique
dans la moelle séchée, et la récupération rapide de la durée de
l'incubation dans le cas ultérieur est due sans doute à ce que la
qualité de l'agent infectieux rabique est restée invariable dans la
moelle desséchée.

Les effets de la culture du virus rabique ont une grande res-
semblance avec ceux qu'on obtient en agriculture avec des
soins culturaux, combinés avec une intelligente méthode de sé-
lection^ . C'est ainsi qu'Hallett, en choisissant comme semences les
plus beaux grains et les plus beaux épis d'une variété de blé
quelconque, aréussi àaugmenteretà maintenir deplusassezcons-
tants, dans les limites des variations saisonnières, d'abord le
rendement à l'épi, c'est-à-dire le degré de fécondité de la graine,
puis la qualité individuelle du grain, qui devenait plus lourd et
plus dense.

On peut donc augmenter ainsi non seulement la quantité
mais aussi la qualité des produits dans le même sol et avec la

d. V. Akadémiai erlesito d'octobre 1887. V. aussi ces Annales, t. II, |). di.
2. V. A. Novacki. Getreideban, 4886, p. 177, 179.

152 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

même fumure, non seulement la quantité de la récolte par hec-
tare, mais aussi le poids du blé par hectolitre.

En inoculant de lapin à lapin, c'est-à-dire en ensemençant
régulièrement dans le même terrain le virus rabique, on le voit
aussi se fortifier dans sa vigueur individuelle et sa repro-
ductibilité jusqu'à un certain maximum où, à quelques fluctuations
près, les propriétés se fixent si les conditions de la culture res-
tent les mêmes. La ressemblance entre les microbes et les végé-
taux d'une organisation plus complète etplus élevée paraît donc
à ce point de vue être tout à fait parfaite.

VARIATIOXS DIRABLES DE LA FORME ET DE LA FONCTION

mu LES BACTÉRIES

F»ar E. AVASSEFtZUO.

Lorsqu'on cultive les bactéries à l'état de pureté, chacune
d'elles prend une forme qui reste assez constante dans les divers
milieux nutritifs qu'on lui offre, et amène dans ces milieux des
transformations, variables naturellement de l'un àl'autre, mais qui
se reproduisent avec constance, quand les conditions de culture
se retrouvent les mêmes. De cette observation, tant de fois répétée, .
est sorti le principe de la constance de la forme et de la fonction
chez les microbes, principe qui est le fond de nos connaissances
actuelles, et a servi de base à toutes les classifications qui ont été
proposées.

Ce n'est pas qu'il soit absolu. Du côté de la morphologie, il est
atteint par l'existence des formes d'involution, formes anormales
ou pathologiques, qu'on voit apparaître dans les cultures vieillies,
lorsque le milieu nutritif est épuisé de ses éléments assimilables
ou altéré par les sécrétions des microbes qui y ont vécu, qu'on
peut voir apparaître aussi dans les premiers temps de la culture,
lorsqu'elle se fait dans des milieux peu favorables, par exemple
en présence des antiseptiques. Mais dans les milieux antiseptisés,
ces formes anormales n'apparaissent qu'au début des cultures,
elles sont transitoires, et la forme considérée comme normale
ne tarde pas à prédominer. D'un autre côté, on peut faire dis-
paraître tout à fait les formes de vieillesse ou au moins en
diminuer beaucoup le nombre: il suffit pour cela de faire des
ensemencements répétés, à de courts intervalles, dans des
milieux favorables. On obtient ainsi des générations chez
lesquelles les formes de début se conservent, quels que soient
la durée et l'état des cultures.

Du côté de la persistance de la fonction, les mêmes objections

154 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

provoquent les mêmes réponses. Toutes les cellules d'une même
masse de levure n'ont pas le même pouvoir ferment; tous les
bacilles ou toutes les spores d'une même culture de bactéridie
charbonneuse ne sont pas également pathogènes; tous les articles
d'une culture du microbe du pus bleu ne sont pas également
aptes à reproduire la matière colorante. Mais on peut toujours,
et j'ai montré comment on pouvait y arriver pour leBacilius
pyocyaneus, obtenir des cultures tout à fait homogènes au point
de vue de la forme et de la fonction, c'est-à-dire chez lesquelles
tous les éléments possèdent les mêmes caractères taxonomiques.

Les exceptions à la loi de la constance de la forme et de la
fonction semblent donc avoir un caractère transitoire qui con-
firme le principe, au lieu de l'infirmer. Mais l'importance de ces
faits exceptionnels serait autre si on leur communiquait un
caractère permanent, et si on montrait par suite que la forme et
la fonction ne sont nullement indépendantes, comme on le pro-
fesse d'ordinaire, des modifications du milieu. C'est là ce que j'ai
essayé de faire.

J 'ai montré en effet, pour le bacille du pus bleu et le Micrococciis
prodigiosus, que l'on pouvait abolir d'une façon permanente chez
ces êtres la fonction productrice de matière colorante dans des
milieuxpour lesquels cette fonction était normale et faisaitpartie
de la définition donnée au microbe étudié. La forme est tout aussi
variable, et à l'aide de quelques traitements très simples, on peut
la modifier assez profondément pour que l'être vivant, rapporté
dans son milieu originel, y prenne et y conserve une forme dif-
férente de la forme primitive.

Ces deux espèces de modifications ont été obtenues en employant
d'abord l'action des antiseptiques, puis les cultures prolongées
dans des milieux acides, remplaçant les milieux alcalins dont on
se sert d'ordinaire. Mais il y a d'autres procédés pouvant donner
les mêmes résultats et d'autres microbes capables de présenter
les mêmes phénomènes. 11 est non seulement intéressant, mais
encore nécessaire de multiplier les exemples en faveur de cette
thèse nouvelle, et en voici qu'on peut joindre à ceux que j'ai déjà
cités.

Reprenons le Micrococciis prodigiosiis que nous avons déjà
étudié, et considérons-en une culture dans un bouillon de veau
légèrement alcalin, oii les cellules prennent nettement la forme

FONCTION CHEZ LES BACTERIES. 135

microcoque. Soumettons cette culture, le premier ou le second
jour de développement, pendant cinq minutes environ, à la tem-
pérature de 50" '. Prélevons, après refroidissement, une petite
quantité de semence que nous porterons dans un milieu sem-
blable au premier : le développement se fait très abondamment
dans ces conditions. Traitons cette seconde culture comme nous
avons fait de la première, et répétons ces chauITages à S0° pour
toutes les cultures successives.

On constate ainsi, au bout de quelques cultures, que la forme
microcoque disparait et fait place à une forme très nettement
bacillaire qui se conserve d'autant mieux dans la suite des géné-
rationsque les cbauiïages ont été plus nombreux. Nous obtenons
donc, en employant l'action répétée de la chaleur, les résultats
déjà trouvés sous TinQuence des antiseptiques ou des milieux
acides. Ajoutons de suite que ces résultats s'obtiennent encore
plus rapidement quand, à l'action de la chaleur, on superpose
Faction du milieu acide ^

Cette action combinée de la chaleur et des milieux acides
permet de produire des variations durables de la forme avec
d'autres microbes que ceux que nous avons déjà étudiés, en
particulier avec un bacille vert trouvé dans l'eau. Cet organisme
se présente, dans les cultures originelles, comme un petit bacille
relativement grêle et très court, au point d'avoir presque l'aspect
d'un microcoque. Il donne, surtout dans les milieux acides, une
belle couleur verte. J'ai pu l'obtenir d'une façon permanente, au
moyen de chauffages à 50° et de cultures en milieux acides, à
l'état de bacille allongé, mesurant jusqu'à 5 et 8 [x de long'.

On obtient les mêmes résultats avec le bacille du lait bleu;
mais cet organisme est surtout intéressant, nous l'avons déjà
indiqué, par les variations de sa fonction chromogène. Quand
on le cultive longtemps sur un milieu solide, de la gélatine
alcaline par exemple ou delag'élose, ily conserve sa coloration,
mais, reporté dans les milieux liquides, notamment dans le lait, il
se montre incapable de les colorer; j'ai pu lui rendre sa fonction

1. Le Micrococcus i)rodigiosus ne périt dans ces conditions qu'entre oo et o6°.

2. Comme précédemment, nous avons fait nos expériences avec l'acide tartrique
à la dose de 1 à 6 décigrammes par litre. Les cultures sur gélatine acide
donnent des résultats analogues; comme la gélatine se liquéfie rapidement, l'em-
ploi des milieux liquides proprement dits est beaucoup plus commode.

156 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

chromogène par une culture prolongée dans un milieu acide'.

Nous pouvons encore citer un autre organisme chez qui cette
action de la chaleur et des acides amène rapidement des chan-
gements morphologiques: c'est la bactéridie charbonneuse. La
bactéridie se présente, on le sait, dans le sang des animaux et
dans les milieux de culture, sous deux formes très différentes :
dans le sang, elle est composée de bacilles courts et séparés ; dans
les milieux artificiels, les bacilles sont réunis en longs filaments
enroulés et pouvant contenir des spores. On peut facilement
reproduire, dans les cultures, la forme courte que l'on rencontre
dans le sang : il suffît de faire quelques cultures successives
dans les milieux acides qui nous ont servi pour les microbes
colorés. On arrive à obtenir ainsi des formes très courtes, pouvant
même atteindre les dimensions des bactériums. Le nombre des
cultures nécessaires pour arriver à ce résultat est moins considé-
rable quand on a le soin de ne semer chaque fois que des spores,
c'est-à-dire de tuer préalablement les bacilles adultes par un
chauffage entre 60 et 70°. En partant d'une culture faite avec une
goutte de sang charbonneux, on peut avoir ainsi une série de
cultures successives dans un milieu acide. Les spores de ces
cultures successives ensemencées au même moment dans une
série de bouillons identiques donneront naissance à des généra-
tions de formes très différentes, depuis la forme bacillaire très
courte jusqu'à la forme ordinaire de longs filaments; les bacilles
seront d'autant plus courts qu'il proviendront d'une culture en
milieu acide de rang plus élevé.

Nous n'insisterons pas davantage sur les changements mor-
phologiques que l'on peut obtenir, avec les procédés que nous
avons indiqués, chez les organismes bacillaires. Ces changements
sont surtout intéressants à constater chez les microbes à qui
l'on reconnaît nettement la forme microcoque, comme le 3/. pro-
digiosiis, puisqu'on peut arriver à combler ainsi l'intervalle qui
sé}tare, pour la plupart des auteurs, le groupe des microcoques du
groupe des bacilles.

1. Voir Hueppa : Sur les altérations du lait par les microorganismes. Arbeit. aus
dem hais. Ges, amt., II, 18S4, p. oSo. Cette action des acides sur la fonction chromo-
gène de ce bacille avait déjà été observée : on avait remarqué que la coloration
bleue du lait n'apparaissait souvent que si ce liquide avait subi au préalable la fer-
mentation lactique.

FONCTION CITEZ LES BACTERIES. 157

L'étude que nous venons de faire nous permet en outre de
nous expliquer la véritable signification des formes d'involulion.
Nous avons vu d'une part que ces formes se produisent dans les
cultures âgées, et qu'on peut les faire disparaître en soumettant
l'organisme à des cultures prolongées faites àde courts intervalles
• dans certains milieux favorables. Nous avons constaté d'autre
part que ces formes peuvent prédominer au contraire et rem-
placer la forme primitive, considérée comme normale, au point
que celle-ci puisse être regardée à son tour comme une foi^me
d'involution. En réalité nous voyons intervenir ici leev lois de
l'hérédité, qui tiennent une si grande place dans la vie des orga-
nismes. Quand une forme est une fois acquise dans un milieu
donné, elle arrive à s'y fixer d'une façon permanente, et, quand
on modifie le milieu, la forme ne varie pas ou commence par
varier très peu : le retour à la forme fixée est d'autant plus rapide
que l'action du milieu primitif a été plus prolongée. Toutefois, à
mesure que l'influence du milieu nouveau se prolong-e à son tour,
le changement morphologique s'accentue davantage, et se trans-
met de génération en génération jusqu'au moment où le retour
à la forme antérieure ne peut plus s'effectuer. Ces résultats s'ap-
pliquent à la fonction aussi bien qu'à la forme. Il va sans dire
que les mêmes modifications du milieu n'influeront pas au même
degré sur la forme et la fonction, et que l'étude de ces deux sortes
de modifications devra d'ordinaire être faite séparément. Mais, en
envisageant les résultats de notre étude, il nous paraît qu'il sera
toujours possible de déterminer des variations durables de la
forme et de la fonction avec les infiniment petits, grâce au
nombre très considérable de générations que l'on peut soumettre,
dans un temps relativement conrt, à l'influence d'un milieu
déterminé.

REVUES ET ANALYSES

A. C. CoPE et prof. Horsley. — Rapports sur une épidémie de rage parmi les
daims du parc de Richmond pendant les années 1886-1887, Londres 1888.

Le premier de ces rapports est dû à M. Cope ; il contient l'histoire de
l'épidémie de Richmond ; le second renferme les observations et les expé-
riences que M. Horsley a faites sur les daims enragés.

Avant d'exposer ce qu'il a observé à Richmond, M. Cope a recherché si
on avait recueilli en France ou en Allemagne des renseignements sur la rage
des daims.

D'après M. Cagny, on n'a jamais signalé en France d'épidémie de rage
sur les daims.

M. Muller de Berlin a fait connaître à M. Cope que la rage a été observée
en Allemagne sur des daims mordus par des renards ou des chiens enragés,
mais que la maladie n'a jamais régné sous forme d'épidémie, sans doute à
cause des conditions de liberté dans lesquelles les daims vivent en Allema-
gne, et surtout, croit M, Muller, parce que la rage ne se transmet pas d'her-
bivore à herbivore, ces animaux ne faisant pas de morsures.

L'épidémie de Richmond n'est pas la première observée en Angleterre, où
on entretient des daims en grande quantité dans beaucoup de parcs. Ainsi,
en 1795 et en 1798 les daims de Grove Park, de Windsor Park, de Cas-
siobury Park périrent en grand nombre. Si on se reporte aux symptômes
signalés pendant ces épidémies, on reconnaît que des animaux ont suc-
combé à la rage. Dans le parc d'Eaton Hall en 1872, la rage a sévi sur
les daims, et en 1880 elle s'est montrée avec les mêmes symptômes dans le
parc de Swythamley.

Toutes ces épidémies ont été vraisemblablement causées par des mor-
sures de chiens.

Celle de Richmond, qui fait le sujet du rapport de M. Cope, a suivi une épi-
démie de rage observée sur les chiens à Londres et autour de cette ville.
. Le parc de Richmond a une étendue de 2,300 acres et contient 1,200
daims. H est ouvert au public toute la journée, les portes sont fermées le soir, de
sorte qu'un chien peut y pénétrer et en sortir sans être vu. Les daims y vi-
vent en trouppaux de 100 à 200 tètes, restant sur les mêmes pâturages ;
aussi la maladie demeure-t-elle confinée dans le troupeau oii elle s'est
montrée. Le premier cas a été observé à la fin de septembre 1886, dans le
troupeau qui pâturait près de la porte d'East Sheen. Quelques jours après
d'autres animaux tombèrent malades. On crut à un empoisonnement, et
M. Lupton, vétérinaire, fit évacuer le troupeau sur un autre pâturage. Mais la
maladie continua. Un mâle et un faon malades furent envoyés au collège

REVUES ET ANALYSES. 159

royal des vétérinaires. La maladie fut ainsi observée dans tous ses détails.
Après la mort, la moelle épinière des animaux fut inoculée par M. Hoisley
à des lapins et à un chien qui moururent de la rage la mieux caractérisée.
Il n'y avait donc plus aucun doute sur la nature de l'affection qui faisait
périr les daims de Richmond.

Au mois de juin, un troupeau qui paissait dans le voisinage de la harde
infectée fut atteint à son tour et perdit beaucoup de bètes. L'épidémie a duré
jusqu'au 24 septembre et a fait périr 264 animaux.

M. Cope décrit ainsi les symptômes de la rage chez le daim. Au début de
la maladie, les animaux portent la tète en arrière sur les épaules, le museau
en l'air, ils ont des tressaillements subits et partent au galop droit devant
eux. Bientôt ils s'élancent contre leurs compagnons, se jetant tête baissée
sur les poteaux, les arbres et les obstacles qu'ils voient, et avec tant de vio-
lence qu'ils brisent leurs cornes et s'arrachent des lambeaux de peau. De
timides qu'ils sont, d'ordinaire, ils deviennent agressifs et mettent le désor-
dre dans le troupeau. Séparés et enfermés dans un endroit clos, ils se pré-
cipitent sur les objets et sur les personnes qui se présentent. A celle période
de la maladie, on voit des faons poursuivre audacieusement et mordre de
vieux daims.

Après quelques jours, des animaux meurent dans une crise ou après avoir
montré de la paralysie des membres.

L'observation la plus intéressante qui ait été faite au cours de cette
épidémie est celle de la transmission de la rage du daim à un autre animal
de même espèce, et cela par morsure. Ces morsures ne font pas ordinaire-
ment de véritables plaies pénétrantes de la peau; la pression des dents pro-
duit des meurtrissures qui restent souillées de bave. L'animal mordu lèche
la partie blessée comme pour soulager la douleur qu'il ressent. Cependant
ces morsures suffisent pour inoculer la maladie. Un daim enragé fut isolé
et enfermé avec un animal sain; le daim enragé s'élança comme un chien
furieux sur son compagnon et le mordit aux oreilles et au cou. Le daim
mordu fut isolé et conservé; 19 jours après, il présentait les symptômes
caractéristiques de la rage. L'opinion longtemps admise que les herbivores
ne transmettent pas la rage par morsure est donc controuvée. L'absence
d'incisives supérieures chez ces animaux rend leurs morsures moins dan-
gereuses que celles des chiens, mais l'expérience prouve qu'elles sont encore
capables de donner la- rage. Ce fait était déjà rendu très probable par la
persistance de la maladie dans les troupeaux de daims sévèrement isolés
depuis plus de six mois.

Les herbivores ne prennent point la rage en paissant l'herbe sur laquelle
ont vécu des animaux enragés, mais bien par morsure comme les autres
espèces.

Le rapport de M. Horsley fait suite à celui de M. Cope; il renferme les
observations faites sur les daims enragés conduits à la « Brown Institution»,
et les résultats des expériences entreprises avec la moelle épinière de ces
animaux.

Les lésions trouvées à l'autopsie sont une congestion du pharynx, du
larynx et de la trachée. L'estomac est rouge, l'intestin est vide d'aliments,

160 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

la Vessie contenait de l'urine, les centres nerveux étaient congestionnés.

La moelle épinière de deux daims, qui ont succombé au laboratoire de
M. Horsley, a été inoculée par trépanation à des lapins. La rage a éclaté
chez ces animaux après une incubation de 10 à 16 jours. Un chien inoculé
dans les mêmes conditions est devenu enragé après 12 jours. On voit que
chez le daim les caractères de la rage sont semblables à ceux que Ton
observe dans la rage des autres herbivores.

Un daim enragé amené à la « Brown Institution » était une femelle
pleine. M. Horsley a profité de cette circonstance pour rechercher si le virus
rabique passait de la mère au fœtus. Deux lapins furent inoculés avec de la
moelle épinière du foetus. L'un d'eux mourut de septicémie, l'autre resta
bien portant et ne manifesta aucune immunité lorsqu'il fut inoculé avec du
virus rabique plusieurs mois après.

La rage des daims est donc une maladie désormais bien connue, ce
résultat est dû aux rapports de MM. Cope et Horsley» qui ont en outre
démontré que les herbivores peuvent transmettre la rage par morsure.

E. Roux.

0. LuBARSCH. Sur l'atténuation du bacille charbonneux dans le corps de la
grenouille {Fortschritte der Medizin, n" 4, 1888, p. 121).

Les faits sur lesquels s'appuie la théorie des phagocytes de M. Metch-
nikoff ne sont plus guère contestés aujourd'hui. Mais si l'on admet l'exis-
tence de la lutte que les cellules de l'organisme soutiennent contre les
microbes venus du dehors, on ne connaît pas les causes qui déterminent l'issue
de cette lutte et la victoire ou la défaite de l'un des deux partis. On ne sait
même pas d'une façon précise à quel état les microbes pénètrent dans les
cellules, si c'est comme des assaillants qui y entrent de vive force et con-
tinuent à s'y développer comme dans un milieu favorable, ou s'ils sont
englobés par les leucocytes après avoir été détruits en dehors d'eux par une
substance soluble. Les bacilles tuberculeux peuvent, on le sait, vivre à l'inté-
rieur des cellules. En est-il de même des bactéridies charbonneuses? C'est
cette dernière question que s'est posée M. Lubarsch. En essayant de la
résoudre, il a été amené incidemment à étudier les variations que peut subir
la bactéridie en passant par l'organisme de la grenouille.

« Si les bacilles charbonneux, se disait-il, meurent avant de péné-
trer dans les leucocytes, on pourra trouver un moment où les bacilles
encore vivants, même parmi ceux qui sont en dehors des cellules, seront
devenus très rares. En essayant de les cultiver, on n'obtiendra que des
cultures très tardives ou, dans tous les cas, beaucoup moins abondantes. »
Pour avoir quelque chance de pouvoir vérifier cette hypothèse, il fallait
choisir un animal chez qui la bactéridie trouvât un mauvais terrain de cul-
ture et chez qui la phagocytose jouât rapidement un rule très considérable.
La grenouille remplit parfaitement ces conditions : c'est d'ailleurs chez elle
que le rôle des phagocytes avait été démontré d'une façon très concluante
par M. Metchnikoff.

Un certain nombre de grenouilles reçurent dans leur sac lymphatique

REVUES ET ANALYSES. 161

dorsal de petites parcelles de poumons ou de rates prises à des souris
ayant sueconibé au charbon. C'est le mode d'inoculation indiqué par
]M. MetclinikofT. Les grenouilles étaient (Conservées à une température de
13 à 18", et à partir du lendemain de l'inoculation on en sacrifia chaque jour
quelques-unes ;. des ensemencements furent faits dans des milieux favorables,
avec la sérosité lymphatique et les parcelles charbonneuses qui avaient
séjourné un teuips plus ou moins long sous la peau de l'animal. Deux gre-
nouilles moururent au bout de un jour et de 2 jours et demi : la première
périt avec une hémorrhagie capillaire de la bouche et des yeux, et le liquide
sanguinolent qui s'écoulait renfermait un grand nombre de bactéridies. Chez
la i* grenouille, les bactéridies se nîontrèrent réparties dans tous les organes.
Dans ces 2 cas, la mort survenue malgré la température relativement basse
à laquelle les animaux étaient conservés, l'examen microscopique ne révéla
aucune trace de bacilles intracelluUaires, bien qu'ils fussent très abondants
dans les divers organes, ce qui n'a pas lieu d'ordinaire chez la grenouille.
Chez tous les autres animaux n'ayant pas succombé au charbon, les parcelles
d'inoculation étaient entourées d'une masse abondante de leucocytes dont
quelques-uns seulement contenaient des bacilles: dans tous ces cas, àl'exception
d'un seul, les bacilles se montrèrent parfaitement vivants et donnèrent sur
la gélose de très belles cultures. M. Lubarsch ne nous dit pas comment étaient
faits les ensemencements et quelles précautions il prenait pour ne semer
qu'un nombre très petit de bacilles et pour rendre ses ensemencements com-
parables entre eux.

Son attention fut, du reste, attirée par un fait très intéressant et assez
inattendu : « A partir du troisième jour les bacilles avaient en totalité ou
en partie perdu leur virulence..; au 6" jour, aucune des cultures n'avait tué
les souris ; vers le 3® ou 5* jour, le résultat n'est pas constant. Plusieurs
cultures tuaient, il est vrai, des souris au bout de 20 à 56 heures, mais
jamais des lapins ou des cobayes, et même quelques-unes des cultures ne
parvenaient pas à tuer des souris. » Devant ces résultats, M. Lubarsch s'est
demandé tout d'abord s'ils n'étaient pas dus à une erreur d'expérimentation,
à une impureté survenue dans ces cultures, ou à tout autre cause du même
genre. Après vérification, il s'est assuré qu'il n'en était rien, et il arrive à
cette conclusion que le passage à travers l'organisme de la grenouille suffit
pour atténuer la bactéridie charbonneuse.

Ce résultat est trop important pour qu'on ne cherche pas à se rendre
compte avec soin des conditions dans lesquelles M. Lubarsch a opéré. Il part,
nous l'avons vu, de la rate d'une souris morte du charbon, qu'il introduit
sous la peau de la grenouille, et qu'il y laisse pendant 1 à 10 jours à une tem.
pérature moyenne de 15". La parcelle de rate est ensuite retirée et sert à
inoculer, directement ou après une culture sur gélose, des souris, des lapins
et des cobayes. Parfois les souris meurent; d'autres fois elles résistent; les
lapins et les cobayes résistent aussi. Y a-t-il vraiment là une variation de
virulence due au passage à travers la grenouille ? et l'atténuation constatée ne
pourrait-elle s'expliquer autrement? M. Lubarsch oublie de nous dire quel était
le degré de virulence du bacille dont il est parti. Dans le cas où il eût été
déjà très atténué et n'eut tué que la souris, on ne devrait pas s'étonner qu'un

iG2 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

séjour prolongé à basse température, dans des conditions peu favorables, eût
amené de petites différences dans la virulence, différences qu'on aurait pu
obtenir en dohors même de la grenouille.

Malgré celte lacune regrettable sur l'état de la virulence primitive, qui
jette quelque doute sur les conclusions auxquelles arrive M. Luharsi'h, on
voit qu'elles peuvent être comparées à celles qu'a données M. Metchnikoff
dans une étude analogue faite sur les moutons réfractaires au cliarbon
(voir le tome I" de ces Annales). Dans ce travail, M. Metclinikoff est arrivé
le premier à montrer d'une façon non douteuse l'atténuation de la bacté-
ridie par son passage à travers un animal réfractaire. M. Lubarsch n'avait
d'ailleurs pas eu connaissance de ce travail en entreprenant le sien, qui lui
donne, on le voit, des conclusions analogues. Il a de plus constaté, comme
M. Metchnikoff, que l'atténuation de la bactéridie était passagère et que, par
suite, les animaux qui reçoivent les cultures atténuées ne résistent pas « à
l'inoculation d'un charbonforteuient virulent ». Autrement dit, l'atténuation
ne confère pas à la bactéridie la propriété d'être un vaccin.

Du reste, cette atténuation semble être particulière au mode d'inoculation
sous la peau de la grenouille de parcelles d'organes charbonneux. Quand, au
lieu de faire l'inoculation sous-cutanée, on injecte dans la veine abdominale de
la grenouille « une culture de charbon » (quel charbon?), les bacilles se trou-
vent presque exclusivement cantonnés, au bout de 6 à 17 heures, dans les
cellules de la rate, du foie et dans le sang. 11 semble donc que l'on soit dans
les meilleures conditions possibles, pour que l'action des leucocytes puisse
être constatée facilement par une diminution dans la virulence de la bac-
téridie. Il n'en est rien, et le sang aussi bien que les divers organes donnent,
sur gélose, d'abondantes cultures qui, inoculées à des souris, les tuent en
20, 26 à 54 heures. Dans ce cas, il n'y a pas d'atténuation sensible.

Cette exjiérience fournit un nouvel argument aux réserves que nous for-
mulions tout à l'heure sur les causes véritables de l'atténuation. Dans l'inté-
rieur d'un morceau d'organe charbonneux introduit sous la peau, les
bactéridies se développent mal, et la température de lo", jointe à ces
mauvaises conditions de culture, suffit pour expliquer les différences très
petites que l'on constate dans la virulence. Cette question demande donc à
être reprise avec soin, et, si les résultats obtenus par M. Metchnikoff sur les
moutons réfractaires permettent de croire qu'ils pourront être étendus à d'au-
tres animaux réfractaires au charbon, on voit cependant que les conclusions de
M. Lubarsch ne s'appuient pas sur des expériences tout à fait convaincantes.

Du moins cette dernière expérience de M. Lubarsch nous permet de tirer
une autre conclusion : c'est que les bacilles sont encore vivants dans l'inté-
rieur des cellules, puisque les cellules de la rate, par exemple, donnent des
cultures aussi abondantes que si l'on semait du sang charbonneux de lapin.
Une autre expérience prouve du reste que les bacilles n'ont pas besoin d'être
tués pour être mieux englobés par les leucocytes. Quand on injecte dans la
veine abdominale d'une grenouille une culture de charbon stérilisée par le
chauffage, les leucocytes n'en contiennent qu'un nombre très restreint, même
au bout de 24 heures, tandis qu'ils en sont bourrés dès la 6" heure avec une
culture de bactéridies vivantes. Il y a donc une action directe de la bactéridie

INSTITUT PASTEUR. 163

qui amène une augmentation dans l'activité des cellules de l'organisme et
leur permet de résister dans leur lutte contre les microbes.

M. Lubarsch a essayé de répéter avec le micrococciis tetragenus et le
bacille de la septicémie des souris les expériences qu'il a faites avec le
charbon. Elles ne l'ont conduit à aucun résultat positif. Mais il se promet
de ne pas les abandonner, et nous espérons qu'il fera connaître à bref délai
les résultats qu'ils aura obtenus dans cotte étude si intéressante de l'atté-
nuation des microbes.

E. W.

INSTITUT PASTEUR

RENSEIGNEMENTS STATISTIQUES SUR LES PERSONNES TRAITÉES
PENDANT LE MOIS DE FÉVRIER 1888.

Pe?'so}ines ynortes de rage pendant le cours du traitement.

M™^ Delpéche, née Marie Wagner, 52 ans, concierge à Paris,
mordue le 2.3 janvier par un chien errant, inconnu, qui a été tué
par un sergent de ville après avoir mordu 3 autres personnes et
5 chiens.

jyjme Delpéche a été mordue: d° dans la pulpe du pouce droit,
une morsure ; 2° sur le dos du poignet droit, 8 morsures. Ces
blessures ont presque toutes saigné. La première est profonde.
Cautérisation à l'acide azotique quelques instants après la mor-
sure. Mise en traitement le 28 janvier, M"° Delpéche ne s'est
pas présentée à l'Institut Pasteur le 13 février, bien que le trai-
tement ne fût pas achevé. Elle est tombé malade le jour même et
a succombé le 17 février.

M™*^ Delpéche, n'ayant pas subi le traitement complet, n'est pas
comptée dans la statistique de janvier.

164

ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

INSTITUT PASTEUR

STATISTIQUE * DU TRAITEMENT PRÉVENTIF DE LA RAGE. — FÉVRIER 1888

Morsures à la tête ( simples . .
et à la figure ( multiples.

Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

Morsures aux mains

simples...

multiples.

Caiitérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

Morsures au.x mem-i simples...
bres et au tronc { multiples.

Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation

Habits déchirés

Morsures à nu.

Morsures multiples en divers points

du corps

Cautérisations efficaces

— inefficaces

Pas de cautérisation . ...

Habits déchirés

Morsures à nu

Tntoiiv * Français et Algériens,
loiaux. ^ Etrangers

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11

21

1 !S3

i. Pour riuterprélation des termes et la signiflcation des diverses colonnes du
tableau, se reporter aux statistiques précédentes, p. 93, 14.3 et 207, t. 1.

Les animaux mordeurs ont été :

Chiens, lo4 fois; chats, 7 fois; mulet, 1 fois; cheval, 1 fois;
porc, 1 fois; mouton, 1 fois.

Le Gérant : G. Masson.

Sceaux. — Imprimerie Charaire et fils.

ylnnalt'Sû/^- / huii/u/ Fas/d//- 7^.11.

Fil.

Il

^

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Pasteuria pamosa

2me ANNEE. AVRIL 1888. N° 4

ANNALES

DE

LINSTITUT PASTEUR

PASTEURIA RAMOSA

UN REPRÉSENTANT DES BACTÉRIES A DIVISION LONGITUDINALE

Par m. ELIE METCHNIKOFF.

Pour se faire une idée suffisante sur les relations laxono-
miques des bactéries, groupe devenu si important sous tant de
rapports, il convient de ne pas se borner aux formes les plus
habituelles et à cause de cela les mieux connues ; il faut diriger
les recherches sur des bactéries particulières, capables de donner
quelques aperçus nouveaux sur la question de la morphologie
du groupe en général.

Les Daphnies d'eau douce constituent un terrain très favo-
rable à ce genre d'investigations. Pendant mes recherches sur
les maladies infectieuses des animaux inférieurs, recherches
entreprises à un tout autre point de vue, j'ai été souvent frappé
de la richesse des formes nouvelles et remarquables appartenant
à des groupes de sporozoaires et de bactéries. Ainsi j'ai ren-
contré chez les Daphnies un bacille parasitique se transformant
en microcoques, et un autre bacille, donnant des spirilles en
boucle, qui peut servir de modèle du pléomorphisme chez les
bactéries. En remettant la description de ces formes à une autre
occasion, je veux insister dans cet article sur un type nouveau
de bactéries parasitiques, que je me permets d'introduire dans
la science sous un nom dédié à notre illustre et vénéré maître,
qui, en découvrant les organismes provoquant la fermentation
lactique et butyrique, créa une ère nouvelle dans la science en

11

166 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

général et dans la microbiologie en particulier. Quoique les
bactéries soient connues depuis le xyu*-' siècle, néanmoins leur
rôle dans la nature n'a été démontré que par M. Pasteur lui-
même ou par ceux qui ont suivi la voie ouverte par lui.

Pasteuria ramosa (nov. gen., nov. sp.) est une bactérie para-
sitaire qui s'introduit dans la cavité générale du corps des
Daphnia pukx et D. magna, et provoque chez ces animaux une
maladie toujours mortelle. Dans son état de développement le
plus primitif que j'ai observé, ce parasite se présente sous forme
de colonies plus ou moins arrondies, à surface anfraclueuse
(fig. 4). En observant ces colonies avec de plus foits grossisse-
ments, on reconnaît aisément qu'elles se composent de corps en
forme de choux-fleurs : on aperçoit un tronc central qui se
ramifie en rameaux secondaires, tertiaires, etc., et donne finale-
ment des articles terminaux arrondis à leur surface extérieure
(fig. 2). Pendant l'évolution de la Pasteuria, ses ramifications se
détachent les unes des autres, et il se produit une dissolution gra-
duelle de tous les membres de la colonie primitive. C'est d'abord
le tronc principal qui se divise, de sorte qu'il apparaît plusieurs
colonies-filles, composées chacune d'une série de ramifications.
Ce procédé de scission, se répétant plusieurs fois, aboutit à la
formation d'un nombre considérable de petites colonies (fig. 3-8
et phologrammes I et II), dont les membres se trouvent ratta-
chés par un lien qui devient de plus en plus mince.

Pendant ce travail incessant de subdivision, les membres de
la colonie grandissent à vue d'œil, et, partant de l'état de pointe
arrondie à peine appréciable, ils deviennent bientôt des corps
rappelant par leur forme des grains de raisin. Dans un état
encore plus avancé, les individus de la Pasteuriane se montreirt
plus que réunis par quatre (fig. 9, 10) et plus souvent par deux
(fig. 11, 12 et photogramme 3) ; leur point de réunion apparaît
aussi de plus en plus fin, de sorte qu'ils se détachent très faci-
lement l'un de l'autre. Il se produit alors une grande quantité
de bactéries isolées (fig. 13, 17) qui rappellent quelque peu les
bacilles du genre Clostridium ou d'autres formes analogues.
Dans les individus adultes de Pasteuria, on reconnaît néanmoins
un pôle large et arrondi et un autre pointu en bec, le pôle infé-
rieur, qui était le point de liaison avec un autre individu.

Toutes ces formes sont le résultat de divisions successives dans

PASTEURIA RAxMOSA. 167

le sens longitudinal; mais ce procédé de multiplicalion, au lieu
de se poursuivre jusqu'au bout, s'arrête à un certain point, ce
qui amène la production de colonies d'individus réunis par leur
partie inférieure. Ce n'est que dans une période plus avancée de
l'évolution que la division longitudinale est poussée à bout et
provoque une véritable dissolution de la colonie en individus
isolés. Les figures 3, 4, 8 nous montrent qu'un article de Pas-
teuria peut subir en même temps plusieurs (jusqu'à cinq) divi-
sions, ce qui donne des formes en éventail très caractéristiques.
Si dans ce mode de reproduction et dans la forme extraor-
dinaire des colonies de Pasteuria, on voulait voir une objection
contre son admission dans le groupe des bactéries, l'inspection
de l'individu isolé pourrait déjà dissiper le doute. Du reste il
ne faut pas oublier que la division longitudinale n'est pas com-
plètement étrangère à ce groupe. Quoique le plus grand nombre
de bactériens se divise toujours uniquement dans le sens trans-
versal, il existe néanmoins des genres, comme la Sarcina, oiila
division s'opère dans les trois plans perpendiculaires de l'espace,
dont l'un doit être considéré comme longitudinal. La particula-
rité de la Pasteuria se réduit donc à sa faculté de se diviser en
un seul sens, le sens longitudinal. En supposant que les bac-
téries les plus primitives possédaient la faculté de scission en
trois directions différentes, on peut facilement admettre que
dans la plupart des formes dérivées, c'est la division transver-
sale qui s'est conservée, tandis que dans la minorité des cas
c'est la division longitudinale qui a pris le dessus.

• La preuve la plus irrécusable de la nature bactérienne de la
Pasteuria nous est donnée par le mode de sporulation qui, sous
tous les rapports, se rattache à la production d'endospores, si
répandue parmi les bactéries les plus authentiques. Ce ne sont
que les individus isolés qui possèdent la faculté de produire les
spores. En observant les cellules vivantes, on peut distinguer
dans leur portion antérieure des espaces ronds, remplis d'une
substance plus transparente que le protoplasme (fig. 18); chez
les individus plus adultes (fig. 19) on aperçoit au milieu de cette
espèce de vacuole un point réfringent à peine perceptible. Deve-
nant de plus en plus grand (fig. 20, 21), ce petit corps se trans-
forme en spore spbérique entourée par une couche de substance
transparente (fig. 22) et finit par remplir la partie antérieure de

168 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

la cellule, devenue plus grande et surtout beaucoup plus large
(f]g. 23 et photogramme IV). Pour mieux apprécier certains
détails de la sporulation, il convient d'observer les Pasteuria
colorées avec le bleu de méthylène. On peut bien voir alors que
les cellules qui paraissent d'abord complètement homogènes
sont composées de trois parties distinctes, dont l'une forme le
segment antérieur, l'autre, plus grande, le segment moyen, et la
troisième la pointe effilée qui servait de point de jonction avec
les autres membres de la colonie (fîg. 24). C'est le segment an-
térieur qui est le siège de la production des spores. Il y appa-
raît d'abord une vacuole transparente, qui, sur des préparations
desséchées et colorées, semble beaucoup moins grande que sur
le vivant ; elle se remplit d'une spore arrondie qui devient plus
considérable à mesure de l'accroissement de la cellule entière.
Longtemps encore la spore en voie de formation se colore faci-
lement par le bleu de méthylène ; mais, arrivée à son état défi-
nitif, elle perd cette faculté et reste incolore et fortement réfrin-
gente. Pour arriver à la colorer, il faut recourir au procédé de
la double coloration, usité pour les bacilles de la tuberculose
et les endospores d'autres bactéries. On parvient alors à colorer
les spores en rouge de fuchsine et le reste du contenu en bleu
de méthylène. Avec cette méthode, on arrive facilement à dis-
tinguer la membrane de la cellule (fîg. 26, 27), tandis qu'en
observant les Pasteuria vivantes (fîg. 23), on peut se faire une
idée erronée sur la position des spores, qui paraissent être tout
à fait découvertes dans leur partie antérieure.

Dans les Daphnies mortes à la suite du parasitisme de cette
bactérie, on rencontre une grande quantité de spores enveloppées
par le reste de la cellule, et qui se dispersent plus tard sur le fond
du vase. Quoique j'y aie fait grande attention, je ne suis néan-
moins jamais parvenu à observer le mode d'infection par les
spores, pas plus que leur germination et la production des pre-
mières colonies. Je ne suis pas non plus parvenu à obtenir des
cultures de ces bactéries sur la gélatine ou la gélose glycérinée,
milieux nutritifs que j'avais avec moi à la campagne (dans le
gouvernement de Kiefî en Russie), où je fis la découverte de la
Pasteuria. Pour la première fois je la vis dans l'été de 1884, dans
un petit étang peuplé par des milliers de Daphnia jmlex ; depuis
lorsjel'ai perdue de vue jusqu'à rétédel887, où je la rencontrai

PASTEURIÂ RAMOSA. 169

de nouveau dans une mare habitée par les Daphnia magna. Il
paraît donc que notre bactérie est assez rare, d'autant plus que
parmi les parasites des Daphnies mentionnés parLeydig, Claus,
Weismann et Moniez, il ne s'en trouve aucun qu'on pourrait
prendre pour la Pasteuria ramosa ou une bactérie voisine.

En observant les différents stades du développement de la
Pasteuria à l'état vivant, à travers les parois de la Daphnie, on
remarque d'abord que les colonies, aussi bien que les individus
isolés, sont complètement privées de mouvements actifs ; ce n'est
qu'à l'aide des courants sanguins qu'ils sont transportés d'un
endroit à l'autre. Les parasites, suspendus dans le liquide san-
guin, restent à quelques exceptions près tout à fait libres au
milieu d'une multitude de leucocytes, ce qui semble démontrer
que les premiers sécrètent une substance quelconque qui les
protège contre l'agression des phagocytes. Ce fait confirme
donc la règle d'après laquelle le parasite, évité par les phago-
cytes, se propage sans obstacles et finit par tuer l'animal. Cepen-
dant, dans des cas très rares, j'ai pu observer que les leucocytes
dévoraient l'agresseur, mais seulement dans son état de spore
(fig. 28, 30); c'est ce que j'ai également constaté pour lapébrine
des Daphnies, et tout cela confirme l'opinion que les états vég-é-
latifs sont doués d'une faculté spéciale de résistance à l'action
des phagocytes, faculté absente dans l'état mûr du parasite.

Puisque je suis amené à parler de cette théorie des phago-
cytes, je voudrais m'arrêter en terminant sur une objection
récemment exprimée par MM. Roux et Chamberland (Voir : An-
nales, n° 12, 1887) dans leur remarquable travail sur l'immunité
obtenue par l'injection des substances chimiques. Ces auteurs
expliquent le fait d'une pareille immunité, bien constatée par
eux, par l'existence d'une matière antiseptique qui rend l'orga-
nisme impropre à la culture des bactéries infectieuses. Mais
on pourrait supposer aussi bien l'adaptation des cellules de l'or-
ganisme, et notamment des phagocytes, a l'influence nuisible
de substances sécrétées par les parasites, conformément à l'o-
pinion de M. Hesse, exprimée dans son mémoire publié dans
les Archives de Virchow (T. CIX, p. 38o). Pour résoudre la
question d'une manière précise, il serait intéressant de recher-
cher si le vibrion septique serait apte à végéter pendant un
certain temps, à l'abri des phagocytes, dans l'humeur aqueuse

470 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

de l'œil des cobayes réfractaires, comme c'est le cas pour
d'autres exemples d'immunité naturelle ou acquise. Ainsi le
premier vaccin du charbon se cultive parfaitement dans la cham-
bre antérieure de l'œil des moutons devenus réfractaires à des
doses considérables du virus fort. De même le bacille du rouget
des porcs, qui disparaît en peu d'heures après l'inoculation sous
la peau des chiens, croît dans la chambre aiitérieure et produit
un hypopyon chez les mêmes animaux ; j'ai observé les mêmes
phénomènes après l'inoculation du premier vaccin du rouget
des porcs sous la peau et dans l'œil des lapins.

EXPLICATION DE LA PLAKCHE I.

Les dessins ont rto faits par moi à l'aide de la chambre claire de
M. Nachet, et je dois les photographies à l'obligeance de M. Roux.

Les flg. 1, 28, 29 et 30, ont été dessinées avec le grossissement fourni
par rOc. 4 et l'obj. 9 de Hartnack, les autres figures avec l'Oc. 4 et le sys-
tème à l'huile 1/18 de Zeiss.

Fig. 1. Quatre colonies de Pasteuria ramosa de l'intérieur d'une seconde
antenne de Daphnia pulex. Dessiné d'après le vivant.

Fi(j. 2. Coupe optique d'une colonie de la même espèce. Dessiné d'après
le vivant.

Fig. 3 à 8. Différents états de division longitudinale des petites colonies
de Pasteuria ramosa.

Fig. 9 et 40. Colonies composées chacune de quatre individus.

Fig. il et 12, Colonies constituées chacune par deux individus.

Les flg. 3 à 12 ont été dessinées d'après des préparations colorées par la
fuchsine.

Fig. 13. Un individu isolé, dessiné d'après le vivant.

Fig. 14 à 17. Individus isolés, dessinés d'après des préparations colorées
par la fuchsine.

Fig. 18 à 23. Six états du développement de la spore, dessinés d'après
le vivant.

Fig. 24 à 27. Quatre états de sporulation, d'après des préparations à
coloration double (fuchsine-aniline et bleu de méthylène).

Fig. 28. Un leucocyte de' Daphnia pulex rempli d'individus sporifères de
Pasteuria, dessiné d'après le vivant,

Fig. 29. Le même leucocyte, pris dix minutes plus tard.

Fig. 30. Un autre leucocyte du même animal.

Pour les photogrammes I à IV. voir le texte.

SUR liN PROCÉDÉ PERFECTIOIÉ D'AMUSE R4CTÉRI010(JIQIIE

DE L'AIR,

Par mm. I. STRAUS et R, WURTZ.

1

Les procédés employés pour la détermination et la numéra-
tion des germes de l'air sont déjà très nombreux ; leur multi-
plicité même montre qu'aucun d'eux n'est irréprochable. L'ex-
posé de tous ces procédés nous entraînerait trop loin; nous
indiquerons seulement les plus importants, renvoyant pour les
détails à la monographie remarquable de M. Miquel * et au récent
mémoire de M. Pétri % où l'historique de la question est traité
avec soin.

Les méthodes actuellement employées peuvent, en somme,
être ramenées à deux types fondamentaux, selon que l'on a
recours aux milieux de culture liquides ou aux milieux solides.

Les premières recherches précises sur les organismes de l'air
sont dues à M. Pasteur; elles sont consignées dans son mémoire
célèbre « sur les corpuscules organisés qui existent dans l'atmo-
sphère » ». M. Pasteur faisait passer, à l'aide d'un aspirateur, de
l'air à travers des bourres de coton nitrique ; ces bourres étaient
ensuite dissoutes dans un mélange d'alcool et d'éther et donnaient
un collodion laissant déposer, par décantation, les poussières
atmosphériques arrêtées au passage. Ce sédiment était examiné
au microscope et révélait la présence de spores de champi-
gnons. En outre, en introduisant ces bourres dans un bouillon
nutritif dûment stérilisé, M. Pasteur y constata le développement

1. Des organismes vivants de l'atmosphère, Paris, 1883 ; voy. aussi la série des
mémoires du même auteur publiés dans l'Annuaire de Montsouris.

± Nouvelle inélhode de recherche et de numération des bactéries et des spores de
moisissures de l'air (Zeitschr. f. Hygiène, 4887, t. III, p. i-U6).

3. Pasteuu. Mémoire sur les corpuscules organisés qui existent dans l'atmosphère
(Annales de chimie et de phys., t. LXIV, 1862, p. 1-1 10, et Comptes rendus, 186;!,
t. LVI, passim).

172 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

de bactéries et de moisissures. Plus tard, il imagina une mé-
thode plus parfaite, consistant à faire arriver dans un certain
nombre de ballons renfermant du bouillon stérilisé, et dont on
cassait la pointe au moment de l'expérience, un volume déter-
miné d'air; d'après la proportion des ballons qui se troublaient
et de ceux qui restaient stériles, on concluait au nombre de
germes contenus dans l'air.

C'est de cette méthode que dérivent celles qui ont été
employées par M. Miquel dans les patientes recherches qu'il
poursuit depuis longtemps à l'observatoire de Montsouris. Sans
entrer dans le détail des perfectionnements successifs que
M. Miquel lui a fait subir, sa méthode revient, en dernière
analyse, à faire barbotter à travers des ballons à deux tubulures
une quantité déterminée d'air. Le nombre des ballons pour
chaque essai d'air est d'environ une trentaine; et il importe do
faire passer, à travers chacun de ces ballons, une quantité d'air
telle que, sur la totalité de ces ballons placés ensuite àl'étuve,
la moitié seulement se trouble. On suppose que chacun des
ballons troublés n'a reçu qu'un seul germe, et du nombre des
ballons qui se sont troublés on déduit le nombre des germes que
renferme le volume d'air ayant traversé tous les ballons.

Ce procédé qui, entre les mains de M. Miquel, a donné des
résultats dont on ne saurait méconnaître l'importance, présente
de sérieux inconvénients. Il nécessite, pour chaque expérience,
des manipulations et un outillage compliqués, l'emploi d'un
grand nombre de ballons et d'une notable quantité de bouillon.
On suppose en outre, sans en fournir la démonstration, que
lorsqu'un ballon se trouble, ce trouble n'est dû qu'à l'ensemen-
cement d'un seul germe; or l'expérience tend au contraire à
montrer que les germes des bactéries existent dans l'air, non
pas par unités, mais par agglomération de plusieurs germes. Les
résultats obtenus par celte méthode peuvent donc être très ins-
tructifs en fournissant des chiffres comparables entre eux, mais
on ne peut guère attribuer à ces chiffres une valeur absolue.

Dès que M. Koch eut imaginé la culture sur milieux solides,
il l'appliqua à l'analyse bactériologique de l'air. Une capsule de
verre renfermant de la gélatine stérilisée et ayant fait prise, es
exposée, pendant un temps déterminé, à l'air ; puis on laisse aux
colonies le temps de se développer, on les compte et on les

ANALYSE BAGTEHIOLOGIQUE DE L'AIH. 173

examine. Utile comme moj'en d'orientation, ce procédé ne peut
servir à une détermination précise du nombre des microbes de
l'air.

Le procédé de M. liesse ', dérivé de celui do M. Koch, cons-
titue un progrès notable. [1 consiste, comme l'on sait, à faire
cheminer une quantité d'air déterminée, à l'intérieur d'un tube
de verre, sur la paroi interne duquel a été étalée et a fait prise
une mince couche de gélatine nutritive. L'air doit progresser
assez lentement à l'intérieur du tube, et celui-ci doit avoir une
longueur suffisante pour que tous les germes aient le temps de
se déposer.

Les numérations faites parM. liesse et après lui par plusieurs
observateurs qui eurent recours à sa méthode, par M. Fischer
notamment, ont donné des résultats intéressants. Ils nous ont
appris, entre autres particularités, que les spores des moisissures
sont plus légères que les germes des schizomycètes (les colonies
de moisissures se développent généralement plus loin du point
d'entrée de l'air dans le tube que les colonies de bactéries). Mais
la méthode de Hesse comporte, elle aussi, plusieurs inconvé-
nients. L'appareil est encombrant, difficile à stériliser. Les
germes, au lieu d'être incorporés à la gélatine, sont simplement
déposés à sa surface, qui peut être plus ou moins sèche et
raccornie : d'où la possibilité qu'un certain nombre d'entre eux
n'arrivent pas à développement. L'examen microscopique des
colonies est très difficile, vu le gros diamètre du tube; il en est
de même de la cueillette des colonies à l'aide du fil de platine.

Enfin, la plus grave des objections que nous faisons à cette
méthode est la lenteur que demande la prise d'air. La vitesse
maximaavec laquelle l'air peut cheminer dans le tube étant d'un
litre en trois minutes, l'examen ne peut porter que sur de petits
volumes d'air : circonstance très fâcheuse, puisque en ramenant
les résultats au mètre cube d'air, le multiplicateur devient très
grand et les erreurs se trouvent elles-mêmes multipliées par un
gros chiffre. La longue durée de chaque expérience est aussi un
inconvénient, à cause de la perte de temps, et surtout parce que
les conditions atmosphériques que l'on veut étudier peuvent
varier elles-mêmes pendant la durée de l'expérience.

1. Sur la (léterminalion quantitative des micro-organismes contenus dans l'air
(Mittbeil. a. d. \i. Gesiindheitsamte. Bd. H, p. 482).

ni ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Les défectuosités de cette méthode en ont fait naître d'au-
tres : parmi celles-ci nous mentionnerons seulement celle de
M. Frankland et celle de M. Pétri ; toutes deux sont basées sur
le principe suivant : employer une bourre filtrante et incorporer
ensuite cette bourre à du bouillon gélatinisé. M. Frankland
emploie une boui-re de coton de verre, et fait faire prise à la géla-
tine sur la paroi intérieure d'un ballon de verre, à la façon d'un
tube d'Esmarch'. Son procédé offre aussi des désavantages; la
division parfaite de la bourre de coton de verre est difficile à
obtenir, et son mélange avec la gélatine forme une couche laiteuse
au milieu de laquelle les colonies sont difficiles à apercevoir.

M. Pétri, au lieu d'une bourre de coton de verre, emploie un
double filtre formé de sable fin emprisonné entre deux culots de
toile de cuivre à mailles très fines, le tout engagé dans un tube
de verre. L'air, aspiré par une trompe ou une pompe à main, est
obligé de traverser le filtre de sable, et s'y dépouille de tous ses
germes. Le sable ainsi que les culots de toile de cuivre sont
ensuite répartis dans des godets de verre et arrosés de gélatine
nutritive; on compte les colonies qui se développent, comme
pour une culture sur plaques. On trouvera dans le travail très
complet de M. Pétri la description minutieuse de son procédé et
la comparaison qu'il en fait avec les procédés antérieurement
employés. Nous l'avons nous-mêmes employé et nous lui
avons aussi reconnu quelques inconvénients : le dispositif de
l'appareil ne laisse pas que d'être compliqué, les culots de toile
de cuivre devant être minutieusement calibrés et ajustés, pour
ne pas permettre la fuite du sable. Mais l'objection principale
que Ton peut faire à cette méthode est la suivante : le passage
de l'air à travers deux filtres de sable fin de 3 centimètres de
hauteur chacun nécessite, pour avoir une vitesse convenable,
une aspiration puissante, d'où l'impossibilité de recourir à un
simple aspirateur et la nécessité de recourir à la pompe à main
ou à une trompe.

n

La méthode que nous avons employée consiste, en dernière
analyse, à faire barbotter un volume déterminé d'air à travers

1. Frankland {VEViCY).Pro<;eedings ofthe R. Soc. Vol. XII, p. 44.3; voir l'analyse de
ce travail dans ces Annales (t. I, p. olo); voir en outre Zeitschr. f. Hyg., 1887, t. Hl.

ANALYSE lUCTKUlOLOGTQUE DE L'AIR. 175

de la gélaliiie iiutrilive. L'idée de recourir à un procédé analogue
avait déjà été plusieurs fois émise; il existe même des essais
tentés dans cette direction, notamment par M. von Sehlen, dans
ses recherches sur l'air des régions palustres en Italie '. Mais les
résultats ainsi obtenus ont été peu satisfaisants, pour plusieurs
raisons qui seront développées plus loin, et les procédés basés
sur la méthode du barbottage à travers la gélatine nutritive ont
été presque universellement délaissés.

Notre appareil à barbottage se compose d'un tube de verre A,

avec un fort renflement cylindrique à sa partie moyenne, et
mesurant 15 millimètres de diamètre à ses deux extrémités.
Ce tube reçoit la gélatine nutritive. Au fond de ce tube plonge
un second tube B, de petit calibre, dont l'extrémité inférieure
est finement effilée ; à la partie supérieure, il porte un renflement
rodé, C, qui ferme hermétiquement le tube A. Celui-ci porte
latéralement une tubulure de dégagement D, munie d'un étran-
glement pour maintenir les bourres.

•1. Etudes tiir la Malaria (Fortschritte der Med., 1884, n" 18, p. o8o).

176 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

Pour se servir de l'appareil, on garnit d'ouate Torifice supé-
rieur (e) du tube B, ainsi que la tubulur(; de dégagement D, de
chaque côté de l'étranglement, et on stérilise l'appareil par la
chaleur sèche. Après avoir retiré lé tube intérieur B, on verse dans
le tube A 10 centimètres cubes de bouillon gélatine, à 10 0/0,
liquéfié à une douce chaleur. On a soin d'ajouter à la gélatine
une goutte cVhuile stérilisée. Cette dernière précaution est absolu-
ment indispensable; elle empêche la gélatine de mousser pen-
dant le barboltage et de sortir par le tube de dégagement. Le
tout est stérilisé à l'autoclave à 115° pendant un quart d'heure,
et l'appareil est dès lors prêt à servir.

On lient, pendant toute la durée de l'opération, l'appareil à la
main, pour que la chaleur de celle-ci empêche la gélatine de se
solidifier. Par un tube de caoutchouc, on relie le tube latéral D
à un aspirateur; puis on enlève la bourre qui ferme l'extrémité e.
On fait alors fonctionner l'aspirateur à la vitesse voulue, et on
fait barbotter à travers la gélatine un nombre déterminé de litres
d'air. Grâce à la présence de l'huile, les bulles formées par le
passage de l'air à travers le liquide sont très fines et la mousse très
peu accusée, quelle que soit la vitesse de ce passage. Il en résulte
que l'on peut ainsi faire barbotter un volume notable d'air }»en-
dant un temps relativement court (50 litres en un quart d'heure).
L'opération terminée, on replace la bourre en <?, puis, en souf-
flant parla tubulure latérale D, on fait monter, à diverses reprises,
la gélatine à l'intérieur du tube A, pour entraîner les germes
qui ont pu y rester adhérents. Cela fait, on retire la bourre de
sûreté /, et à l'aide d'un fil de platine stérilisé on pousse à l'in-
térieur du tube A la bourre g. On replace la bourre de sûreté et
on agite doucement et à diverses reprises l'appareil, pour répar-
tir dans la gélatine les germes qui, ayant échappé au barbottage,
ont été retenus par la bourre g\

On peut alors procéder de deux façons, selon que l'on veut
employer la méthode de culture sur plaques, d'après M. Koch,
ou que l'onveut utiliser le tube A à la façon d'un tube d'Esmarch.

Dans le premier cas on aspire par le tube B, gradué à cet
effet, 2 centimètres cubes de gélatine que l'on étale sur une
plaque ; la gélatine totale donne ainsi cinq plaques. On laisse les

1. L'appareil a été construit sur nos indications, par M. Leune, 31, rue des
Deux-Ponts.

ANALYSli BACTÉRIOLOGIQUE DE L'AIR. 177

colonies se développer et on procède à leur numération, absolu-
ment comme cela se fait pour l'analyse de l'eau. En addition-
nant les colonies développées au bout de 4 à 5 jours sur les
o plaques, on a le nombre de germes de schizomycèles et de
moisissures (susceptibles de se développer sur la gélatine) que
renferme le volume d'air ayant traversé l'appareil'.

L'autre procédé est plus expéditif et a l'avantage de mettre
à l'abri de toute contamination ultérieure par les germes de l'air.
11 consiste à répandre la gélatine, après le barbottage, à la face
interne du tube A et à la faire prendre rapidement en plaçant
l'appareil horizontalement, et en le faisant tourner sous le jet
d'un robinet d'eau froide. — C'est alors une variante du tube
d'Esmarch ; mais nous donnons la préférence à la méthode des
plaques qui permet mieux l'examen des colonies.

Pour ne pas trop allonger ce travail, nous ne relaterons que
quelques-unes des nombreuses expériences comparatives que
nous avons faites dans les salles de l'hôpital Saint-Antoine et
dans le laboratoire de pathologie de la Faculté.

Expérience xi. 1H87, salle Roux, hôpital de Saint-Auloine. T. 16". H. 759.

[Méthode de Hesse.) 10 litres d'air passent en 30 minutes à travers un
tube de Hesse de 4 centimètres de diamètre et de 75 centimètres de long.
Au bout de 4 jours, on compte 53 colonies de bactéries et 4 de moisissures.

Expérience comparative avec la méthode de barbottage. On fait passer,
dans la même salie, au même moment, dans l'appareil à barbottage placé
à coté du tube de Hesse, 10 litres d'air. L'expérience a duré 9 minutes. Au
bout de 4 jours, les plaques donnent 335 colonies de bactéries et 15 de
moisissures.

ExpÉHiENCE XII. Hôpital Saint-Antoine, salle Marjolin. T. 19ii. H. 757.

{Méthode de Hesse.) 10 litres d'air passent en 30 minutes à travers le
tube de Hesse. Au bout de 4 jours, on compte 85 colonies de bactéries et
20 moisissures.

[Méthode de barbottage.) 10 litres d'air barbo tient en 10 minutes à travers
l'appareil. La numération sur les plaques donne au bout de 4 jours 555 co-
lonies de bactéries et 4 moisissures.

Expérience xiii. Hôpital Saint-Antoine, salle Roux. T. 19o. H. 758.

{Méthode de liesse.) 10 litres d'air passent en 30 minutes à travers un
tube de 3,5 centimètres de diamètre et 75 centimètres de longueur. Au bout
de 4 jours, on note le développement de 100 colonies bactériennes et de
3 moisissures.

1. Pour que la numération soit absolument rigoureuse, il faut avoir soin de
laisser la très petite quantité de gélatine qui reste dans ra[)pareil faire prise et
compter les quelques colonies qui peuvent encore s'y développer. On ajoutera ce
ctiilTre à celui qui est fourni par les plaques.

178 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

{Méthode de barbottuge.) Les plaques montrent, au bout de 4 jours,
531 colonies bactériennes et 8 moisissures.

Expérience xvii. 15 février 1888, laboratoire de la Faculté '. T. 11*^.
H. 7C4.

(Méthode de Fraukland.) 50 litres d'air passent en 15 minutes à travers
les bourres de coton de verre; l'aspiration se fait au moyen de la trompe à
eau. Les ballons de gélatine où les bourres ont été semées ont donné, au
bout de 4 jours, 95 colonies bactériennes et 20 de moisissures.

[Méthode de barbottage.) 50 litres d'air passent au même moment, et
également en 15 minutes, à travers l'appareil à barbottage. Les plaques
donnent au bout de 4 jours 141 colonies bactériennes et 15 moisissures.

ExpÉHiEXCE xvni. 16 février 1888, laboratoire de la Faculté de médecine.
T. 12«. H. 761.

{Méthode de Fnmkland.) 50 litres d'air passent en 13 minutes sur les
bourres en coton de verre; celles-ci, noyées dans deux ballons contenant de
la gélatine, donnent, au bout de 4 jours, 80 colonies bactériennes et
35 moisissures.

[Méthode de barbottage.) En même temps, et également en 13 minutes,
50 litres d'air barbottent dans notre appareil. Les plaques donnent au bout
de 4 jours 125 colonies bactériennes et 29 moisissures.

Expérience xxn. 19 février 1888, laboratoire de la Faculté. T. 12".

[Méthode de Pétri.) 50 litres d'air passent en 12 minutes cà travers les
liltres en sable, à l'aide de la trompe d'Alvergniat. Des godets de gélatine
ensemencés avec le sable chargé de germes montrent, au bout de 3 jours,
91 colonies de bactéries et 95 moisissures (la fenêtre de la pièce était
ouverte pendant la durée de l'expérience, de là sans doute le grand nom-
bre de moisissures).

[Méthode de barbottage.) Simultanément et pendant le même espace de
temps, on fait barbotter 50 litres d'air à travers notre appareil; les plaques,
au bout de 3 jours, donnent 185 colonies de bactéries et 91 moisissures.

Expérience xxiii. 21 février 1888, laboratoire de la Faculté. T. 13".

[Méthode de Pétri.) 50 litres d'air passent en 14 minutes à travers l'ap-
pareil de Pétri; l'aspiration est faite par la trompe d'Alvergniat. Les godets
à gélatine donnent au bout de 4 jours 88 colonies bactériennes et 65 moi-
sissures.

[Méthode de barbottage.) 50 litres barbottent en 14 minutes à travers
notre appareil, au même moment que se fait l'expérience précédente. Les
plaques, au bout de 4 jours, donnent 179 colonies bactériennes et 43 moi-
sissures.

Expérience xxiv. 24 février 1888, laboratoire de la Faculté. T. 13»,
H. 733.

[Méthode de Pelri.) On fait passer, à l'aide de la trompe, 50 litres d'air
à travers le filtre de sable; les godets ensemencés avec le sable chargé des

1. La pièce du laboratoire où ces expériences ont été faites est humide, froide
et peu fréquentée. — Les volumes d'air ont été mesurés à l'aide d'un compteur à
gaz.

ANALYSE BAGTERlOLOiîlQUE DE L'Alft. 179

germes ont donne', au bout de 4 jours, 40 colonies bactériennes et 9 moi-
sissures.

{Méthode de harbottage.) Au même moment et pendant le même temps
50 litres d'air barbottent à travers notre appareil; les plaques au bout de
4 jours ont donné 84 colonies bactériennes et 7 moisissures.

III

Dans le procédé qui vient d'être exposé, se trouvent écartés
la plupart des inconvénients qui ont fait rejeter jusqu'ici l'em-
ploi do procédés analogues. Le plus grave de ces inconvénients
tient à ce que l'air, en barbottant à travers un liquide albumi-
neux, y forme des bulles très volumineuses, qui remplissent
rapidement et débordent l'appareil, d'où l'impossibilité de faire
barbotter des quantités notables d'air avec une vitesse suffi-
sante. Grâce à l'artifice employé par nous, de l'addition d'une
goutte d'huile, nous avons supprimé complètement cet obstacle.
L'émulsion très fine que l'huile forme avec le liquide lui donne,
il est vrai, un aspect opalescent; mais c'est là, pour les cultures
sur plaques surtout, un inconvénient négligeable, rien n'étant
plus facile que de distinguer au microscope les gouttelettes
d'huile d'avec les colonies naissantes.

La bourre de coton placée à l'intérieur de la tubulure
de sortie de l'air retient les germes qui ont pu échapper
au harbottage et donne à celui-ci toute la sécurité nécessaire.
Du reste nous avons pu nous assurer, en semant ces bourres à
part dans de la gélatine stérilisée, qu'elles ne donnent en général
naissance, même quand de grandes quantités d'air ont barbotlé
rapidement à travers le liquide, qu'à quelques colonies de bac-
téries ou de moisissures. Le harbottage retient donc la grande
majorité des germes de l'air.

On a aussi exprimé la crainte, formulée surtout par
M. Fliigge, que pendant la durée du harbottage les germes
déposés dans le liquide nutritif n'aient déjà le temps de se mul-
tiplier, ce qui fausserait nécessairement les résultais de l'expé-
rience. On pourrait être tenté d'expliquer ainsi les chiffres plus
élevés que nous avons obtenus avec notre procédé, comparative-
ment aux autres. Il n'en est rien. Nous nous sommes assurés
qu'alors même que le harbottage dure près d'une heure, le nom-
bre des organismes n'augmente pas sensiblement dans le liquide.
Si l'expérience devait se prolonger davantage, on pourrait aisé-

180 ANNALES DE L'INSTITUT PASTEUR.

ment obvier à ce danger. Le barbottage, au lieu de s'effectuer
dans du bouillon gélatine, qui pour rester liquide doit être main-
tenu à une température de 25°, peut se faire dans du simple
bouillon que l'on maintient à 0°, en plaçant l'appareil dans la
glace. Le barbottage terminé, on ajoute à ce bouillon un vo-
lume égal de gélatine nutritive stérilisée, on mélange et on fait
les plaques.

La méthode employée par nous présente sur celles qui ont
été suivies jusqu'ici plusieurs avantages. L'appareil est très
simple et facilement maniable. Il permet de recueillir tous les
germes d'un volume considérable d'air, dans un temps relative-
ment court, condition éminemment favorablepour les recherches
météorologiques. L'opération peut s'effectuer sur de l'air animé
des vitesses les plus différentes et à l'aide des pressions les plus
variables. Enfin, la méthode est d'une 5e?m6î7z7e plus grande que
les autres, c'est-à-dire qu'elle permet de déceler, toutes choses
égalas d'ailleurs, un plus grand nombre de colonies bacté-
riennes que celui que l'on obtient parles autres procédés*.
Cela tient sans doute à ce que les germes des bactéries ne se trou-
vent pas dans l'air à l'état d individus isolés, mais sous forme
d'agrégats de plusieurs individus. Dans les procédés de M. Hesse,
M. Pétri et M. Frankland, ces agrégats ne sont pas dissociés ou
le sont insuffisamment; ce résultat est obtenu ave